姚高友,吳浩敏,譚 杰,吳羽媛,夏 靜,劉志剛
( 1.廣東海洋大學(xué) 水產(chǎn)學(xué)院,廣東 湛江524088; 2.廣東省南海經(jīng)濟(jì)無(wú)脊椎動(dòng)物健康養(yǎng)殖工程研究中心,廣東 湛江 524088; 3.湛江銀浪海洋生物技術(shù)有限公司,廣東 湛江524022 )
方斑東風(fēng)螺(Babyloniaareolata)屬腹足綱、蛾螺科、東風(fēng)螺屬,俗稱花螺、海豬螺,主要分布于東南亞地區(qū)及我國(guó)東、南沿海。其肉質(zhì)鮮美,營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高,深受廣大消費(fèi)者的青睞,是國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)近年十分暢銷的優(yōu)質(zhì)海產(chǎn)貝類[1]。但因海區(qū)污染和過度捕撈,導(dǎo)致野生資源匱乏[2],因此,方斑東風(fēng)螺的人工增養(yǎng)殖技術(shù)研究日益受到廣泛的重視,對(duì)方斑東風(fēng)螺的種苗繁育[3-5]、養(yǎng)殖[6-10]等關(guān)鍵技術(shù)已有較多研究,促進(jìn)了產(chǎn)業(yè)的發(fā)展,而目前養(yǎng)殖方斑東風(fēng)螺的苗種主要來(lái)自人工繁育苗,但人工苗種的生產(chǎn)常因餌料、水質(zhì)、病害、氣候等條件的影響而很不穩(wěn)定,限制了方斑東風(fēng)螺產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。
方斑東風(fēng)螺早期發(fā)育主要依靠自身卵黃的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),當(dāng)發(fā)育至面盤幼蟲時(shí)開始從外界攝入營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)[11],因此,餌料是方斑東風(fēng)螺幼蟲生長(zhǎng)發(fā)育的物質(zhì)和能量基礎(chǔ),對(duì)幼蟲的生長(zhǎng)及存活起著關(guān)鍵作用。目前方斑東風(fēng)螺幼蟲餌料以單胞藻為主,而單胞藻培養(yǎng)是一項(xiàng)比較繁重的工作,且在培養(yǎng)中易受天氣、原生生物、人為操作等諸多因素影響,生產(chǎn)極不穩(wěn)定,影響幼蟲的餌料供應(yīng),從而給育苗生產(chǎn)帶來(lái)嚴(yán)重的影響[12]。開發(fā)方斑東風(fēng)螺幼蟲的人工餌料,有利于降低育苗生產(chǎn)中的生產(chǎn)成本及風(fēng)險(xiǎn),提高經(jīng)濟(jì)效益。目前,國(guó)內(nèi)外在用人工餌料替代天然餌料開展貝類育苗方面已做過較多研究[12-18],這些研究結(jié)果證明人工餌料能夠部分甚至完全替代天然餌料并取得良好的效果。因此尋找合適的人工餌料來(lái)全部或部分代替天然餌料對(duì)方斑東風(fēng)螺育苗生產(chǎn)具有重要意義。本試驗(yàn)研究了在不同人工餌料及與添加劑混合投喂條件下方斑東風(fēng)螺幼蟲生長(zhǎng)、存活上的差異,旨在為方斑東風(fēng)螺幼蟲人工配合飼料的開發(fā)及人工育苗技術(shù)的改進(jìn)提供理論和實(shí)踐指導(dǎo)。
試驗(yàn)幼蟲為來(lái)自湛江銀浪海洋生物技術(shù)有限公司的早期面盤幼蟲,幼蟲平均殼高(518.8±24.50) μm。
試驗(yàn)分為6組,每組投喂不同的人工餌料,各組設(shè)2個(gè)重復(fù)。試驗(yàn)開始前隨機(jī)抽取40個(gè)幼蟲測(cè)量初始?xì)じ?。試?yàn)期間每日從各組中隨機(jī)抽取30個(gè)幼蟲測(cè)量殼高并在試驗(yàn)的第6 d、第10 d、第14 d統(tǒng)計(jì)各驗(yàn)組幼蟲的存活率。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)計(jì)算2~8 d、10~12 d、14 d的殼高特定生長(zhǎng)率。殼高的特定生長(zhǎng)率(SGR)按下式計(jì)算:
SGR/%·d-1=(lnL2-lnL1)/t×100%
式中L1和L2分別為幼蟲的初始?xì)じ?μm)和試驗(yàn)結(jié)束時(shí)的殼高(μm),t為試驗(yàn)持續(xù)時(shí)間(d)。
試驗(yàn)在白色聚乙烯塑料桶中進(jìn)行,水溫(29.0±0.3) ℃,鹽度28.7±0.3,幼蟲密度4~5 個(gè)/mL。餌料用400目篩絹袋進(jìn)行過濾,每日8:00和16:00投喂,第1 d投喂人工餌料1.5 g,混合組另投喂0.5 g添加劑,早晚投喂量比例為1∶2,每日的投喂量在前日的基礎(chǔ)上增加10%。投喂前觀察幼蟲胃飽滿度,若幼蟲對(duì)飼料的消化速度慢,可在試驗(yàn)組的飼料中適當(dāng)添加消化整腸素。試驗(yàn)人工餌料來(lái)自博尚生物飼料有限公司,各飼料的主要營(yíng)養(yǎng)成分如下:
蝦片(博尚牌高級(jí)雙色蝦片):主要成分為魚粉、南極蝦粉、海蟲粉等。其營(yíng)養(yǎng)組成為:粗蛋白50%,粗脂肪3%,粗纖維3%,灰分17%,水分10%。
黑粒(八卦牌黑粒寶):使主要成分為白魚粉、南極蝦粉、烏賊粉等。其營(yíng)養(yǎng)組成為:粗蛋白40%,粗脂肪6%,粗纖維3%,灰分16%,水分10%。
螺旋藻粉(八卦牌螺旋藻):主要成分為螺旋藻。其營(yíng)養(yǎng)組成為:粗蛋白65%,粗脂肪5%,粗纖維3%,灰分10%,水分7%。
B.P.(博尚牌B.P.):主要成分為蛋粉、酪蛋白、魚肉蛋白等。其營(yíng)養(yǎng)組成為:粗蛋白43%,粗脂肪15%,粗纖維3%,灰分5%,水分10%。
蝦元(八卦牌蝦元):為飼料添加劑,含有維生素A、B1、B2、D、E等。
消化整腸素:為飼料添加劑,由多種酵素和乳酸菌組成。
數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示,使用SPSS 19.0軟件進(jìn)行單因素方差分析,并結(jié)合Duncan′s法進(jìn)行多重比較,檢驗(yàn)各試驗(yàn)組間的顯著性差異,顯著性水平為0.05,比較結(jié)果的顯著性與否僅限于統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
3種混合投喂試驗(yàn)組幼蟲存活率高于3種單一投喂試驗(yàn)組?;旌贤段乖囼?yàn)組中,螺旋藻粉+B.P.組存活率顯著高于黑粒+蝦元和蝦片+蝦元組;單一投喂試驗(yàn)組中,單獨(dú)投喂螺旋藻粉組方斑東風(fēng)螺幼蟲存活率第6 d和10 d顯著高于其他各組,第14 d幼蟲存活率顯著低于單獨(dú)投喂蝦片和黑粒組(P<0.05)(表1)。
表1 不同餌料條件下方斑東風(fēng)螺幼蟲的存活率 %
注:同列數(shù)據(jù)不同字母表示差異顯著(P<0.05).
前4 d各試驗(yàn)組差異不顯著(P>0.05);第6~8 d,3種混合投喂試驗(yàn)組幼蟲殼高高于3種單一投喂試驗(yàn)組,混合餌料投喂組中,螺旋藻粉+B.P.組殼高顯著高于其他各組(P<0.05),蝦片+蝦元和黑粒+蝦元間差異不顯著(P>0.05)。單一投喂組中,單獨(dú)投喂黑粒組幼蟲殼高顯著低于其他各組。第10~12 d,3種混合投喂試驗(yàn)組幼蟲殼高與相對(duì)應(yīng)的3種單一投喂試驗(yàn)組相比仍具有明顯的生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì),螺旋藻粉+B.P.組顯著高于其他各組,單獨(dú)投喂螺旋藻粉幼蟲殼高顯著低于其他各組(P<0.05)。第14 d,混合投喂螺旋藻粉+B.P.組殼高最高,但與其他混合投喂組及單獨(dú)投喂黑粒組幼蟲殼高差異不顯著(P>0.05),單獨(dú)投喂螺旋藻粉組幼蟲殼高顯著低于其他各組(P<0.05)。
試驗(yàn)期內(nèi)3種混合投喂試驗(yàn)組幼蟲殼高特定生長(zhǎng)率高于3種單一投喂試驗(yàn)組(圖1),混合投喂組中,2~8 d螺旋藻粉+B.P.組(3.96%/d)殼高特定生長(zhǎng)率顯著高于其他各組(P<0.05),單獨(dú)投喂螺旋藻粉(2.06%/d)顯著低于其他各組;10~12 d黑粒+蝦元組殼高特定生長(zhǎng)率最高(4.54%/d),顯著高于螺旋藻粉+B.P.組(3.40%/d),與蝦片+蝦元組(3.97%/d)差異不顯著;14 d內(nèi)單獨(dú)投喂螺旋藻粉(2.05%/d)方斑東風(fēng)螺幼蟲殼高顯著低于其他各組,螺旋藻粉+B.P.殼高特定生長(zhǎng)率最高(3.68%/d),但與黑粒+蝦元組(3.59%/d)和蝦片+蝦元組(3.31%/d)差異不顯著(P>0.05)。
表2 不同餌料條件下方斑東風(fēng)螺幼蟲殼高 μm
注:同列數(shù)據(jù)不同字母表示差異顯著(P<0.05).
圖1 不同餌料條件下方斑東風(fēng)螺幼蟲殼高特定生長(zhǎng)率
研究表明,貝類幼蟲的最適餌料隨生長(zhǎng)發(fā)育的推進(jìn)而不同。在貝類浮游幼蟲階段,投喂金藻較其他藻類的效果更好,但對(duì)于已完成變態(tài)發(fā)育的稚貝,投喂金藻的稚貝生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)并不明顯[19-22]?;谶@種現(xiàn)象,王慶志等[23]認(rèn)為,由于營(yíng)養(yǎng)需求的不同,貝類幼蟲在不同生長(zhǎng)階段之間存在一個(gè)營(yíng)養(yǎng)需求轉(zhuǎn)化的過渡期。方斑東風(fēng)螺幼蟲在匍匐幼蟲前主要以浮游藻類為食,當(dāng)變態(tài)為匍匐幼蟲時(shí)逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)槿馐承訹24],開始逐漸以攝食動(dòng)物性餌料為主。本研究發(fā)現(xiàn),前期單獨(dú)投喂螺旋藻粉,方斑東風(fēng)螺幼蟲存活率最高,但后期降為最低,顯著低于單獨(dú)投喂蝦片與黑粒組。原因可能是蝦片、黑粒是動(dòng)物性餌料,而螺旋藻粉則是植物性餌料。試驗(yàn)后期方斑東風(fēng)螺幼蟲發(fā)育至匍匐幼蟲,完成變態(tài)發(fā)育后的營(yíng)養(yǎng)需求及食性開始發(fā)生變化,更加偏向動(dòng)物性餌料并大幅減少對(duì)螺旋藻粉的攝取。單獨(dú)投喂螺旋藻粉已經(jīng)不能滿足此階段稚貝的生理及營(yíng)養(yǎng)需求并開始大量死亡。
由于早期面盤幼蟲殘留有卵黃塊,此階段幼蟲可以通過吸收卵黃塊的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)維持生長(zhǎng),因此外界餌料對(duì)貝類此階段幼蟲的生長(zhǎng)及存活無(wú)顯著性影響[25],由于餌料原因引起的育苗失敗一般發(fā)生在早期面盤幼蟲后[11]。一般認(rèn)為蛋白質(zhì)、脂肪、糖類是動(dòng)物的三大基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)素[26],餌料中蛋白質(zhì)、脂肪、糖類含量能夠顯著影響貝類的生長(zhǎng)及存活[27-29],而對(duì)于貝類幼蟲來(lái)說(shuō),現(xiàn)有研究表明幼蟲餌料中脂肪對(duì)其生長(zhǎng)及存活影響最為顯著。長(zhǎng)牡蠣(Crassostreagigas)在變態(tài)附著1個(gè)月內(nèi)主要以脂肪作為能源物質(zhì)[30]。Numaguchi[31]用微膠囊化鱈魚油投喂馬氏珠母貝(Pinctadamartensii) 稚貝,證實(shí)不飽和脂肪酸對(duì)馬氏珠母貝生長(zhǎng)來(lái)說(shuō)是必需的。Langdon等[32]發(fā)現(xiàn)餌料中的二十二碳六烯酸等不飽和脂肪酸能夠明顯促進(jìn)長(zhǎng)牡蠣的生長(zhǎng)。還有研究發(fā)現(xiàn),二十二碳六烯酸和二十碳五烯酸夠在貝類胚胎的形成和幼蟲的能量供應(yīng)上發(fā)揮重要作用,而二十二碳六烯酸是貝類幼蟲的細(xì)胞膜和功能完整的關(guān)鍵成分[25,33]。
本試驗(yàn)利用3種人工餌料研究了不同人工餌料及添加劑對(duì)方斑東風(fēng)螺幼蟲生長(zhǎng)及存活的影響,結(jié)果表明,人工餌料與添加劑混合投喂比對(duì)應(yīng)單一投喂更能促進(jìn)幼蟲生長(zhǎng)及存活,其中以螺旋藻組+B.P.效果最好。在單一投喂組中,各試驗(yàn)組在試驗(yàn)初期生長(zhǎng)差異不明顯,但投喂螺旋藻粉的存活率明顯高于其他試驗(yàn)組。試驗(yàn)后期單獨(dú)投喂螺旋藻粉生長(zhǎng)及存活最差。說(shuō)明試驗(yàn)初期方斑東風(fēng)螺幼蟲處于早期的面盤幼蟲階段,此階段的幼蟲能利用體內(nèi)殘留的卵黃,對(duì)外界的營(yíng)養(yǎng)需求不大,因此在試驗(yàn)早期各試驗(yàn)組生長(zhǎng)差異相對(duì)不大。試驗(yàn)中期及后期,幼蟲卵黃塊消失,開始攝食不同人工餌料,造成后期各試驗(yàn)組幼蟲生長(zhǎng)及存活的差異。通過對(duì)試驗(yàn)中所使用的三種人工餌料及添加劑成分分析發(fā)現(xiàn),B.P.及黑粒中含有較高的對(duì)貝類幼蟲生長(zhǎng)發(fā)育至關(guān)重要脂肪,尤其是B.P.脂肪含量高達(dá)15%,可能相對(duì)含有的對(duì)幼蟲生長(zhǎng)重要的多不飽和脂肪酸如二十二碳六烯酸、二十碳五烯酸含量較高,所以此類餌料或添加劑更能促進(jìn)幼蟲的生長(zhǎng)及存活。
蝦元的主要成分為多種維生素,而維生素作為在水產(chǎn)養(yǎng)殖中常用的添加劑對(duì)水產(chǎn)經(jīng)濟(jì)動(dòng)物生長(zhǎng)及存活影響顯著。Zhu等[34]研究發(fā)現(xiàn)在飼料中添加維生素B1能提高皺紋盤鮑(Haliotisdiscushannai)的質(zhì)量增加率和貝殼日增長(zhǎng);張春曉等[35]研究發(fā)現(xiàn),飼料中添加4.1 mg/kg的維生素B6 能顯著提高大黃魚(Pseudosciaenacrocea)的特定生長(zhǎng)率和存活率;徐志昌等[36]報(bào)道,飼料中維生素B6的含量為140 mg/kg時(shí),中國(guó)明對(duì)蝦(Fenneropenaeuschinensis)的存活率、質(zhì)量增加率、增長(zhǎng)率顯著提高。本試驗(yàn)中添加蝦元組生長(zhǎng)及存活高于相對(duì)應(yīng)的單一投喂組,說(shuō)明在餌料中加入蝦元能夠促進(jìn)方斑東風(fēng)螺幼蟲的生長(zhǎng)及存活。
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