于 蘭

（遼寧中醫(yī)藥大學(xué)附屬第四醫(yī)院 檢驗科，遼寧 沈陽 110000）

近年來，隨著經(jīng)濟(jì)的迅速發(fā)展，人們生活水平不斷提高，攝食范圍逐漸廣泛，隨之而來的心血管疾病也逐漸進(jìn)入人們的視野，其發(fā)病率和致死率呈逐年上升趨勢。急性冠狀動脈綜合征具有起病急迫、病情危篤、致死率高的發(fā)病特點，是臨床最常見的急重癥之一。臨床可分為不穩(wěn)定型心絞痛和急性心肌梗死兩種類型[1]，其致病因素多種多樣，以動脈粥樣硬化最為主要，其病變實質(zhì)為一種慢性炎癥，檢測結(jié)果顯示該病理狀態(tài)下患者外周血中細(xì)胞數(shù)量減少。有實驗研究，Treg抑制自身效應(yīng)性T細(xì)胞的同時還參與維持外周免疫調(diào)節(jié)、防止炎癥的作用[2]。針對Treg是否參與了急性冠狀動脈綜合征的免疫反應(yīng)至今仍為明確，因此對急性冠狀動脈綜合征患者外周血中反映Treg數(shù)量的表達(dá)百分比水平及功能進(jìn)行研究，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選擇我院2015年9月至2017年5月心內(nèi)科住院急性冠狀動脈綜合征患者72例，其中急性心肌梗死11例，不穩(wěn)定性心絞痛25例，穩(wěn)定型心絞痛36例，另選擇健康體檢者19例作為對照。

1.2 試劑和儀器：流式細(xì)胞儀（生產(chǎn)廠家：上海銳賽生物技術(shù)有限公司（Research Science）。紅蛋白標(biāo)記的鼠抗人CD4抗體（生產(chǎn)廠家：上海友科生物技術(shù)有限公司）、異硫氰酸熒光素標(biāo)記的鼠抗人CD25抗體、IgG1免疫球蛋白（生產(chǎn)廠家：山東西亞化學(xué)工業(yè)有限公司）及紅細(xì)胞裂解液（生產(chǎn)廠家：北京索萊寶科技有限公司）由我院檢驗室嚴(yán)格按照說明書操作配制。

1.3 實驗方法。操作過程：檢測時使用前向和側(cè)向散射光信號對T細(xì)胞群進(jìn)行設(shè)門，采集樣本設(shè)門細(xì)胞數(shù)＞10000個/份，進(jìn)行全血分析，每份以2000 r/min，離心3 min。去其上清液，將留取的細(xì)胞組織打散，加入PBS，離心洗滌3次，制成細(xì)胞懸液，收集細(xì)胞數(shù)控制在（1～8）×106/mL。采用免疫熒光標(biāo)記法：取兩支試管，均加入抗凝全血100 μL，一只作為對照管加入CD4-PC5-Cy5、FITC-IgG1和各單抗相對應(yīng)的同型對照PE10 μL，另一只加入CD25-FITC及CD4-PC5-Cy5單抗各10 μL，混合均勻后室溫下孵育20 min，再次加入1 mL溶血劑，置于37 ℃水浴箱內(nèi)，留置25 min，溶血充分后即刻送往檢驗室進(jìn)行流式細(xì)胞儀檢測，記錄數(shù)據(jù)。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理：使用SPSS19.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，采用χ2檢驗計量資料，組間比較采用t檢驗，計量資料以率（±s）表示，以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

3 討 論

急性冠狀動脈綜合征是指冠狀動脈內(nèi)斑塊的出血或破裂，進(jìn)而誘發(fā)管內(nèi)血栓發(fā)生，致使冠狀動脈管腔堵塞，出現(xiàn)一系列臨床癥狀及體征的病理表現(xiàn)，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為本病主要與自身免疫反應(yīng)及炎性反應(yīng)關(guān)系密切，由于患者的細(xì)胞免疫機(jī)制被激活，導(dǎo)致斑塊活動性增加[3]?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)表明，機(jī)體內(nèi)存在內(nèi)存在一種免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞Treg，不僅具備免疫功能，同時還與參與免疫耐受存在密切的聯(lián)系。研究已經(jīng)闡證明，機(jī)體內(nèi)Treg細(xì)胞數(shù)量及結(jié)構(gòu)的異常可誘發(fā)自身免疫應(yīng)答啟動以及炎性反應(yīng)的發(fā)生。Treg細(xì)胞具有免疫負(fù)調(diào)節(jié)功能，為免疫T細(xì)胞的亞群，Treg細(xì)胞具有數(shù)量少，效用高的一群T淋巴細(xì)胞，具有良好的免疫協(xié)調(diào)作用。通過細(xì)胞間的相互聯(lián)系實現(xiàn)抑制作用，從而發(fā)揮免疫負(fù)調(diào)節(jié)功能，維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境相對協(xié)調(diào)。丁艷萍等[4]研究表明急性冠狀動脈綜合征外周血Treg的表達(dá)水平明顯低于正常人，證實在此病理狀態(tài)下患者維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞數(shù)量顯著減少，從而導(dǎo)致機(jī)體免疫耐受受到影響，最終誘發(fā)動脈粥樣硬化斑塊的不穩(wěn)定變化，甚或破潰出血等嚴(yán)重病變，危及患者生命安全。程翔等研究表明，不穩(wěn)定性心絞痛患者外周血中的Treg表達(dá)量占細(xì)胞的比例明顯降低。