華欣 朱曉莉

肺癌是現(xiàn)階段發(fā)病率及病死率最高的惡性腫瘤之一，其中約85%為非小細(xì)胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）[1]。一般情況下，NSCLC的發(fā)生發(fā)展是由多途徑、多因素共同作用的結(jié)果，其中腫瘤新生血管的形成在腫瘤增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移的過程中起到重要作用[2]。一方面，腫瘤組織想要生長(zhǎng)必須依賴新生血管為其提供血流灌注，給予營養(yǎng)物質(zhì)，從而增強(qiáng)其增殖和侵襲活力；另一方面，新生血管的內(nèi)皮通透性高，癌細(xì)胞容易突破內(nèi)層，浸潤(rùn)周圍器官和組織，也可利用新生血管通過血液循環(huán)將原發(fā)癌細(xì)胞送至轉(zhuǎn)移的靶器官[3]。

腫瘤新生血管形成過程復(fù)雜，由多個(gè)促進(jìn)因子、抑制因子共同調(diào)控，當(dāng)促進(jìn)血管生成的因子作用強(qiáng)于抑制血管生成的因子時(shí)，腫瘤新生血管便開始生成。血管生成素-2（angiopoietin-2,Ang-2）是目前研究較為深入且重要的促血管生成因子，已被證實(shí)Ang-2在NSCLC組織、血清中異常表達(dá)[4]，然而Ang-2的表達(dá)與癌細(xì)胞增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移之間的關(guān)系仍有待探索，這也對(duì)尋找NSCLC治療的新靶點(diǎn)有重要指導(dǎo)意義。

1 Ang-2的生物學(xué)作用

1.1 Ang家族及Ang-2的生物學(xué)作用 血管生成素家族包括Ang-1、Ang-2、Ang-3、Ang-4，它們都可與酪氨酸激酶受體Tie2結(jié)合，啟動(dòng)或調(diào)控血管生成過程，其中Ang-1、Ang-2與血管生成的關(guān)系最為密切。Ang-1在正常組織中表達(dá)廣泛，與Tie2受體結(jié)合后可驅(qū)化附近的血管支持細(xì)胞如平滑肌細(xì)胞和周細(xì)胞至血管內(nèi)皮細(xì)胞周圍，使內(nèi)皮細(xì)胞和周圍支持細(xì)胞緊密連接，從而穩(wěn)定血管，最終起到限制腫瘤新生血管生成、抑制腫瘤生長(zhǎng)的作用[5]。Makinde等[6]發(fā)現(xiàn)，Ang-1或Tie2蛋白缺乏均會(huì)影響到本身血管的完整性，使小鼠死于胚胎期，證實(shí)了Ang-1作為血管穩(wěn)定因子的重要作用。

Ang-2主要由血管內(nèi)皮細(xì)胞及內(nèi)皮旁細(xì)胞分泌，正常情況下在胎盤、子宮、卵巢中表達(dá)[7]。在缺氧或炎癥反應(yīng)時(shí)會(huì)引起Ang-2的異常釋放，其作為Ang-1的天然拮抗劑，競(jìng)爭(zhēng)性地與Tie2結(jié)合，從而阻斷Ang-1的穩(wěn)定血管作用，導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞與周圍細(xì)胞的連接離斷，引起內(nèi)皮細(xì)胞的不穩(wěn)定，由此造成血管失穩(wěn)和內(nèi)皮活化，在血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）存在的情況下，Ang-2會(huì)促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞接受VEGF等血管生成誘導(dǎo)劑的出芽信號(hào)，使腫瘤組織內(nèi)的新生血管持續(xù)生成[8]。目前已發(fā)現(xiàn)Ang-2/Tie2系統(tǒng)在多種惡性腫瘤的組織、血液中表達(dá)升高，并與腫瘤微血管密度（intratumoral microvessel density,IMVD）、臨床分期、預(yù)后等關(guān)系密切，有望成為重要的抗腫瘤血管形成靶點(diǎn)[9]。

1.2 Ang-2和VEGF的相互作用 主要的內(nèi)皮細(xì)胞特異性生長(zhǎng)因子除了Ang家族外，還有VEGF家族。VEGF是目前最強(qiáng)的促血管生成活性分子，其家族成員包括VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D及其受體VEGFR-1、VEGFR-2、VEGFR-3[10]。腫瘤來源的VEGF可促進(jìn)其本身的分泌，放大促血管生成信號(hào)，并可在肺癌細(xì)胞系中通過PI3K/AKT、RAS/ERK和STAT3等信號(hào)通路誘導(dǎo)Ang-2等各種血管生成因子的顯著分泌，形成血管生成因子網(wǎng)絡(luò)，共同調(diào)節(jié)腫瘤血管生成[11]。腫瘤組織生長(zhǎng)到一定體積時(shí)，會(huì)發(fā)生不同程度的缺氧。在常見的肺癌細(xì)胞株A549中研究發(fā)現(xiàn)，缺氧會(huì)刺激細(xì)胞分泌缺氧誘導(dǎo)因子（hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α）、VEGF、Ang-2的生成，這種表達(dá)依賴于PI3K/Akt信號(hào)通路途徑[12]。現(xiàn)已證實(shí)[13]，Ang-2與VEGF在腫瘤新生血管生成上關(guān)系密切，且具有相互促進(jìn)作用，Ang-2可上調(diào)VEGF的表達(dá)，而VEGF也可以反過來促進(jìn)Ang-2的分泌。在VEGF的影響下，Ang-2具有促血管生成或退化的雙重作用：一方面，Ang-2本身可誘導(dǎo)腫瘤組織內(nèi)新生血管呈非出芽式生長(zhǎng)，但此時(shí)的新生血管周邊細(xì)胞缺如，膠原排列紊亂，管壁基質(zhì)稀少，故生成很不穩(wěn)定，只有在VEGF的作用下，內(nèi)皮細(xì)胞才能發(fā)生遷移、增殖，最終形成成熟的新生血管；另一方面，當(dāng)無VEGF時(shí)，Ang-2則誘導(dǎo)原有血管退化與數(shù)目減少，同時(shí)伴有內(nèi)皮凋亡[14]。

2 Ang-2在NSCLC中的異常表達(dá)

2.1 Ang-2在NSCLC中的診斷價(jià)值 為了明確在NSCLC中Ang-2的表達(dá)情況，Wong等[15]率先在28對(duì)肺癌和癌旁組織中驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)，正常組織中Ang-1和Tie2的表達(dá)顯著上調(diào)，而肺癌組織中VEGF和Ang-2表達(dá)顯著上調(diào)，并且Ang-2表達(dá)量與VEGF表達(dá)的程度和強(qiáng)度呈顯著正相關(guān)，這表明在正常情況下Ang-1/Tie2途徑介導(dǎo)的血管穩(wěn)定機(jī)制占主導(dǎo)地位，但在腫瘤微環(huán)境作用下Ang-2和VEGF被相伴誘導(dǎo)上調(diào)，兩者相互協(xié)作介導(dǎo)腫瘤血管生成。后來陸續(xù)有研究[16-18]證實(shí)NSCLC患者組織、血清中Ang-1表達(dá)明顯下降，Ang-2、VEGF呈高表達(dá)，且腫瘤中這些血管生成分子的表達(dá)譜差異與IMVD及腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移等惡性生物學(xué)行為顯著相關(guān)，提示Ang-2及VEGF可以作為NSCLC早期診斷的潛在生物標(biāo)記物。

為了評(píng)價(jià)Ang-2的診斷價(jià)值，2016年Xu等[19]在188例孤立性肺結(jié)節(jié)（solitary pulmonary nodule,SPN）中檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，Ang-2診斷惡性SPN患者和健康志愿者以及惡性SPN和良性SPN患者之間的敏感度和特異度分別為80.5%和97.5%，以及69.5%和92.5%。類似地，在惡性胸腔積液的肺癌患者中Ang-2和VEGF的水平顯著升高，檢測(cè)Ang-2、VEGF、癌胚抗原（carcino-embryonic antigen,CEA）診斷肺癌合并惡性胸腔積液的價(jià)值，發(fā)現(xiàn)三者均能特異性診斷，當(dāng)聯(lián)合診斷效率最高，敏感性達(dá)97.7%，特異性達(dá)66.7%[20]。

2.2 Ang-2在NSCLC中的預(yù)后價(jià)值 目前已有充分研究證實(shí)Ang-2可以作為鑒別NSCLC的生物標(biāo)記物，而且與腫瘤的分期及預(yù)后有一定關(guān)系。Qiu等[21]的最新研究顯示，肺癌組織中Ang-2的表達(dá)水平與臨床分期、腫瘤直徑、分化程度有關(guān)。2017年一項(xiàng)納入了1,911例肺癌病例的薈萃分析[22]顯示，血清高Ang-2水平與較晚的臨床分期（III期、IV期）、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，與年齡、性別、吸煙史、組織學(xué)類型無關(guān)，且高表達(dá)的患者預(yù)后顯著變差，這提示Ang-2在腫瘤侵襲、淋巴性轉(zhuǎn)移方面起到重要作用，提示Ang-2的表達(dá)水平可作為肺癌預(yù)后預(yù)測(cè)因子。

Tanaka等[23]分析236例NSCLC患者生存率與Ang-2、VEGF表達(dá)情況的關(guān)系，結(jié)果顯示：Ang-2陽性較陰性表達(dá)的患者5年生存率顯著下降（53.5%與70.3%）；Ang-2陽性、VEGF高的患者生存率較Ang-2陽性、VEGF低的患者顯著下降（41.4%與63.6%），提示Ang-2陽性導(dǎo)致NSCLC患者總體生存率降低，而且這種影響在VEGF共同高表達(dá)時(shí)更明顯。類似地，Andersen等[24]在335例NSCLC病例中發(fā)現(xiàn)兩者共同高表達(dá)時(shí)具有顯著的差存活率和預(yù)后。以上結(jié)果可用Ang-2的生物學(xué)功能來解釋：隨著腫瘤體積的增加，當(dāng)新生血管未形成時(shí)，瘤內(nèi)缺氧導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞表達(dá)Ang-2，從而誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞不穩(wěn)定，血管通透性增加，不穩(wěn)定的血管出芽，在高表達(dá)的VEGF等生長(zhǎng)因子刺激下最終新生血管成熟，促進(jìn)癌細(xì)胞增殖及轉(zhuǎn)移。

3 Ang-2促進(jìn)NSCLC增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移的作用機(jī)制

腫瘤的發(fā)生、發(fā)展依賴于新生血管的形成，但Ang-2在NSCLC中是如何作用以促進(jìn)新生血管生成，繼而導(dǎo)致腫瘤增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移仍不明確，目前相關(guān)研究進(jìn)展如下。

3.1 Ang-2-TEM軸 TEMs（Tie2 expressing monocytes）是指表達(dá)Tie2的單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞，其在慢性炎性疾病、腫瘤血管及淋巴管生成中起到重要作用，研究表明Ang-2可通過調(diào)節(jié)此亞群，起到調(diào)節(jié)腫瘤血管生成和免疫系統(tǒng)的作用[25]。Coffelt等[26]研究發(fā)現(xiàn)Ang-2可以募集人TEMs，并上調(diào)胸苷磷酸化酶（thymidine phosphorylase,TP）、組織蛋白酶B（cathepsin,CTSB）兩種促血管生成酶和VEGF、基質(zhì)金屬蛋白酶9（matrix metalloproteinase,MMP9）、環(huán)氧化酶-2（cyclooxygenase,COX-2）和WNT5A等強(qiáng)效促血管生成因子的表達(dá)來顯著增強(qiáng)TEMs的促血管生成活性。隨后，陸續(xù)證實(shí)了Ang-2還可以通過刺激TEMs而上調(diào)強(qiáng)效免疫抑制因子如白細(xì)胞介素10（interleukin,IL-10）、人甘露糖受體C1（mannose receptor,MRC1）和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（rgulatory cells,Tregs）的趨化因子配體17（chemokine ligand,CCL17），并下調(diào)腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor alpha,TNF-α）、IL-6、IL-12等細(xì)胞因子，最終抑制細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（cytotoxic lymphocytes,CTLs）的活化并擴(kuò)展CD4+CD25+FOXP3+Tregs的表達(dá)[27-30]。隨后發(fā)現(xiàn)，高水平的IL-10、MRC1、CCL17以及低水平的TNF-α、IL-6、IL-12細(xì)胞因子表達(dá)屬于巨噬細(xì)胞“M2”激活狀態(tài)下的產(chǎn)物[31]，因此推測(cè)腫瘤中的Ang-2通過誘導(dǎo)TEMs表達(dá)“M2”表型以發(fā)揮促血管生成作用。值得注意的是，Ang-2對(duì)腫瘤血管的作用具有器官依賴性。在小鼠肝轉(zhuǎn)移模型中，敲減Ang-2后，血清中粒細(xì)胞集落刺激因子（granulocyte-colony stimulating factor,G-CSF）和CXC趨化因子配體1（CXC chemokine ligand,CXCL1）顯著上調(diào)，導(dǎo)致Tie2+/CD11b+/CD31-型免疫細(xì)胞的募集，最終腫瘤血管代償性生成；相反，在肺轉(zhuǎn)移瘤中Ang-2缺陷型小鼠腫瘤血管生成減少，血清G-CSF不增加，但發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移過程中伴隨著細(xì)胞因子IL-13、IL-15的顯著增加，而IL-13已知可抑制某些癌細(xì)胞系的增殖，IL-15可啟動(dòng)T細(xì)胞分裂、NK細(xì)胞發(fā)育和CD8+記憶T細(xì)胞的產(chǎn)生[32]。因此，這些細(xì)胞因子的差異性變化可以解釋Ang-2對(duì)肺和肝中的腫瘤生長(zhǎng)以及血管生成的不同作用。

3.2 Ang-2/Tie2通路中涉及的相關(guān)細(xì)胞因子和蛋白

3.2.1 IL-10 IL-10是一種與NSCLC預(yù)后相關(guān)的免疫抑制因子，Hatanaka等[33]在95例NSCLC手術(shù)標(biāo)本中驗(yàn)證出IL-10的高表達(dá)與Ang-2和Tie2基因的表達(dá)顯著相關(guān)，且在IL-10高表達(dá)區(qū)域腫瘤血管的數(shù)量明顯增多，從而提示了Ang-2/Tie2系統(tǒng)網(wǎng)絡(luò)可通過誘導(dǎo)免疫因子IL-10的表達(dá)實(shí)現(xiàn)對(duì)新生血管的調(diào)控。

3.2.2 血管滲漏相關(guān)因子 在肺癌轉(zhuǎn)移前期，已有研究[34]證明Ang-2、MMP3和MMP10表達(dá)上調(diào)，繼而導(dǎo)致血管通透性增加，循環(huán)腫瘤細(xì)胞外滲和轉(zhuǎn)移，進(jìn)一步研究證實(shí)，腫瘤細(xì)胞的惡性程度與其誘導(dǎo)Ang-2、MMP3和MMP10的表達(dá)能力呈正相關(guān)，且TNF-α和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（transforming growth factor-β,TGF-β）也參與了這些轉(zhuǎn)移相關(guān)因子的調(diào)節(jié)。此外，Ang-2還通過促進(jìn)磷脂酰肌醇特異性磷酯酶（phosphatidylinositol specific phospholipase,PLCγ2）的激活和鈣離子（Ca+）內(nèi)流等生物學(xué)行為以誘導(dǎo)多種血管滲漏相關(guān)細(xì)胞因子（組胺、緩激肽、VEGF）的表達(dá)[35]，表明Ang-2可通過調(diào)節(jié)血管滲漏過程促進(jìn)腫瘤的發(fā)展。

3.2.3 中性粒細(xì)胞胞外誘捕網(wǎng)（neutrophil extracellular traps,NETs） NETs是中性粒細(xì)胞在適宜刺激下釋放到胞外的一種纖維網(wǎng)格樣結(jié)構(gòu)。最初被認(rèn)為具有捕獲細(xì)菌、控制感染的作用，近年來NETs被發(fā)現(xiàn)還具有細(xì)胞毒性和免疫原性成分，與多種非感染性病理狀態(tài)如腫瘤、自身免疫疾病相關(guān)。Lavoie等[36]證實(shí)，Ang-1和Ang-2均可與NETs表面的Tie2受體結(jié)合，并上調(diào)NETs的合成和釋放，釋放后的NETs可誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞活化，從而在Ang-2介導(dǎo)的促炎和促血管生成過程中作出貢獻(xiàn)。

3.2.4 凋亡、轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白 HMGA2是一種與腫瘤發(fā)展相關(guān)的遷移蛋白，2016年一項(xiàng)研究[37]發(fā)現(xiàn)在肺鱗癌中Ang可結(jié)合其下游調(diào)控蛋白HMGA2的啟動(dòng)子，使其表達(dá)量增加，繼而顯著提高了細(xì)胞的增殖、遷移及侵襲能力。Survivin作為迄今發(fā)現(xiàn)的功能最強(qiáng)的凋亡抑制蛋白，其在肺癌患者血清中表達(dá)量高于正常對(duì)照組，且與Ang-2和VEGF的表達(dá)呈顯著正相關(guān)，有研究[38]表明在VEGF的影響下，Ang-2可上調(diào)survivin的表達(dá)從而促進(jìn)腫瘤血管生成，三者協(xié)同促進(jìn)肺癌的進(jìn)展和轉(zhuǎn)移。肺癌細(xì)胞中金屬蛋白酶9（A disintegrin and metalloprotease,ADAM9）的上調(diào)與大腦轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)，研究顯示在ADAM9沉默的細(xì)胞中Ang-2、VEGF-A的表達(dá)受到抑制，表明ADAM9可通過血管重構(gòu)促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移[39]?？傊?，以上研究成果證明Ang-2通過調(diào)控各種凋亡、轉(zhuǎn)移蛋白來影響肺癌細(xì)胞的生物學(xué)行為。

3.3 Ang-2與腫瘤炎癥微環(huán)境 最新的一項(xiàng)薈萃分析[8]顯示，Ang-2與炎癥標(biāo)志物（纖維蛋白原、白細(xì)胞、超敏C反應(yīng)蛋白）均呈正相關(guān)，提示Ang-2在炎癥反應(yīng)中起到了重要作用。轉(zhuǎn)移生態(tài)位模型認(rèn)為，腫瘤發(fā)生轉(zhuǎn)移之前，轉(zhuǎn)移位點(diǎn)必須提供有利于腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的炎癥微環(huán)境（即轉(zhuǎn)移生態(tài)位），這是形成新的轉(zhuǎn)移灶的前提條件[40]。Srivastava等[41]在乳腺癌肺轉(zhuǎn)移的模型中發(fā)現(xiàn)，肺轉(zhuǎn)移瘤來源的細(xì)胞為趨化因子受體2（chemokine receptor,CCR2）陽性和Tie2陰性的轉(zhuǎn)移相關(guān)巨噬細(xì)胞（CCR2+Tie2-MAMs），深入研究發(fā)現(xiàn)，在轉(zhuǎn)移發(fā)生之前，Ang-2可通過自分泌的方式刺激轉(zhuǎn)移生態(tài)位處的血管內(nèi)皮細(xì)胞，繼而誘導(dǎo)粘附分子-1（intercellular cell adhesion molecule,ICAM-1）和CCL2的表達(dá)上調(diào)，營造出適合巨噬細(xì)胞存活和粘附的生態(tài)環(huán)境，使得遠(yuǎn)端氣管內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)CCR2+Tie2-MAMs粘附敏感從而促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移。Fiedler等[42]也同樣證實(shí)了Ang-2可發(fā)揮促炎細(xì)胞因子的作用，其通過促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞上調(diào)ICAM-1和血管細(xì)胞粘附分子-1（vascular cell adhesion molecule,VCAM-1）的表達(dá)，從而誘導(dǎo)炎性細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞的牢固粘附。隨后Scholz等[43]利用體外實(shí)驗(yàn)證明了Ang-2誘導(dǎo)的炎性粘附僅對(duì)單核細(xì)胞有效，而對(duì)淋巴細(xì)胞沒有影響?？傊?，目前研究均證實(shí)了Ang-2可作為造成腫瘤炎癥微環(huán)境的炎癥反應(yīng)調(diào)節(jié)劑，參與腫瘤轉(zhuǎn)移和生長(zhǎng)的過程。

3.4 周細(xì)胞的覆蓋與EMT 周細(xì)胞是血管重要的結(jié)構(gòu)和功能組分，位于血管內(nèi)皮細(xì)胞周圍，目前認(rèn)為周細(xì)胞覆蓋率高的患者，血管屏障穩(wěn)定，總體生存率更高[44]。周細(xì)胞具有抑制或促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的階段特異性作用，這種相反的功能受到Ang/Tie2傳導(dǎo)信號(hào)的調(diào)控[45]。早期非缺氧腫瘤中，檢測(cè)到Ang-1的高表達(dá)，而Ang-2無明顯改變，此時(shí)在Ang-1/Tie2的作用下，周細(xì)胞增加對(duì)血管的包裹，從而提高了血管穩(wěn)定性，導(dǎo)致“新生血管生成抑制”的表型，阻礙了腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移；相反，晚期腫瘤負(fù)荷增加時(shí)，此時(shí)Ang-2水平升高，在Ang-2的主導(dǎo)作用下，周細(xì)胞覆蓋率下降，導(dǎo)致血管缺陷，瘤內(nèi)缺氧加重，引起上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial mesenchymal transition,EMT）增加，最終促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移[4,46]。

3.5 Ang-2其他相關(guān)信號(hào)通路

3.5.1 鈣調(diào)磷酸酶-NFAT-Ang-2信號(hào)通路 在腫瘤轉(zhuǎn)移之前VEGF即與轉(zhuǎn)移灶處內(nèi)皮細(xì)胞上的VEGF受體結(jié)合活化，繼而激活PLCγ2/Ca2+途徑，繼而導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)Ca2+上調(diào)，使得Ca2+調(diào)節(jié)的鈣調(diào)磷酸酶被激活，導(dǎo)致活化T細(xì)胞核因子（nuclear factor of activated T cells,NFAT）家族的轉(zhuǎn)錄因子去磷酸化[47]，繼而下游的靶標(biāo)Ang-2增加，之后激活轉(zhuǎn)移灶內(nèi)皮，促進(jìn)轉(zhuǎn)移，當(dāng)過表達(dá)內(nèi)源性抑制劑例如Dscr-1基因后，Ang-2 mRNA顯著下調(diào)，并抑制了早期轉(zhuǎn)移病灶中內(nèi)皮活化[48]，證實(shí)了鈣調(diào)磷酸酶-NFAT-Ang-2信號(hào)通路可調(diào)節(jié)早期轉(zhuǎn)移灶的內(nèi)皮活化，在促進(jìn)轉(zhuǎn)移灶處的腫瘤細(xì)胞接種和擴(kuò)增中起重要作用。

3.5.2 Ang-2-β1-整合素信號(hào)通路 β1-整合素在維持內(nèi)皮肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架中具有雙重的作用，依賴于Ang-2的亞細(xì)胞定位功能：細(xì)胞外周中的β1-整合素維持肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架，而細(xì)胞中心的β1-整合素拉伸粘連，激活肌動(dòng)蛋白應(yīng)力纖維。Ang-2可通過直接相互作用激活內(nèi)皮β1-整聯(lián)素，血清中的促炎細(xì)胞因子IL-6、IL-1β和TNF-α等也可激活下游的β1-整合素，使得定位在細(xì)胞中心的β1-整合素伸長(zhǎng)粘連作用顯著增強(qiáng)，繼而含VE-鈣粘連蛋白（VE-cadherin）的肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞-細(xì)胞連接減弱，最終降低內(nèi)皮單層完整性，導(dǎo)致屏障功能降低，毛細(xì)血管滲漏增加，以此通過Ang-2-β1-整合素信號(hào)通路途徑促進(jìn)腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移[49]。

3.6 Ang-2在淋巴管生成方面的作用 淋巴轉(zhuǎn)移是NSCLC擴(kuò)散的重要途徑，在腫瘤缺氧、高壓的微環(huán)境作用下，腫瘤細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞會(huì)誘導(dǎo)淋巴管生長(zhǎng)因子的分泌和活化，而最終淋巴管生成依賴于多種生長(zhǎng)因子（包括VEGF家族、Ang家族等）的調(diào)節(jié)。NSCLC組織、血液中檢測(cè)到高表達(dá)的Ang-2與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和患者低生存率相關(guān)，但其具體機(jī)制尚未闡明。事實(shí)上，Ang-2雖然通過競(jìng)爭(zhēng)性拮抗作用破壞血管內(nèi)皮穩(wěn)定，但在淋巴內(nèi)皮中Ang-2/Tie2通路發(fā)揮的卻是激動(dòng)作用，Ang-2可通過激活淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞（lymphatic endothelial cells,LECs）上的Tie2受體，引起LECs的遷移、增殖和淋巴管增生[50]。Souma等[51]在小鼠模型中發(fā)現(xiàn)這種相反的生物學(xué)功能取決于血管內(nèi)皮蛋白酪氨酸磷酸酶（vascular endothelial protein tyrosine phosphatase,VEPTP）的存在與否：LECs中缺乏VEPTP，此時(shí)Ang-2/Tie2發(fā)揮內(nèi)皮激動(dòng)功能，相反，血管內(nèi)皮表達(dá)高水平的VEPTP，而VEPTP會(huì)提高Tie2的激活閾值并阻止Ang-2的激活，這揭示了Ang-2促進(jìn)淋巴轉(zhuǎn)移的部分機(jī)制。

4 針對(duì)Ang-2的靶向治療進(jìn)展

腫瘤所處的缺氧、酸性、高間質(zhì)壓力的微環(huán)境，形成了藥物遞送到腫瘤組織中的病理性屏障[52]。傳統(tǒng)的抗血管生成方法主要集中在抑制新血管形成和破壞原有腫瘤血管方面，代表藥物如貝伐珠單抗（抗VEGF單克隆抗體）雖然短期內(nèi)可抑制腫瘤血管生成，但隨后會(huì)因血管退化和稀疏造成腫瘤組織的極度缺氧，導(dǎo)致Ang-2的表達(dá)上調(diào)，繼而促進(jìn)VEGF非依賴性的腫瘤血管生成，并最終導(dǎo)致耐藥性增加[53]。

多項(xiàng)研究證明，在腫瘤進(jìn)展早期階段對(duì)VEGF或Ang-2進(jìn)行阻斷可顯著減少血管生成、腫瘤生長(zhǎng)、侵襲和轉(zhuǎn)移，且減少了血管滲漏和周細(xì)胞脫落[54]。但單獨(dú)阻斷Ang-2或VEGF表達(dá)的效果都不甚滿意[55]。Ang-2和VEGF雙重阻斷的抑瘤功效被證明大于單一阻斷Ang-2或VEGF，然而，無論是單一或是雙重阻斷仍然存在增加腫瘤缺氧和隨后惡化腫瘤微環(huán)境的風(fēng)險(xiǎn)[56,57]。 最近在小鼠模型中研究發(fā)現(xiàn)，ABTAA（Ang-2抑制和Tie2激活抗體）和ABA（Ang-2抑制抗體）相比，ABTAA誘導(dǎo)腫瘤脈管系統(tǒng)正常化，導(dǎo)致血液灌注增加，且顯著減少乳酸酸中毒和腫瘤生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移，最終通過營造有利的腫瘤微環(huán)境以增強(qiáng)化療藥物的遞送[58]，可作為有效抗癌藥物。因此，未來抗血管生成靶向藥物可著力于Ang-2相關(guān)因子的雙靶點(diǎn)或多靶點(diǎn)聯(lián)合，但怎樣搭配才能發(fā)揮最大效能仍在探索，同時(shí)尋找實(shí)現(xiàn)腫瘤血管正?；⒉粣夯[瘤微環(huán)境以增強(qiáng)化療藥物遞送的靶向藥物仍是關(guān)鍵。

5 小結(jié)與展望

Ang-2作為一類重要的促血管生成因子，已被證實(shí)在NSCLC組織、血液中表達(dá)顯著上調(diào)，且與腫瘤TNM 分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，提示Ang-2可作為NSCC診斷和預(yù)后的潛在生物學(xué)標(biāo)志物。目前關(guān)于Ang-2是如何促進(jìn)腫瘤增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移的相關(guān)機(jī)制仍在研究，已知其可通過干擾血管內(nèi)皮穩(wěn)定性、誘導(dǎo)新生血管生成、調(diào)節(jié)炎癥和血管滲漏過程、促進(jìn)周細(xì)胞脫落、促進(jìn)淋巴管增生、淋巴內(nèi)皮細(xì)胞增殖等方面實(shí)現(xiàn)對(duì)癌細(xì)胞惡性生物學(xué)行為的調(diào)控，以上機(jī)制為針對(duì)Ang-2的靶向藥物研究提供新目標(biāo)。