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      蒙藥鹽生肉蓯蓉的研究現(xiàn)狀

      2018-01-18 22:49:44
      中國民族醫(yī)藥雜志 2018年9期
      關(guān)鍵詞:尿囊素鹽生肉蓯蓉

      王 嘉 高 磊

      (1.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué),內(nèi)蒙古 呼和浩特 010059; 2.內(nèi)蒙古自治區(qū)藥品檢驗(yàn)研究院,內(nèi)蒙古 呼和浩特 010020)

      荒漠肉蓯蓉Cistanche deserticola Y.C.Ma在國內(nèi)外享有很高的聲譽(yù)?!吨袊幍洹?015年版收載的肉蓯蓉為荒漠肉蓯蓉和管花肉蓯蓉Cistanche tubulosa (Schrenk) R.Wight。據(jù)本草考證,肉蓯蓉的正品為荒漠肉蓯蓉和鹽生肉蓯蓉Cistanche salsa(C.A.Mey)G.Beck2種[1]。鹽生肉蓯蓉,又稱白刺大蕓,蒙名呼吉日色格-察干-高要,是列當(dāng)科肉蓯蓉屬的根寄生植物, 主產(chǎn)于我國的內(nèi)蒙古、甘肅和新疆。鹽生肉蓯蓉為內(nèi)蒙古地方習(xí)用蒙藥材,本文結(jié)合近10年的文獻(xiàn)報(bào)道,對(duì)鹽生肉蓯蓉的本草考證、資源分布、顯微特征、化學(xué)成分和藥理作用等方面進(jìn)行綜合分析,為鹽生肉蓯蓉的質(zhì)量控制和進(jìn)一步開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。

      1 本草考證

      1.1 歷史考證 吳氏云:肉蓯蓉,一名肉松蓉。神農(nóng)、黃帝:咸。雷公:酸。李氏:小溫。生河西山陰地。長三、四寸,叢生?;虼?、雁門,二月至八月采,陰干用之[1]。河西泛指如今的甘肅西北部及內(nèi)蒙古西部,代郡、雁門在如今的山西省。結(jié)合其產(chǎn)地描述,判斷是肉蓯蓉屬植物,但長度偏小,描述沙蓯蓉( Cistanche sinensis) 或鹽生蓯蓉( Cistanche salsa) 可能性較大。后經(jīng)考證為鹽生肉蓯蓉。1960年馬毓泉教授研究?jī)?nèi)蒙古肉蓯蓉屬的標(biāo)本,并發(fā)表了“內(nèi)蒙古肉蓯蓉屬植物的研究",正式啟用了肉蓯蓉作為Cistanche的中名屬名,確定內(nèi)蒙古有該屬植物4種:鹽生肉蓯蓉(C salsa)G.Beck)、沙蓯蓉(Cistanche sinensis G.Beck)、迷肉蓯蓉(Cistanche ambigua(Bge)G.Beck)和一個(gè)新種肉蓯蓉(C.deserticola)[2]。鹽生肉蓯蓉是1963 年版中國藥典的收載種,同時(shí)也被多個(gè)地方標(biāo)準(zhǔn)《內(nèi)蒙古中藥材標(biāo)準(zhǔn)》·1988 年版、《新疆維吾爾自治區(qū)藥品標(biāo)準(zhǔn)》·1987 年版、《寧夏中藥材標(biāo)準(zhǔn)》·1993 年版、《甘肅省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》·2009 年版所收載[3]。

      1.2 資源分布和生長環(huán)境 鹽生肉蓯蓉生于沙漠、荒漠草原帶及荒漠區(qū)的湖盆低地、沙丘、沙地及鹽堿較重的地方,海拔700~2650 m。在中國主要分布在內(nèi)蒙古、新疆、寧夏、甘肅等地。內(nèi)蒙古作為鹽生肉蓯蓉道地產(chǎn)區(qū),主產(chǎn)于錫林郭勒盟西北部、烏蘭察布市北部、巴彥淖爾市、伊克昭盟西部及阿拉善盟。

      1.3 植物形態(tài)特征 鹽生肉蓯蓉多寄生于藜科、檉柳科、蒺藜科等半灌木植物的根部,常見的寄主有鹽爪爪屬(Kalidium)、駝絨藜(Ceratoides)、假木賊屬(Anabasis)、堿篷屬(Suaeda)、紅沙屬(Reamuria)、珍珠豬毛菜(Salsola passerine)、小果白刺(Nitraria sibirica)、四合木(Tetraena mongolica)。植株高10~45 cm ,偶見少數(shù)須根。莖鮮時(shí)為白色,斷面常白色,稀紅紫色,維管束排列成波狀或深波狀圓環(huán);不分枝或稀自基部分2~3枝,直徑1~5 cm ,向上漸變窄。葉卵狀長圓形,兩面無毛。穗狀花序,苞片卵形或長圓狀針形。小苞片2枚,長圓狀披針形,與花萼等長或稍長。花萼鐘狀,淡黃色、紫褐色或白色,長度為花冠的三分之一,頂端5淺裂,裂片卵形或近圓形?;ü谕矤铉娦?,筒近白色或淡黃白色,裂片淡紫色、紫色或白色。雄蕊4,子房卵形?;ㄖ艄研位驒E圓形。種子近球形。花期4~6月,果期7~8月。

      2 顯微特征

      2.1 莖的橫切面 徐曉琴[4]等對(duì)新疆地產(chǎn)3種肉蓯蓉進(jìn)行了顯微鑒別研究。其中,鹽生肉蓯蓉橫切面呈深褐色,質(zhì)地堅(jiān)硬,維管束排列呈圓齒深波狀環(huán),髓部明顯。表皮為1列整齊而緊密長方形或類長方形細(xì)胞,皮層由數(shù)十層薄壁細(xì)胞組成,薄壁細(xì)胞內(nèi)含塊狀結(jié)晶和棕黃色粘塊狀物, 呈類長方形或不規(guī)則形, 偶見葉跡維管束??拷兄S管束一側(cè)的薄壁細(xì)胞呈多角不規(guī)則,排列緊密。中柱維管束有百余個(gè),緊密排列成規(guī)則的圓齒深波狀環(huán)。維管束較大為無限外韌型,呈寬卵圓形或?qū)捔庑?,無環(huán)繞的維管束鞘。韌皮部外側(cè)有厚壁細(xì)胞呈短尾狀,韌皮部由薄壁細(xì)胞組成,木質(zhì)部導(dǎo)管較多,呈圓形壁厚。髓部發(fā)達(dá),占橫切面1/3,中央常呈中空,髓部細(xì)胞大,髓射線不明顯。

      2.2 粉末與解離組織特征 粉末常呈黑褐色,淀粉粒較少,類球形或橢圓形,直徑14~35μm,臍點(diǎn)為裂縫狀或三叉狀,層紋不明顯。多為單粒,偶見2分粒復(fù)粒,導(dǎo)管主要為螺紋、網(wǎng)紋導(dǎo)管。薄壁細(xì)胞類長方形,塊狀晶體較多[4]。何松春[5]等人對(duì)肉蓯蓉類中藥進(jìn)行了顯微鑒定研究,其中描述了鹽生肉蓯蓉臍點(diǎn)點(diǎn)狀、U狀、人字狀、放射狀等??赏ㄟ^臍點(diǎn)形狀與肉蓯蓉、管花肉蓯蓉進(jìn)行區(qū)別。

      3 化學(xué)成分的研究

      隨著分離提取和檢測(cè)技術(shù)的快速發(fā)展,近年來,國內(nèi)外從鹽生肉蓯蓉的化學(xué)成分中已分離出多種類型的物質(zhì),如苯乙醇苷類、環(huán)烯醚萜苷類、多糖、甜菜堿和甘露醇、尿囊素、半乳糖醇等。

      3.1 苯乙醇苷類 苯乙醇苷類是肉蓯蓉中的主要有效活性成分,具有壯陽、抗氧化、抗衰老、增強(qiáng)記憶等功能。也是肉蓯蓉質(zhì)量控制的主要檢測(cè)指標(biāo)。楊建華[6]等人首次對(duì)新疆原生態(tài)環(huán)境下人工種植的鹽生肉蓯蓉藥材進(jìn)行了化學(xué)成分的研究,分離得到7個(gè)苯乙醇苷類化合物,鑒定為松果菊苷、肉蓯蓉苷A、毛蕊花苷、 異毛蕊花苷、2’-乙酰基毛蕊花苷、管花苷B、1-O-[2-(4- 羥基苷基)乙基]-6-O-(E)-香豆酰基-β-D 吡喃葡萄糖苷。鞠愛華[7]等用RP-HPLC法測(cè)定鹽生肉蓯蓉中松果菊苷與麥角甾苷的含量。研究表明鹽生肉蓯蓉(特別是產(chǎn)自內(nèi)蒙古四子王旗)中麥角甾苷與松果菊苷含量遠(yuǎn)高于中國藥典2005年版收載的肉蓯蓉Cistanche deserticola Y.C.Ma 2種成分的總量(不得低于0.3%)。

      3.2 環(huán)烯醚萜苷類 環(huán)烯醚萜類是肉蓯蓉屬植物又一主要有效活性成分,此類化合物廣泛存在于植物界中。楊建華[8]等采用大孔樹脂、活性碳等柱色譜技術(shù)分離純化首次對(duì)人工栽培鹽生肉蓯蓉的化學(xué)成分進(jìn)行了研究,分離得到2個(gè)環(huán)烯醚萜苷類化合物,8-表馬錢子苷酸和益母草苷,其中 8 -表馬錢子苷酸含量較高,可以作為鹽生肉蓯蓉生藥及其制劑質(zhì)量控制的參考指標(biāo)。

      3.3 多糖類 肉蓯蓉多糖可以增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能,具有明顯的抗脂質(zhì)過氧化功能。蒽酮-硫酸法和苯酚-硫酸法是測(cè)定多糖的常用方法。王松芝[9]等以苯酚-硫酸顯色法對(duì)鹽生肉蓯蓉的多糖進(jìn)行了含量測(cè)定。李莉[10]等采用蒽酮-硫酸法對(duì)不同品種肉蓯蓉進(jìn)行多糖含量的測(cè)定,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,不同品種肉蓯蓉多糖含量存在差異,多糖含量依次為:肉蓯蓉>鹽生肉蓯蓉>管花肉蓯蓉。其中,鹽生肉蓯蓉多糖含量為9.26%。

      3.4 甜菜堿和甘露醇 甜菜堿是人體唯一可替代葉酸或S-腺苷蛋氨酸的甲基供體,同時(shí)還具有降壓、抗?jié)?、抗脂肪肝等活性。甘露醇是肉蓯蓉潤腸通便的活性成分[11]。李斌[12]等在最大吸收波長 413 nm 處采用分光光度法測(cè)定鹽生肉蓯蓉中甘露醇的含量,生品鹽生肉蓯蓉中甘露醇的含量高于肉蓯蓉飲片。王松芝等采用顯色法和薄層色譜法鑒別甜菜堿和甘露醇,定性鑒別反應(yīng)均成陽性。

      3.5 尿囊素、半乳糖醇 麥吾菊丹·阿力甫等[13]采用薄層色譜法鑒別出鹽生肉蓯蓉乙醇提取物中含有尿囊素和半乳糖醇,且不同產(chǎn)地鹽生肉蓯蓉中均含有尿囊素和半乳糖醇。張慧文[14]等利用大孔吸附樹脂色譜、硅膠柱色譜、薄層色譜等多種色譜法和光譜技術(shù)首次從鹽生肉蓯蓉中獲得了尿囊素和甘露醇,并首次建立了鹽生肉蓯蓉的反相高效液相色譜指紋圖譜,為鹽生肉蓯蓉質(zhì)量控制提供科學(xué)依據(jù)。

      4 藥理作用的研究

      研究表明,鹽生肉蓯蓉除具有補(bǔ)腎壯陽、增強(qiáng)免疫功能、潤腸通便、抗衰老和抗氧化等傳統(tǒng)功效外[15],新的藥理作用仍在不斷發(fā)現(xiàn)中,如保護(hù)肝臟、神經(jīng)保護(hù)、降脂作用等。

      4.1 抗衰老和抗氧化作用 木合布力·阿布力孜[16]等在研究中發(fā)現(xiàn),從鹽生肉蓯蓉提取得到的肉蓯蓉總苷以0.25 g,0.50 g 和0.75 g L-1濃度,對(duì)自由基的抑制率分別為56%、62%和67%,其抗氧化活性與EGB761類似。表明,肉蓯蓉總苷在HL-60細(xì)胞氧化系統(tǒng)中具有很強(qiáng)的抗自由基氧化活性。吳海虹[17]等對(duì)運(yùn)用有機(jī)溶劑萃取法和大孔吸附樹脂分離法對(duì)內(nèi)蒙古鹽生肉蓯蓉苯乙醇苷(PEG)粗提液進(jìn)行進(jìn)一步分離純化,并對(duì)其進(jìn)行抗氧化活性研究。實(shí)驗(yàn)研究表明,苯乙醇苷(PEG)抗脂質(zhì)過氧化能力與BHT相當(dāng),但顯著高于VE,苯乙醇苷(PEG)具有較強(qiáng)的抗氧化能力。

      4.2 保護(hù)肝臟作用 王艷芳[18]等通過建立小鼠酒精性肝損傷模型,以肝功能生化指標(biāo)以及肝臟組織病理學(xué)變化為考察指標(biāo),研究鹽生肉蓯蓉總苷對(duì)實(shí)驗(yàn)性酒精性肝損傷的保護(hù)作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,鹽生肉蓯蓉總苷保護(hù)肝細(xì)胞損傷,可通過降低應(yīng)細(xì)胞膜通透性增加,釋放入血液中的ALT、AST含量; 可升高SOD的活性,清除因酒精在機(jī)體代謝過程中產(chǎn)生的大量自由基; 可降低MDA形成,阻止其損傷組織細(xì)胞的膜性結(jié)構(gòu)。鹽生肉蓯蓉總苷對(duì)小鼠酒精性肝損傷具有保護(hù)作用,且存在量效關(guān)系。

      4.3 神經(jīng)保護(hù)作用 羅蘭[19]等研究鹽生肉蓯蓉苯乙醇苷成分對(duì)β淀粉樣蛋白25-35誘導(dǎo)的大鼠嗜鉻細(xì)胞瘤PC12細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用,實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明,GCs各劑量組細(xì)胞數(shù)目顯著增多,細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化明顯改善,細(xì)胞的存活率增高、乳酸脫氫酶活性和凋亡率降低,GCs對(duì)β淀粉樣蛋白25-35誘導(dǎo)的大鼠嗜鉻細(xì)胞瘤PC12細(xì)胞凋亡的具有明顯的保護(hù)作用。

      4.4 降脂作用 楊建華[20]采用酵母雙雜交技術(shù),考察了肉從蓉中天然尿囊素對(duì)高密度脂蛋白中主要成分載脂蛋白apo-AI與其受體B族I型清道夫受體(BSR-BI)之間的相互作用,發(fā)現(xiàn)尿囊素可增強(qiáng)apo-AI與SR-BI之間的相互作用,提示其具有一定的降脂活性。

      5 質(zhì)量分析

      鹽生肉蓯蓉作為內(nèi)蒙古地方習(xí)用藥材,其質(zhì)量分析對(duì)于保證用藥安全及相關(guān)產(chǎn)品的研究尤為重要。楊建華[20]等采用HPLC法建立了鹽生肉從蓉和荒漠肉從蓉中尿囊素的含量測(cè)定方法,為藥材質(zhì)量控制提供參考指標(biāo)。還首次以8-表馬錢子苷酸和尿囊素為考察指標(biāo),建立了測(cè)定它們?cè)谌鈴娜厮幉闹械亩糠治龇椒?。曹苑[21]等按照《中國藥典》2010 年版一部附錄中的水分測(cè)定第一法、總灰分和酸不溶性灰分測(cè)定法、浸出物測(cè)定法、重金屬檢查法和砷鹽檢查法測(cè)定11 批鹽生肉蓯蓉藥材水分、灰分、浸出物等質(zhì)量評(píng)價(jià)參數(shù)。測(cè)定結(jié)果為鹽生肉蓯蓉藥材水分不宜超過10%,總灰分不宜超過12%,酸不溶性灰分不宜超過1.7%,65%乙醇熱浸法浸出物不宜低于45% ,重金屬( Pb2+ ) 不超過0.000 5%,砷鹽不超過0.000 1%。這為鹽生肉蓯蓉的質(zhì)量控制提供一定的參考依據(jù)。

      6 人工種植與組織培養(yǎng)

      對(duì)于鹽生肉蓯蓉的人工種植技術(shù)相對(duì)滯后,目前在吉木薩爾種植基地有種植。因此,需要對(duì)鹽生肉蓯蓉進(jìn)行全面的考察與研究,選擇有效成分高、藥理活性強(qiáng)的品種進(jìn)行大面積人工栽培。

      組織培養(yǎng)作為擴(kuò)大鹽生肉蓯蓉生物藥源的另一條有效方法,可以將鹽生肉蓯蓉的自然生產(chǎn)轉(zhuǎn)變?yōu)楣I(yè)化生產(chǎn),并且可以通過代謝調(diào)控等手段大幅度提高其特定有效成分的含量。郭志剛[22]等對(duì)碳源、生長素和培養(yǎng)條件對(duì)細(xì)胞中松果菊苷 、洋丁香酚苷(類葉升麻苷)和2 一乙?;蠖∠惴榆?種苯乙醇苷類化合物合成的影響做了研究,結(jié)果鹽生肉蓯蓉愈傷組織中的主要成分與天然肉蓯蓉基本相同,而且愈傷組織中的松果菊苷、洋丁香酚苷 (類葉升麻苷 )和 2 一乙酰基洋丁香酚苷含量高于天然肉蓯蓉 。因此采用鹽生肉蓯蓉的愈傷組織或細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)可以生產(chǎn)出肉蓯蓉的有效成分。趙琳[23]等利用傅里葉變換紅外光譜(FTIR)和HPLC技術(shù)對(duì)肉蓯蓉藥材與鹽生肉蓯蓉培養(yǎng)細(xì)胞的主要成分進(jìn)行對(duì)比研究。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,鹽生肉蓯蓉培養(yǎng)細(xì)胞中所含成分種類較多 ,且大部分含量較高 ,其中洋丁香酚苷(類葉升麻苷 )和松果菊苷的含量大幅度高于肉蓯蓉藥材。因此可以利用植物細(xì)胞培養(yǎng)的方式 ,大量生產(chǎn)鹽生肉蓯蓉細(xì)胞 ,然后從中提取苯乙醇苷類活性成分。

      7 總結(jié)與展望

      近年來,對(duì)于肉蓯蓉屬的研究,還局限于《中國藥典》規(guī)定的荒漠肉蓯蓉和管花肉蓯蓉,而對(duì)鹽生肉蓯蓉和沙蓯蓉的研究相對(duì)較少。目前,從鹽生肉蓯蓉中發(fā)現(xiàn)的化合物主要有苯乙醇苷類、環(huán)烯醚萜苷類、多糖、甜菜堿、甘露醇、尿囊素和半乳糖醇。在藥理作用方面,鹽生肉蓯蓉除具有補(bǔ)腎壯陽,潤腸通便等傳統(tǒng)功效外,還具有抗衰老和抗氧化、保護(hù)肝臟、增強(qiáng)記憶、神經(jīng)保護(hù)和降脂等作用。鹽生肉蓯蓉作為肉蓯蓉的來源之一,在化學(xué)成分研究的基礎(chǔ)上,應(yīng)加強(qiáng)對(duì)鹽生肉蓯蓉進(jìn)行廣泛的生物活性篩選,發(fā)現(xiàn)新的臨床用途。同時(shí)為了保護(hù)野生鹽生肉蓯蓉,而又能滿足實(shí)驗(yàn)研究與中藥產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展,應(yīng)提倡人工栽培及大規(guī)模規(guī)范化種植研究,并利用現(xiàn)代生物組織培養(yǎng)技術(shù)對(duì)其進(jìn)行研發(fā),使得這一寶貴的資源得到充分的研究與應(yīng)用,從而推動(dòng)鹽生肉蓯蓉的進(jìn)一步發(fā)展。

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