張東升
(甘肅省通渭縣畜牧獸醫(yī)服務(wù)中心 743300)
豬大腸桿菌病是養(yǎng)豬臨床常見的細(xì)菌病之一,多發(fā)于仔豬,主要表現(xiàn)黃白痢以及仔豬水腫病,死亡率較高,臨床危害較大[1]。成年豬感染后多表現(xiàn)一過性,以管理水平差,養(yǎng)殖設(shè)備落后的豬場發(fā)病較多。為了能讓大家更好地認(rèn)識(shí)本病,下面筆者就其臨床檢疫和大家作一下交流。
大腸桿菌又名大腸埃希氏桿菌,革蘭氏染色呈陰性,桿狀或短桿狀,部分菌株表面有莢膜,大小約為 2~3μm×0.4~0.7μm,不形成芽孢。大腸桿菌在自然界分布廣泛,空氣、土壤、河流、湖泊、沼澤、沙漠等環(huán)境中都有本菌的分布,動(dòng)物體表、口腔、鼻腔以及腸道中也都有本菌的分布。對(duì)外界環(huán)境的抵抗力較強(qiáng),對(duì)各種物理和化學(xué)因素比較敏感,60℃條件下30min即可失去毒力,120℃條件下高壓滅菌瞬間死亡,消毒劑中對(duì)甲酚、石炭酸、碘制劑和戊二醛等比較敏感。資料表明,大腸桿菌血清型極多,菌體抗原(O)、莢膜抗原(K)和鞭毛抗原(H)保守統(tǒng)計(jì)分別能夠達(dá)到 145種、90種和49種以上,他們之間的相互組合可形成眾多不同的血清型菌株。
感染大腸桿菌的病豬主要以仔豬為主[2],臨床表現(xiàn)仔豬黃白痢和仔豬水腫病。
黃痢潛伏期短,一般在出生后3d之內(nèi)即可發(fā)病,豬群中常常突然出現(xiàn)1~2頭全身瘦弱,拉黃色漿狀稀糞的豬,糞便中含有未完全消化的凝乳片,病豬很快死亡。剖檢可見腸道膨脹,內(nèi)容物多量,呈黃色稀糊樣,有時(shí)含有氣體,腸黏膜卡他性病變,腸系膜淋巴結(jié)出血,肝腎有凝固型壞死灶。
白痢主要發(fā)病于出生后10~25日齡間的豬。病豬可突然出血腹瀉,糞便呈灰白色絮狀,腥臭,常污染肛門和皮膚。病程2~3d,有的能拖延一周以上,發(fā)病期間采食量基本無影響,死亡率也較黃痢低很多,一般在3%以內(nèi)。病死豬剖檢可見尸體蒼白消瘦、腸黏膜有卡他性病變,腸系膜淋巴結(jié)輕度腫脹。
仔豬水腫本質(zhì)是一種腸毒血癥,特征為胃壁及其他部位發(fā)生水腫,發(fā)病日齡集中在30~90日齡,通常情況下發(fā)病率不高,但表現(xiàn)癥狀的豬大部分最終死亡,病死率可達(dá)80%以上。尤以體格健壯、生長速度快的豬發(fā)病最為明顯。水腫是本病的典型癥狀,病豬眼瞼、結(jié)膜、頭部等表現(xiàn)腫大,有時(shí)會(huì)波及到頸部和腹部,胃壁水腫,常見于胃大彎、底部、賁門和食道后端,嚴(yán)重者水腫部位有出血,除此之外,喉頭、膽囊、大腸、淋巴結(jié)等部位也會(huì)表現(xiàn)水腫。
從臨床上看,本病大致可分為兩種感染途徑,一種是體外途徑,主要發(fā)病部位在腸道,仔豬表現(xiàn)黃白痢[3],另外一種途徑是發(fā)病部位在體內(nèi),病原及其毒素直接導(dǎo)致組織器官的損害,仔豬表現(xiàn)水腫。這兩種途徑大腸桿菌存在的部位不同,臨床檢疫時(shí)采集病料的方法和檢驗(yàn)過程也有區(qū)別。
3.1.1 面臨問題
仔豬黃白痢病原集中在消化道,由于仔豬出生后,哺乳過程中,乳房皮膚表面攜帶的微生物可經(jīng)過口腔進(jìn)入腸道,并在第一時(shí)間內(nèi)進(jìn)行定植,這些微生物在采集病料分離菌時(shí)可對(duì)結(jié)果造成干擾,分不清哪些是病原菌,哪些是定植菌。另外,病豬一旦將糞便排出體外,肛門周圍、空氣及地面的微生物也會(huì)對(duì)糞便樣本造成污染,這就使得檢驗(yàn)結(jié)果具有一定的不確定性。
3.1.2 解決方案
針對(duì)面臨的問題,為了能將污染微生物幾率降至最低,臨床可通過肛門拭子取樣或直接剖檢病死豬無菌采取腸道內(nèi)容物的方法來對(duì)糞便進(jìn)行分析。肛門拭子取樣可先將病豬肛門及尾根處用水清洗,碘伏消毒,酒精脫碘,之后用無菌棉簽深入直腸3~5cm,微攪動(dòng)后取出,將棉頭上沾的糞便直接在綿羊血瓊脂平板、普通營養(yǎng)瓊脂平板、麥康凱瓊脂平板和伊紅美蘭瓊脂平板上接種,37℃恒溫條件下培養(yǎng)24h,觀察結(jié)果。
3.1.3 結(jié)果判定
如果普通營養(yǎng)瓊脂平板上和綿羊血瓊脂平板上有表面光滑、邊緣整齊、圓形、半透明、凸起的小菌落出現(xiàn),且菌落在麥康凱瓊脂平板上呈粉紅色,在伊紅美蘭瓊脂平板上呈紫紅色并有金屬光澤,則表明有大腸桿菌感染。由于正常腸道中也有非致病性的大腸桿菌存在,故再進(jìn)一步作菌型鑒定,確定是黃白痢型大腸桿菌后就可對(duì)本病確診。
仔豬水腫病病原感染部位在機(jī)體內(nèi)環(huán)境,檢疫時(shí)需要對(duì)實(shí)體組織或體液進(jìn)行取樣,實(shí)體組織可選擇水腫部位的組織,也可選擇肝臟,這些部位病原菌濃度高,容易分離到。分離時(shí)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作,提前將器械工具滅菌,解剖時(shí)切開的局部皮膚先用碘伏消毒,之后酒精脫碘,取樣本組織時(shí)盡量一次性取下,完畢后在酒精燈火焰旁將平皿開個(gè)小口,口對(duì)著火焰,將樣本組織放入,之后在無菌操作臺(tái)中用組織樣本的橫切面抹板。如果是取水腫液,可直接用無菌注射器扎入抽取,之后將水腫液接種于平板。值得一提的是,雖然水腫液易分離,但其本質(zhì)是炎性反應(yīng)體液不對(duì)稱分配的結(jié)果,里面病原含量低,很多時(shí)候并不能成功分離到大腸桿菌,需要盡量多抽取樣本,多選幾個(gè)水腫病灶,以增加成功分離的幾率。