獸藥多殘留樣品前處理技術(shù)研究情況

張鳳鳳

（陜西省西安市未央?yún)^(qū)動(dòng)物疾病預(yù)防中心 710016）

現(xiàn)代畜牧業(yè)和水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)幾乎都離不開獸藥，因?yàn)楹侠硎褂毛F藥能夠減少動(dòng)物的發(fā)病率和死亡率，促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)從而提高經(jīng)濟(jì)效益。但也有一些養(yǎng)殖戶為了追求更高的經(jīng)濟(jì)效益，肆意濫用、超量使用獸藥，造成獸藥在動(dòng)物體能殘留過量，給消費(fèi)者帶來危害。因此，獸藥殘留分析方法顯得尤為重要，當(dāng)前獸藥殘留分析方法包含樣品前處理和測(cè)定方法兩部分。本文將介紹獸藥多殘留樣品前處理技術(shù)，對(duì)現(xiàn)階段已有動(dòng)物樣本前處理技術(shù)進(jìn)行研究和推廣，針對(duì)不同樣本具有的特點(diǎn)對(duì)樣本前處理技術(shù)進(jìn)行選擇，以期能實(shí)現(xiàn)檢測(cè)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。

1 沉淀蛋白技術(shù)

沉淀蛋白技術(shù)作為一種動(dòng)物樣品前處理的方法，其作用機(jī)理是通過對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行沉淀，釋放動(dòng)物樣品中的存在的藥物成分，然后對(duì)動(dòng)物樣品中存在的藥物成分進(jìn)行監(jiān)測(cè)，獲得準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)，評(píng)估動(dòng)物樣品中的藥物殘留情況。通過對(duì)蛋白質(zhì)的沉淀去除可有效的防止提取過程中的發(fā)泡情況，這不僅可以降低樣品發(fā)生乳化幾率，同時(shí)還可以有效的保護(hù)儀器，延長(zhǎng)儀器使用時(shí)間。作為獸藥殘留濃度監(jiān)測(cè)的第一步，動(dòng)物身體部位的不同也會(huì)導(dǎo)致同一種獸藥的殘留含量不同。如在取動(dòng)物內(nèi)臟后首先清除組織殘留的血液，然后加入適量生理鹽水，研磨以后離心，沉淀后吸取適量上清液進(jìn)行檢測(cè)。通常情況下使用有機(jī)溶劑對(duì)獲得的蛋白質(zhì)進(jìn)行溶解，但如果存在水溶性蛋白質(zhì)可以用酸類使蛋白質(zhì)沉淀，過濾獲得蛋白。在所有有機(jī)溶劑中，乙腈是最好的一種溶劑，使用乙腈可有效的提高組分分離度，獲得較好的分離峰。如果使用高氯酸進(jìn)行分離，則沉淀蛋白最好不要直接使用色譜柱進(jìn)行分析，應(yīng)在調(diào)整合適酸堿度的情況下用滲透膜進(jìn)行過濾。這樣的操作可以避免因酸液的酸性太強(qiáng)損壞色譜柱。與其他樣品前處理技術(shù)相比，蛋白沉淀技術(shù)操作相對(duì)方便，但存在準(zhǔn)確度和靈敏度較低的缺點(diǎn)。

2 液-液提取技術(shù)

液-液提取技術(shù)作為獸藥殘留檢測(cè)過程中對(duì)樣品進(jìn)行前處理較為多用的一種技術(shù)在現(xiàn)階段也得到大范圍的推廣。這種技術(shù)主要包括液相萃取技術(shù)、多次提取技術(shù)及離子對(duì)提取技術(shù)。液相萃取技術(shù)同傳統(tǒng)萃取技術(shù)相似，是通過對(duì)與樣品不相同的溶解度選擇，利用待測(cè)組分在不同溶劑中溶解度不同，對(duì)待測(cè)組分進(jìn)行提取。對(duì)于現(xiàn)階段，大部分獸藥主要屬于脂溶性獸藥，在對(duì)生物樣品進(jìn)行前處理過程中，其他物質(zhì)大多數(shù)屬于水溶性的。因此，可以利用液相萃取技術(shù)對(duì)雜質(zhì)進(jìn)行分離，實(shí)現(xiàn)待測(cè)組分的純化。如對(duì)可能含有較高獸藥殘留的樣本，如動(dòng)物血液、皮毛、肌肉等進(jìn)行處理。在進(jìn)行實(shí)際操作過程中，檢驗(yàn)人員可以根據(jù)相似相容原則，選取合適的溶劑如乙醚、乙醇等進(jìn)行，在進(jìn)行溶劑選擇時(shí)要注意選取的溶劑純度要達(dá)到分析純以上，這樣可以降低溶劑中存在的水分對(duì)分離造成的影響。此外，選取的溶劑在熔沸點(diǎn)、揮發(fā)性等特性方面也有較高的要求，這有利于降低對(duì)紫外檢測(cè)造成的影響。同時(shí)，為了保證實(shí)驗(yàn)過程中的安全性，選取的溶劑應(yīng)具有較高的化學(xué)穩(wěn)定性。可以根據(jù)待測(cè)組分的極性對(duì)溶劑進(jìn)行選擇，但在所有有機(jī)溶劑中盡量避免使用氯仿作為溶劑。不過液-液提取技術(shù)也存在一定的缺陷，就是需要較長(zhǎng)的操作時(shí)間，且消除基質(zhì)干擾得到的效果并不明顯，還需要用到較多的有機(jī)溶劑，而這些有機(jī)溶劑對(duì)人體和環(huán)境是有害的。

3 固相萃取技術(shù)

固相萃取技術(shù)是現(xiàn)階段應(yīng)用最為廣泛的生物樣品處理技術(shù)，相對(duì)于液-液提取技術(shù)更為常用。其在原理上同高效液相色譜、氣相色譜的原理基本一致，同樣是通過相似相容原理對(duì)待測(cè)物質(zhì)進(jìn)行提取。經(jīng)過幾十年的發(fā)展，固相萃取技術(shù)已較為成熟?，F(xiàn)階段固相萃取技術(shù)主要通過4步完成對(duì)待測(cè)物質(zhì)的萃取工作。首先，選擇合適的固相萃取柱，其口徑等都需要滿足實(shí)驗(yàn)要求。然后進(jìn)行萃取柱的填裝，填料粒度等同樣需要進(jìn)行選擇，接著將樣品通過萃取柱，實(shí)現(xiàn)對(duì)測(cè)量樣本的分離工作。雖然固相萃取技術(shù)具有較好的優(yōu)點(diǎn)，但由于其不能使用高壓進(jìn)行萃取，因此消耗時(shí)間較多。如果基質(zhì)比較復(fù)雜的情況下，則會(huì)存在低回收率且容易造成填料堵塞等問題。

4 總結(jié)

通過對(duì)當(dāng)前使用最多的幾種動(dòng)物樣品前處理技術(shù)分析可以發(fā)現(xiàn)，不同動(dòng)物樣本具有不同的特點(diǎn)。要實(shí)現(xiàn)通過這些樣本的檢測(cè)獲得較為準(zhǔn)確獸藥殘留量檢測(cè)必須選擇合適的樣品前處理技術(shù)。因此，必須加強(qiáng)對(duì)現(xiàn)有樣品前處理技術(shù)的學(xué)習(xí)，同時(shí)注意對(duì)新的處理技術(shù)進(jìn)行研發(fā)。如此才能通過先進(jìn)的、準(zhǔn)確的獸藥多殘留樣品前處理技術(shù)獲得動(dòng)物產(chǎn)品的獸藥殘留情況，從而服務(wù)于動(dòng)物產(chǎn)品的市場(chǎng)準(zhǔn)入，使食品安全問題得到有效解決，使消費(fèi)者身體健康得到進(jìn)一步的保障。