洪澤淳+熊含鴻+鄭悅珊+孫明蔚

摘 要：摘要：建立一種QuEChERS結(jié)合氣相色譜法測(cè)定蔬菜中乙烯菌核利、聯(lián)苯菊酯等15種有機(jī)氯及菊酯類農(nóng)藥殘留的分析方法。樣品經(jīng)QuEChERS快速凈化后，選用HP-5毛細(xì)管柱進(jìn)行分離，氣相色譜-電子捕獲檢測(cè)器測(cè)定，外標(biāo)法定量；驗(yàn)證了15種有機(jī)氯及菊酯類農(nóng)藥的檢出限、加標(biāo)回收率及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。

關(guān)鍵詞：QuEChERS 氣相色譜 有機(jī)氯 菊酯類農(nóng)藥

有機(jī)氯及菊酯類農(nóng)藥作為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中被廣泛使用的殺蟲(chóng)劑，其具有化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定、在環(huán)境中不易降解的特點(diǎn)，長(zhǎng)期殘留于土壤和農(nóng)產(chǎn)品中將危及人體健康，其殘留問(wèn)題已引起人們的高度重視[1-2]。目前，國(guó)內(nèi)多采用農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T 761-2008《蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲(chóng)菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留測(cè)定》測(cè)定蔬菜中的有機(jī)氯及菊酯類農(nóng)藥的殘留，但該方法存在前處理復(fù)雜，耗時(shí)費(fèi)力，農(nóng)藥按組分類每組種類單一，廣泛使用的農(nóng)藥品種無(wú)法一次性檢測(cè)殘留量等問(wèn)題。

1 材料與方法

QuEChERS（quick，easy，cheap，effective，rugged，safe）是近幾年發(fā)展起來(lái)的一種前處理技術(shù)，具有分析速度快、操作簡(jiǎn)單和回收率較高等優(yōu)點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于農(nóng)殘檢測(cè)[3-4]。本研究采用QuEChERS法對(duì)樣品進(jìn)行前處理，結(jié)合氣相色譜-電子捕獲檢測(cè)器（GC-ECD）靈敏度高、選擇性強(qiáng)的特點(diǎn)，運(yùn)用毛細(xì)管單柱法同時(shí)測(cè)定蔬菜中7種有機(jī)氯類和8種擬除蟲(chóng)菊酯類農(nóng)藥的殘留量，方法簡(jiǎn)單、快捷、準(zhǔn)確、適合大批量樣品中有機(jī)氯及菊酯類農(nóng)藥的測(cè)定，應(yīng)用推廣性較強(qiáng)。

1.1 儀器與試劑

Agilent 7890B型氣相色譜儀（帶ECD檢測(cè)器）；Reeko AutoEVA-60型氮吹儀；IKA Vortex Genius3型漩渦混勻器、Thermo ST8 型離心機(jī)。

1.2標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

標(biāo)準(zhǔn)溶液：乙烯菌核利、七氯、艾氏劑、三唑酮、硫丹、狄氏劑、異菌脲、聯(lián)苯菊酯、甲氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、氯菊酯、氟氰戊菊酯、氰戊菊酯、氟胺氰菊酯、溴氰菊酯，濃度均為100μg/mL，購(gòu)于北京曼哈格生物科技有限公司。

標(biāo)準(zhǔn)使用液配制：分別量取適量15種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)單標(biāo)，用正己烷稀釋配置成5.0μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，使用時(shí)用正己烷稀釋成0.02、0.10、0.20、0.50、1.00μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)使用液。

1.3樣品前處理

稱取勻漿后的試樣10.0g于50mL塑料離心管中，加入0.2g硫酸銨、10.0mL乙腈，渦旋2min，加入2g無(wú)水硫酸鎂、1.0g氯化鈉，渦旋2min，以8000r/min離心3min，收集上清液；在收集液中加入1200mg無(wú)水硫酸鎂、400mgPSA，渦旋2min，以8000r/min離心3min，吸取上清液1mL于40℃水浴條件下氮吹至近干，加入1mL正己烷，渦旋溶解后用0.22μm濾膜過(guò)濾于樣品瓶，供上機(jī)測(cè)定。

1.4色譜條件

色譜柱：HP-5毛細(xì)管柱（30m×250μm×0.25μm）；檢測(cè)器溫度：320℃；尾吹氣：N2；尾吹流量：60mL/min；進(jìn)樣模式：不分流；進(jìn)樣口溫度：200℃；載氣：N2；吹掃流量：3.0mL/min；線速度：23.372cm/sec；總流量：13.7mL/min；色譜柱流量：0.7mL/min；柱溫箱溫度：150℃；溫度程序：150℃（2min）

-6℃/min-190℃

-3℃/min-210℃

（1min）-3℃/

min-240℃（8min）

-1.5℃/min-255℃

-2.5℃/min-270℃（5min）-20℃/

min-295℃（2min）；進(jìn)樣量：1.0μL。

2 結(jié)果與討論

2.1提取方法的改進(jìn)

考慮到一次性分析的農(nóng)藥目標(biāo)物數(shù)量較多、結(jié)構(gòu)差異大，因此選取乙腈作為QuEChERS方法的提取劑。加入少量的硫酸銨有利于乙腈對(duì)樣品的滲透；無(wú)水硫酸鎂具有吸水性，使基質(zhì)中的水分與乙腈提取液完全分離；氯化鈉使水相和有機(jī)相分離，同時(shí)除去水溶性雜質(zhì)，能提高待測(cè)組分在有機(jī)相中的分配比；PSA作為凈化劑能有效除去樣品中的極性基質(zhì)成分，如有機(jī)酸、糖類和色素[5-6]。采用QuEChERS方法前處理免去了相萃取柱多次淋洗的步驟，操作簡(jiǎn)單、快速，凈化效果好。

2.2色譜條件的優(yōu)化

電子俘獲檢測(cè)器（ECD）靈敏度高、選擇性強(qiáng)，可以實(shí)現(xiàn)多種有機(jī)氯、菊酯類農(nóng)藥的分離，與質(zhì)譜檢測(cè)器較昂貴且較苛刻的檢測(cè)條件相比，易在更多實(shí)驗(yàn)室里應(yīng)用推廣。采用NY/T 761-2008標(biāo)準(zhǔn)推薦的DB-1和DB-17毛細(xì)管色譜柱，程序升溫下，對(duì)多種農(nóng)殘的分離效果并不理想，因?yàn)橛袡C(jī)氯和菊酯類農(nóng)藥多屬于中等偏弱極性的化合物，根據(jù)相似相溶原理，使用極性較弱的HP-5色譜柱更合適。

有機(jī)氯和菊酯類的分離涉及到同分異構(gòu)體，對(duì)分離條件要求比較高，跟據(jù)化合物的出峰順序，對(duì)NY/T 761-2008的單階程序升溫進(jìn)行優(yōu)化，采用多階程序升溫，能滿足多組分農(nóng)殘單柱同時(shí)分離的要求。由圖1可以看出，15種有機(jī)氯及菊酯類農(nóng)藥在該色譜條件下得到較好的分離。

2.3線性范圍及檢出限

15種有機(jī)氯及菊酯類農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)工作液，按1.4進(jìn)行氣相色譜分析，以進(jìn)樣濃度（x）為橫坐標(biāo)，峰而積（Y）為縱坐標(biāo)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，以3倍信噪比（S/N）計(jì)算檢出限（LOD），如表1所示。從表中可以看出各組分在0.02μg/mL～1.00μg/mL范圍內(nèi)線性良好，相關(guān)系數(shù)R2>0.9992，檢出限在0.00012～0.00235mg/kg之間。

2.4加標(biāo)樣品的回收率和精密度

在黃瓜空白樣品中，添加0.05mg/kg、0.30mg/kg、0.60mg/kg三個(gè)水平的15種農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)液，按試驗(yàn)方法平行測(cè)定7次，計(jì)算加標(biāo)回收率和精密度，結(jié)果見(jiàn)表1。低、中、高三個(gè)濃度水平的加標(biāo)回收率分別為88.0%～112.0%、80.0%～116.7%、93.3%～110.0%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（n=7）在0.8%～10.4%之間。

2.5樣品的測(cè)定

利用本方法對(duì)黃瓜、韭菜、甘藍(lán)3種蔬菜樣品進(jìn)行檢測(cè)，檢出最大值：七氯0.00120mg/kg、三唑酮0.00308mg/kg、硫

丹0.00589mg/kg、狄氏劑0.0102mg/kg、異菌脲0.0606mg/kg、

氯菊酯0.107mg/kg，其余有機(jī)氯及菊酯類農(nóng)藥殘留未檢出。

3 結(jié)論

本文使用QuEChERS快速凈化結(jié)合氣相色譜法同時(shí)測(cè)定蔬菜中的7種有機(jī)氯類和8種菊酯類農(nóng)藥殘留，該方法具有較高的選擇性和靈敏度，基質(zhì)加標(biāo)樣具有良好的響應(yīng)，平均回收率為90.9%～111.8%，該方法操作簡(jiǎn)便、溶劑用量少、準(zhǔn)確度和精密度高，可以滿足蔬菜中15種有機(jī)氯和菊酯類農(nóng)藥殘留定性定量的檢測(cè)要求。

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