竇 勇， 姚妙愛

(江蘇財(cái)經(jīng)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，江蘇淮安 223003)

黃顙魚(Pelteobagrusfulvidraco)俗名黃角丁、黃臘丁、戈牙等，隸屬鲿科(Bagride)、鲇形目(Silurformes)、黃顙魚屬(Pelteobagrus)，廣布于我國東部各大水系，是目前經(jīng)濟(jì)價(jià)值較高的淡水養(yǎng)殖新品種之一[1-4]。研究表明，黃顙魚對(duì)蛋白質(zhì)的需求量基本在33.5%～45.0%，人工養(yǎng)殖條件下可全程攝食顆粒料或膨化配合飼料[5-6]。我國早期養(yǎng)殖黃顙魚以顆粒料為主，飼料的蛋白質(zhì)含量高達(dá)44%～45%，造成高蛋白質(zhì)飼料浪費(fèi)，并對(duì)養(yǎng)殖水體和環(huán)境造成巨大污染。隨著飼料膨化技術(shù)的發(fā)展，黃顙魚膨化飼料逐漸研發(fā)使用，但其蛋白質(zhì)含量仍高達(dá)42%，存在蛋白質(zhì)資源浪費(fèi)現(xiàn)象。

目前，在配合飼料中添加酶制劑，成為提高水產(chǎn)動(dòng)物對(duì)飼料營養(yǎng)成分消化吸收的有效途徑之一。復(fù)合酶制劑由多種可以分解飼料營養(yǎng)分子鏈的生物活性物質(zhì)組成，可最大限度地提高飼料營養(yǎng)成分的消化分解，解除飼料中多種抗?fàn)I養(yǎng)因子，補(bǔ)充內(nèi)源性消化酶分泌的不足，提高動(dòng)物對(duì)營養(yǎng)成分的消化吸收，促進(jìn)動(dòng)物生長和提高飼料效率[7]。由于魚類飼料加工多數(shù)采用制粒或膨化，特別是飼料膨化過程中溫度高達(dá) 150 ℃，加工過程對(duì)酶的活性影響較大，限制了酶制劑在生產(chǎn)上的應(yīng)用。此外，黃顙魚適宜生長溫度在25 ℃左右，但大多數(shù)酶制劑活性最適溫度為30～50 ℃，黃顙魚養(yǎng)殖過程中酶活性達(dá)不到最適溫度。因此，在黃顙魚膨化飼料中很少使用酶制劑，為此本研究采用先制粒后噴涂的方式添加復(fù)合酶制劑，待膨化后飼料溫度降低至80 ℃左右，由油脂稀釋酶制劑后進(jìn)行噴涂，可有效提高復(fù)合酶制劑活性。為研制高效環(huán)保型黃顙魚膨化飼料，降低黃顙魚膨化飼料中蛋白質(zhì)添加量，有效提高蛋白質(zhì)利用率，降低黃顙魚養(yǎng)殖過程中N排放量，在黃顙魚膨化飼料中添加水產(chǎn)專用復(fù)合酶制劑，基于黃顙魚最適能蛋比33.5～37.5 MJ/kg情況下，研究不同粗蛋白質(zhì)添加量對(duì)黃顙魚生產(chǎn)性能、氮元素吸收的影響，以期獲得在不影響黃顙魚生長性能情況下，膨化飼料中最低蛋白質(zhì)用量，為成功研制環(huán)保型黃顙魚膨化飼料奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)用魚

黃顙魚由揚(yáng)州市董氏特種水產(chǎn)苗種繁育中心提供，體質(zhì)量8～9 g/尾，試驗(yàn)前馴養(yǎng)15 d，淘汰體質(zhì)差及環(huán)境不適應(yīng)個(gè)體。

1.2 試驗(yàn)材料

水產(chǎn)專用耐高溫復(fù)合酶制劑(513A)購于武漢新華揚(yáng)生物股份有限公司，其中蛋白酶≥4 500 U/g，木聚糖酶 ≥12 000 U/g，β-甘露聚糖酶≥100 U/g，纖維素酶 ≥200 U/g。

水產(chǎn)專用耐高溫微生態(tài)制劑(微特贏)購于上海三智生物科技有限公司，主要菌種為地衣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌，總活菌數(shù)≥100×108CFU/g。

1.3 日糧配方組成

基于黃顙魚最適能蛋比33.5～37.7 MJ/kg情況下，飼料粗蛋白質(zhì)含量依次設(shè)置為36%、37%、38%、39%、40%、41%、42%、43%，其中對(duì)照組不添加復(fù)合酶制劑(設(shè)置為1～8組)，試驗(yàn)組添加0.02%復(fù)合酶制劑(設(shè)置為Ⅰ～Ⅷ組)。試驗(yàn)組和對(duì)照組均添加0.02%的微生態(tài)制劑，酶制劑和微生態(tài)制劑均在制粒與豆油混合后進(jìn)行噴涂添加。通過調(diào)節(jié)凹凸棒土、豆油、豆粕及國產(chǎn)魚粉用量來調(diào)整飼料能蛋比及蛋白質(zhì)含量，研究低蛋白質(zhì)膨化日糧下，添加復(fù)合酶制劑對(duì)黃顙魚生長性能及氮排放的影響，膨化飼料配方及營養(yǎng)水平見表1、表2。

1.4 試驗(yàn)方法

1.4.1 流水試驗(yàn)[8-9]試驗(yàn)在淮安正昌飼料有限公司養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)中心進(jìn)行，長方形恒溫水族箱規(guī)格“長×寬×高”為“160 cm×70 cm×80 cm”，選擇體質(zhì)健壯、大小基本一致的黃顙魚幼苗，每箱投放30尾，每種飼料設(shè)置3個(gè)重復(fù)，共48箱。采用恒溫循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)，水溫控制在(24.0±0.5) ℃，溶氧量保證在6 mg/L以上，氨氮含量≤0.02 mg/L，pH值約為7.2。飼料投喂量根據(jù)魚體質(zhì)量及馴養(yǎng)時(shí)實(shí)際攝食量確定，為體質(zhì)量的4.0%～4.3%(以攝食完為準(zhǔn))，每2周稱質(zhì)量1次，并調(diào)整投飼量。每日投喂3次，時(shí)間為08：00、13：00、18：00，投喂2 h后吸出殘餌。在早晨(投餌前)、晚上(20：00)各吸糞1次，保持養(yǎng)殖水體清潔。試驗(yàn)時(shí)間自2016年5月2日至2016年6月26日結(jié)束，共養(yǎng)殖8周，記錄初均體質(zhì)量、末均體質(zhì)量、總投餌量、總殘餌量、末均體長，計(jì)算各試驗(yàn)組體質(zhì)量增長率、飼料系數(shù)及肥滿度。

表1 黃顙魚膨化飼料試驗(yàn)配方 kg

表2 黃顙魚膨化飼料營養(yǎng)水平

1.4.2 靜水試驗(yàn)[10-11]流水養(yǎng)殖8周后，于2016年6月27日進(jìn)行靜水養(yǎng)殖試驗(yàn)。將魚按照組別轉(zhuǎn)移至相同規(guī)格的長方形恒溫水族箱，加等量新曝氣后的水，投喂飼料改換成含有0.5% Cr2O3的飼料，試驗(yàn)組與對(duì)照組投喂量相同。養(yǎng)殖條件與流水養(yǎng)殖相同，投喂2 h后用虹吸法收糞便，于65 ℃干燥，合并每次收集的糞便，粉碎后裝瓶備用。

1.4.3 指標(biāo)測(cè)定 飼料及糞便中粗蛋白質(zhì)含量采用凱氏定氮法(GB/T 6432—1994)測(cè)定，粗脂肪含量采用索氏抽提法(GB/T 6433—2006)測(cè)定，粗纖維含量采用過濾法(GB/T 6434—2006)測(cè)定。飼料及糞便中Cr2O3含量采用原子吸收法測(cè)定。

(1)

(2)

(3)

表觀消化率=(1-C1P2/C2P1)×100%。

(4)

式中：C1和C2分別為飼料和糞便中的Cr2O3的含量(%)；P1和P2分別為飼料和糞便中的某營養(yǎng)成分的含量(%)。

1.5 數(shù)據(jù)處理方法

用PASW 18.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，采用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 復(fù)合酶制劑對(duì)黃顙魚生長性能的影響

由表3可知：(1)對(duì)照組別中的各組初均體質(zhì)量差異不顯著，與第1組相比，第2～4組的末體均質(zhì)量、體質(zhì)量增長率、肥滿度隨粗蛋白質(zhì)含量增加而顯著增加(P<0.05)，飼料系數(shù)顯著降低(P<0.05)，且從第5組開始末均體質(zhì)量、體質(zhì)量增長率極顯著增加(P<0.01)，飼料系數(shù)極顯著降低至1.31(P<0.01)，5～8組各生長性能指標(biāo)變化不顯著(P>0.05)。說明在不添加復(fù)合酶制劑情況下，膨化飼料粗蛋白質(zhì)含量達(dá)到40%以上時(shí)，黃顙魚可達(dá)到最佳生長狀態(tài)，隨蛋白質(zhì)含量的繼續(xù)升高，生長性能提高不明顯。當(dāng)膨化飼料粗蛋白質(zhì)含量低于40%，黃顙魚生產(chǎn)性能受到顯著影響，隨著粗蛋白質(zhì)含量減少而逐漸變差。因此，在不添加復(fù)合酶制劑情況下，膨化日糧中的粗蛋白質(zhì)含量不得低于40%。(2)試驗(yàn)組別各組初質(zhì)量差異不顯著，與第Ⅰ組相比，第Ⅱ組末均體質(zhì)量、體質(zhì)量增長率、肥滿度隨粗蛋白質(zhì)含量增加而顯著增加(P<0.05)，飼料系數(shù)顯著降低(P<0.05)，從第Ⅲ組開始末均體質(zhì)量、體質(zhì)量增長率、肥滿度極顯著增加(P<0.01)，飼料系數(shù)極顯著降低(P<0.01)，第Ⅳ～Ⅷ各生長性能指標(biāo)差異不顯著(P>0.05)。說明添加復(fù)合酶制劑，膨化飼料粗蛋白質(zhì)含量達(dá)到38%以上時(shí)，黃顙魚可達(dá)到最佳生長狀態(tài)，即粗蛋白質(zhì)含量可降低至38%，其生產(chǎn)性能不會(huì)受到顯著影響，但低于此粗蛋白質(zhì)含量其生長性能顯著降低(P<0.05)。因此，在添加復(fù)合酶制劑情況下，膨化日糧中的粗蛋白質(zhì)含量可降低至38%，與對(duì)照組不添加復(fù)合酶制劑相比，飼料系數(shù)由1.31降低至1.11，降低了15.27%；體質(zhì)量增長率由617.33%提高至896.61%，提高了45.24%。

表3 復(fù)合酶制劑對(duì)黃顙魚生長性能的影響

由上述分析可見，在最適能蛋比情況下，膨化飼料中添加0.02%復(fù)合酶制劑，可以顯著提高黃顙魚的增質(zhì)量率、降低飼料系數(shù)，提高生產(chǎn)性能，且膨化飼料中粗蛋白質(zhì)含量可降低至38%，不影響黃顙魚的生長性能。

2.2 復(fù)合酶制劑對(duì)黃顙魚營養(yǎng)物代謝及氮排放的影響

由表4可知：(1)添加復(fù)合酶制劑對(duì)黃顙魚營養(yǎng)物表觀消化率及氮排放影響顯著。(2)對(duì)照組的粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗纖維的表觀消化率從第5組開始顯著升高(P<0.05)，這可能由于蛋白質(zhì)含量低于40%時(shí)，氨基酸不能滿足黃顙魚正常生長需求，降低了黃顙魚消化酶的分泌，從而影響了營養(yǎng)物表觀消化率。當(dāng)粗蛋白質(zhì)含量達(dá)到40%以上時(shí)，黃顙魚生長性能恢復(fù)正常，粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗纖維表觀消化率也顯著提高(P<0.05)。試驗(yàn)組的粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和粗纖維的表觀消化率第Ⅱ～Ⅷ組均比第Ⅰ組極顯著升高(P<0.01)，第Ⅳ～Ⅷ組各營養(yǎng)物表觀消化率變化不顯著(P>0.05)；這說明添加復(fù)合酶制劑有效提高了粗蛋白質(zhì)、粗脂肪及粗纖維的表觀消化率，這可能由于復(fù)合酶制劑中含有蛋白酶、纖維素酶等多種酶，促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的消化。(3)就糞氮排放量來說，對(duì)照組從第5組開始極顯著降低(P<0.01)，而試驗(yàn)組從第Ⅲ組開始極顯著降低(P<0.01)。試驗(yàn)組極顯著低于對(duì)照組(P<0.01)，原因可能是試驗(yàn)組復(fù)合酶制劑中蛋白酶促進(jìn)了粗蛋白質(zhì)的消化吸收。(4)對(duì)于水中氮排放量來說，對(duì)照組和試驗(yàn)組的排放量均較少，且差異不顯著。這可能與收集糞便及時(shí)有關(guān)，但添加復(fù)合酶制劑試驗(yàn)組顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。

表4 復(fù)合酶制劑對(duì)黃顙魚營養(yǎng)物表觀消化率及氮排放量的影響

添加復(fù)合酶制劑的試驗(yàn)組從第Ⅲ組粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和粗纖維表觀消化率分別升高至90.25%、64.43%、51.37%，相對(duì)于未添加復(fù)合酶制劑的對(duì)照組5組的69.23%、56.37%、40.15%，粗蛋白質(zhì)表觀消化率提高了23.29%，粗脂肪表觀消化率提高了12.51%，粗纖維表觀消化率提高了21.84%。糞氮排放量試驗(yàn)組約0.44 g/箱相對(duì)于對(duì)照組約2.0 g/箱，極顯著降低了78.00%(P<0.01)，而水中氮排放量試驗(yàn)組約 0.10 mg/L 相對(duì)于對(duì)照組約0.17 mg/L，極顯著降低了 41.18%(P<0.01)。總體來看，黃顙魚膨化飼料中添加 0.02% 的復(fù)合酶制劑有效提高了粗蛋白質(zhì)、粗脂肪及粗纖維的表觀消化率，減少了環(huán)境氮排放量。

3 結(jié)論

試驗(yàn)結(jié)果表明，適量降低膨化配合日糧中粗蛋白質(zhì)含量，采用后噴涂的方法添加耐高溫復(fù)合酶制劑，可有效提高黃顙魚的營養(yǎng)物表觀消化率，并提高黃顙魚生長性能。研究表明，在最適能蛋比33.5～37.7 MJ/kg條件下，黃顙魚膨化飼料添加0.02%復(fù)合酶制劑及0.02%微生態(tài)制劑，飼料粗蛋白質(zhì)含量可降低至38.00%，不影響黃顙魚生長。添加復(fù)合酶制劑試驗(yàn)組糞氮排放量相對(duì)于未添加復(fù)合酶制劑對(duì)照組極顯著降低78.00%(P<0.01)，而水中氮排放量相對(duì)于對(duì)照組極顯著降低41.18%(P<0.01)。因此，向黃顙魚膨化飼料中添加復(fù)合酶制劑，可有效提高黃顙魚生長性能，提高粗蛋白質(zhì)利用率，減少環(huán)境中氮排放量，保護(hù)生態(tài)環(huán)境。