氣相色譜測定小麥中8種有機氯農(nóng)藥殘留量

王錦云，王 恒，蔣梅峰，李 鵬

（1.山西省糧油科學研究所，山西太原 030024；2.山西糧食質(zhì)量監(jiān)測中心，山西太原 030024）

氣相色譜測定小麥中8種有機氯農(nóng)藥殘留量

王錦云1，王 恒2，*蔣梅峰1，李 鵬1

（1.山西省糧油科學研究所，山西太原 030024；2.山西糧食質(zhì)量監(jiān)測中心，山西太原 030024）

建立了氣相色譜檢測小麥中有機氯農(nóng)藥殘留量的方法。樣品中的目標物采用乙腈提取，經(jīng)凝膠滲透色譜凈化后，采用氣相色譜-電子捕獲檢測器檢測。結(jié)果表明，小麥樣品基質(zhì)三水平添加條件下，8種農(nóng)藥的回收率（n=6）為61.45%～105.21%，相對標準偏差0.59%～9.33%，最低檢出限為0.003～0.006 mg/kg。該方法簡便快速、靈敏度高，適合于小麥中有機氯農(nóng)藥殘留的檢測。

氣相色譜法；有機氯；凝膠滲透色譜法；小麥

20世紀40～70年代初，有機氯農(nóng)藥（OCPs） 在世界各國被大量生產(chǎn)與廣泛使用。然而，由于它們具有難降解、高殘留、脂溶性、半揮發(fā)、可通過食物鏈生物富集及放大等特征，對環(huán)境生態(tài)、動植物及人類產(chǎn)生了極大的危害，因此自20世紀70年代開始，六六六（HCHs）、滴滴涕（DDTs） 等有機氯農(nóng)藥陸續(xù)被各國閑置或禁止生產(chǎn)和使用。但是，由于當時使用量大，在環(huán)境中具有持久污染性，至今仍能在環(huán)境、原糧、食品中檢測到[1]。

關于小麥中有機氯農(nóng)藥殘留的分析方法、檢出限及精密度主要參考以下標準進行：GB/T 5009.19—2008食品中有機氯農(nóng)殘多組分殘留量的測定、GB/T 19649—2006糧谷中475種農(nóng)藥及相關化學品殘留量的測定氣相色譜-質(zhì)譜法、GB/T 27404—2008實驗室質(zhì)量控制規(guī)范食品理化檢測、GB/T 5009.1—2003食品衛(wèi)生檢驗方法理化部分總則。試驗通過分析比較前2種國標方法，GB/T 5009.19—2008中樣品提取方法為樣品中加入水、丙酮振蕩30 min，然后加入氯化鈉搖勻，再加入石油醚振蕩30 min，靜置經(jīng)無水硫酸鈉干燥、濃縮，乙酸乙酯∶環(huán)己烷（1∶1）溶解，GPC凈化。此方法的缺點為提取方法較為復雜、使用試劑種類較多、提取時間過長；優(yōu)點是采用GPC凈化，此方法凈化效果好、對儀器污染小、操作簡單方便、減少人為因素導致的試驗誤差。GB/T 19649—2006中樣品提取方法為樣品加入硅藻土、乙腈提取，采用Envi-18柱、Envi-Carb+Sep-Pak NH2凈化，此方法的優(yōu)點為提取方法簡單，而缺點是凈化方法過程繁瑣、復雜，不易批量操作。

因此，試驗主要結(jié)合此2種國標方法的優(yōu)點并根據(jù)實際工作情況加以優(yōu)化、改良。建立了凝膠滲透色譜凈化－氣相色譜法同時測定小麥中有機氯農(nóng)藥的殘留分析方法，即小麥經(jīng)乙腈提取、濃縮、乙酸乙酯∶環(huán)己烷（1∶1） 定容，經(jīng)GPC凈化、氮氣吹干、丙酮定容，采用氣相色譜法HP-5毛細管色譜柱和電子捕獲檢測器（ECD） 測定。此方法具有快速、便于批量操作、靈敏準確的特點，能滿足糧食中有機氯農(nóng)藥殘留檢測需要。

1 材料和方法

1.1 儀器與試劑

1.1.1 儀器設備

瓦里安450-GC型氣相色譜儀，配有ECD檢測器；Varian CP8410型自動進樣器；Perp Elite-GVS型凝膠滲透色譜儀；IKA T25R高速分散均質(zhì)機；RE52-99型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。

1.1.2 試劑

乙腈、丙酮、乙酸乙酯、環(huán)己烷，以上試劑均為色譜級。

農(nóng)藥標準品：六六六、DDT、狄氏劑、艾氏劑、七氯等標準溶液（100 μg/mL），均由農(nóng)業(yè)部環(huán)境監(jiān)測中心提供。

混合標準溶液配制：分別移取上述標液各1 mL容量瓶中，丙酮定容至刻度。該混合標液中的農(nóng)藥含量均為 1 μg/mL。

1.2 樣品前處理

1.2.1 提取

準確稱取50 g樣品放入250 mL的三角瓶中，加入乙腈120.0 mL，在均質(zhì)機中高速均漿2 min后靜置，上清液用濾紙過濾，濾液收集到250 mL的三角瓶內(nèi)，殘渣再用80 mL的乙腈重復提取1次，合并2次提取液。

收集液于40℃水浴旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至干，然后用乙酸乙酯∶環(huán)己烷（1∶1，V/V） 溶液定容至20 mL，待凈化。

1.2.2 GPC凈化

凝膠色譜柱為Bio-Beads SX3（20 mm×300 mm）；流動相：乙酸乙酯∶環(huán)己烷（1∶1，V/V）；流速5.0 mL/min；進樣量5 mL；開始收集時間13 min；結(jié)束時間25 min。

1.2.3 濃縮定容

將通過GPC的洗脫液用N2吹干，用丙酮溶液定容至2 mL，供氣相色譜分析。

1.3 氣相色譜測定

色譜柱：HP-5毛細管柱（30 m×0.32 mm×0.25 μm）；進樣口溫度：250℃；色譜柱升溫程序：初始溫度50℃，保持1 min；以25℃/min升至100℃，然后以5℃/min升至300℃，保持5 min。進樣方式：分流比為20∶1；進樣量1 μL；檢測器溫度300℃；載氣：氮氣（純度≥99.999%）；流速1.5 mL/min。

2 結(jié)果與討論

2.1 標準色譜圖和線性范圍

8種有機氯農(nóng)藥混合標準色譜見圖1。

圖1 8種有機氯農(nóng)藥混合標準色譜

用丙酮稀釋混合標準儲備液配制的混合標準溶液做線性回歸分析，以峰面積Y為縱坐標，質(zhì)量濃度X為橫坐標，得到回歸方程，最終得到有機氯農(nóng)藥的線性回歸方程、相關系數(shù)，同時以3倍空白值的標準偏差（測定次數(shù)n≥20）相對應的質(zhì)量濃度計算檢出限。計算公式為：

式中：b——標準曲線回歸方程中的斜率，響應值，μg；

S——儀器噪音的標準偏差；

n——樣品稀釋倍數(shù)。

結(jié)果表明，各農(nóng)藥對照品在0.04～0.75 μg/mL范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關系，相關系數(shù)R≥0.990 5，檢出限為 0.003～0.006 mg/kg。

8種有機氯農(nóng)藥的線性回歸方程與相關系數(shù)見表1。

表1 8種有機氯農(nóng)藥的線性回歸方程與相關系數(shù)

2.2 樣品測定

取1 μL 2.3中的樣品溶液進樣，用保留時間定性，以峰面積定量。

小麥空白基質(zhì)色譜見圖2，小麥加標回收色譜見圖3。

2.3 準確度與精密度試驗

以小麥空白基質(zhì)進行加標回收和精密度試驗，添加量主要參照農(nóng)藥在小麥中的最大殘留限量進行添加，考查方法的準確度和精密度。

圖2 小麥空白基質(zhì)色譜

圖3 小麥加標回收色譜

準確稱取50 g若干份小麥樣品，按七氯、狄氏劑、艾氏劑分別為0.01，0.02，0.04 mg/kg；六六六、DDT分別為0.025，0.050，0.100 mg/kg的3個添加水平分別加入相應量的農(nóng)藥混合標準溶液，進行加標回收試驗，每個添加水平做6組平行樣品，按照試驗方法進行提取、凈化和測定，計算平均回收率和相對標準偏差（RSD）。

小麥中8種有機氯農(nóng)藥的加標回收和精密度試驗 （n=6） 見表 2。

結(jié)果表明，小麥樣品中添加8種農(nóng)藥在3個添加水平下的平均回收率為61.45%～105.21%，相對標準偏差為0.59%～9.33%。因此，該方法測定小麥中有機氯農(nóng)藥殘留的準確度和精密度良好，符合有機氯農(nóng)殘的分析測定要求。

3 結(jié)論

主要對2種國家標準測定有機氯農(nóng)殘的方法進行了對比、分析。在此基礎上結(jié)合試驗中的具體操作進行方法優(yōu)化與改進。最終確定試驗中的樣品前處理方法，方法處理簡便、快速，凈化效果好，分析靈敏、可靠，準確度和精密度較高，滿足分析測定要求，便于應用在小麥中同時分析多種有機氯農(nóng)藥殘留的批量檢測工作。

表2 小麥中8種有機氯農(nóng)藥的加標回收和精密度試驗（n=6）

[1]曹孝文，皺寬，徐丹，等，食品中有機氯農(nóng)藥與多氯聯(lián)苯氣相色譜-質(zhì)譜分析的離子化方式 [J].巖礦測試，2013，32（1）：22-27.◇

Determination of 8 Organic Chlorine Pesticide Residues in Wheat by Gas Chromatography

WANG Jinyun1，WANG Heng2，*JIANG Meifeng1，LI Peng1
（1.Shanxi Institute of Grain and Oil Science，Taiyuan，Shanxi 030024，China；2.Shanxi Food Quality Monitoring Center，Taiyuan，Shanxi 030024，China）

A method was established for the determination of 8 organic chlorine pesticide residues in wheat，using acetonitrile extraction，GPC clean-up method and gas chromatography with ECD.The results showed that the average recovery rate in wheat at three levels were 61.45%～105.21%，the relative standard deviation 0.59%～9.33%，the minimum detection limit ranged 0.003～0.006 mg/kg.The determination method with simplicity,rapidity and high sensitivity could be used for determination of organic chlorine pesticide residues to ensure the quality of wheat.

gas chromatography（GC）；organic chlorine pesticide；GPC；wheat

X839.2

A

10.16693/j.cnki.1671-9646（X）.2017.11.012

1671-9646（2017） 11a-0039-03

2017-09-11

王錦云（1987— ），女，本科，助理工程師，研究方向為糧油科學研究、分析檢驗。

*通訊作者：蔣梅峰（1982— ），女，碩士，工程師，研究方向為糧油科學研究、分析檢驗。