施洋

（河北省固安縣畜牧獸醫(yī)局 065500）

磺胺類藥物是一類人工合成的抗菌藥物，對畜禽消化道細菌性疾病和球蟲病有很好的療效。但是大量在人體累積，會對人體造成危害，所以制定了殘留限量標準及檢測方法。

1 危害

大量食用含有磺胺類藥物殘留的食物，在人體內會引起藥物的逐漸累積，從而引起泌尿系統(tǒng)和消化系統(tǒng)損傷、血小板減少、過敏反應，并導致細菌產生耐藥性，有致癌作用等。各國政府對磺胺類藥物在動物性食品中使用嚴格規(guī)定了最高殘留限量（MRL），目前我國將磺胺類藥物列為動物養(yǎng)殖過程中限制使用的藥物，規(guī)定磺胺類藥物最高殘留限量（MRL）為0.1mg/kg。

2 藥物殘留原因

2.1 未按規(guī)定生產和使用獸藥

藥廠、飼料生產企業(yè)違背相關的標簽規(guī)定，《獸藥管理條例》明確規(guī)定，標簽必須寫明獸藥的主要成分及其含量，有的商家在利益的驅使下未能明確注明，導致養(yǎng)殖者濫用，過量使用藥物，不能規(guī)范用藥，造成藥物殘留。

2.2 沒有按照規(guī)范使用獸藥

養(yǎng)殖者為了更好的經濟效益，濫用和超量使用藥物。有的為了降低經濟損失，在屠宰前使用藥物來掩蓋畜禽的臨床表現(xiàn)，不能嚴格遵守休藥期規(guī)定，造成藥物殘留超標。

3 酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA法）及高效液相色譜法概述

目前，磺胺類藥物殘留量的檢測方法有液相色譜分析法、液質聯(lián)用分析法、免疫分析法、放射免疫分析法、酶聯(lián)免疫吸附法等行之有效的檢測方法。

3.1 酶聯(lián)免疫吸附法

3.1.1 酶聯(lián)免疫吸附法的基本原理

磺胺類藥物具有共同的母核機構，通過適當設計半抗原的分子結構，使磺胺族藥物分子中共同的結構暴露出來，采用此種方法得到免疫原，建立同時檢測磺胺族藥物的酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA法）快速檢測方法。樣品中磺胺類藥物與酶標板上固定的抗原特異性競爭抗體，加入酶標記物，催化顯色，通過酶標儀進行測定，得出吸光度值（OD值）。

3.1.2 酶聯(lián)免疫吸附法的優(yōu)缺點

磺胺類藥物殘留的酶聯(lián)免疫吸附法根據試劑盒廠家的不同，操作流程及步驟略有不同，總體來說都具有方便，快捷，靈敏度高等優(yōu)點，適用于大量樣品篩查。缺點是只能用于篩查，若檢測結果為陽性，應用高效液相色譜法或液質聯(lián)用等方法進行定量確證。

3.2 高效液相色譜法概述

3.2.1 高效液相色譜法具有分離效率高，選擇性好，檢測靈敏度高，能精準的檢測出試樣中藥物殘留含量等優(yōu)點。但與酶聯(lián)免疫吸附法相比，具有樣品處理步驟繁瑣，需用到的試劑種類多，標準要求高，檢測時間長等缺點。

3.2.2 樣品前處理

樣品前處理步驟較多，但總體分為兩大步，提取及凈化。用乙腈提取試樣中的藥物殘留成分，正己烷分配，最后經過堿性氧化鋁SPE柱凈化后得到可供高效液相色譜儀測定的樣品。

3.2.3 上機測定

設定色譜條件后，取適量標準溶液和相應濃度的標準工作液，以色譜峰面積積分值定量，得出液相色譜圖。

3.2.4 結果計算

公式 X=CV/M

X－樣品組織中磺胺類藥物的殘留量

C－試樣溶液中對應的磺胺類藥物的濃度

V－試樣溶液總體積

M－樣品量