杜忠偉 胡志強 亢學(xué)平 王 旭 李 健 王 鑫

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不同靈芝菌株林下仿野生栽培對比試驗

杜忠偉 胡志強 亢學(xué)平 王 旭 李 健 王 鑫*

（延邊朝鮮族自治州農(nóng)業(yè)科學(xué)院，吉林 延邊 133000）

以12個靈芝菌株為試驗材料，采用林下覆土出菇的試驗方法，對比在相同環(huán)境條件下不同靈芝菌絲體的長勢、子實體形態(tài)特征。結(jié)果表明，不同靈芝菌株在相同條件下生長差異明顯，以編號為12即龍泉市農(nóng)業(yè)局的靈芝菌種綜合性狀較好，適合于林下仿野生栽培。

靈芝；菌株；菌絲體；仿野生；子實體

靈芝（）在我國有著悠久的歷史文化，深受人們的推崇，是著名的藥用真菌，廣泛分布于我國東部地區(qū)。國內(nèi)外對其研究、生產(chǎn)和應(yīng)用十分重視，已研發(fā)出較多藥用和保健用產(chǎn)品。靈芝含有的靈芝多糖、三萜類化合物等成分有顯著的藥理作用，對抗腫瘤、保肝護肝、降血糖血脂、調(diào)節(jié)心血管系統(tǒng)等有很好的功效[1～5]。目前我國大部分靈芝栽培以溫室人工栽培為主，少有林下仿野生栽培，而靈芝的產(chǎn)量、質(zhì)量及有效成分的積累在很大程度上受栽培原料及栽培環(huán)境條件的影響[6，7]。我們通過引進國內(nèi)不同地方的靈芝菌株，在吉林延邊地區(qū)進行林下仿野生栽培試驗，測定比較不同菌株菌絲生長狀態(tài)和子實體形態(tài)，以選育出適合本地區(qū)林下仿野生栽培的優(yōu)良靈芝品種。

表1 菌株編號及來源

1 材料與方法

1.1 供試菌株

從不同地區(qū)引進12個靈芝菌株樣本，試驗編號和來源如表1所示。

1.2 培養(yǎng)基制備

母種培養(yǎng)基選用麥麩浸汁，配方為麥麩50 g、瓊脂粉15 g、葡萄糖20 g、磷酸二氫鉀3 g、硫酸鎂1.5 g、水1 000 mL。原種培養(yǎng)基配方：硬雜木木屑86%、稻糠10%、豆粉2%、白灰1%、石膏1%。試驗采用段木栽培法，選用樺樹、櫟樹等硬雜木。

1.3 試驗方法

試驗所用母種、原種在延邊朝鮮族自治州農(nóng)業(yè)科學(xué)院實驗室制作；栽培袋制作和仿野生林下試驗地點選在吉林省和龍市頭道鎮(zhèn)林地。

（1）母種的制作。配制好的培養(yǎng)基裝入試管中，經(jīng)高壓滅菌、擺斜面、冷卻后移入超凈工作臺中，紫外線殺菌30 min。每個菌株制作25支試管菌種，放入恒溫培養(yǎng)箱25 ℃暗培養(yǎng)，經(jīng)10天左右長滿試管，記錄母種菌絲長滿試管時間，并及時挑出感染雜菌的試管。

（2）原種的制作。培養(yǎng)基按比例配好后，混合均勻，使含水量為65%，裝入栽培袋中，經(jīng)高壓滅菌，冷卻后移入超凈工作臺中接種，每個菌株接種100個料袋，每支試管接4個料袋。將制作好的原種轉(zhuǎn)移到發(fā)菌室，25 ℃恒溫培養(yǎng)。

（3）栽培段制作。將硬雜木枝椏材切段捆在一起，直徑為20 cm左右，裝入規(guī)格為22×43×0.003（cm）的聚乙烯栽培袋中，采用常壓滅菌，溫度升至100 ℃后保持13 h，再燜24 h出鍋。滅菌結(jié)束待料包溫度降至40 ℃左右時接種。之后將所有試驗袋統(tǒng)一移入培養(yǎng)室進行避光培養(yǎng)，培養(yǎng)室溫度控制在24～28 ℃，空氣相對濕度控制在70%左右，并保持培養(yǎng)室內(nèi)空氣流通。發(fā)菌期間及時將污染雜菌的菌袋挑出。菌絲長滿袋后放置10天左右，當(dāng)袋口出現(xiàn)菌皮時，移至林下進行仿野生栽培。記錄菌絲長滿菌袋的時間。

1.4 栽培管理方法

（1）出菇管理。菌絲滿袋后移入林下覆土出芝。選擇三分陽七分陰的林地坡地，覆土前脫掉塑料袋，將菌段豎直擺放。菌段間隔10 cm左右，5個菌段擺成一排。擺好后在菌段面上覆蓋約3 cm厚的泥土。挖好排水溝，保證出芝場地不低洼積水，覆土后30天左右開始出原基。記錄覆土?xí)r間、出芝時間、采收時間、產(chǎn)量和外觀品質(zhì)等。

（2）采收。在天氣轉(zhuǎn)冷、靈芝成熟而未彈孢子時采收并測量子實體的大小，經(jīng)晾干后稱重，計算平均大小和干重。

2 結(jié)果與分析

2.1 生長周期

母種接種后2～3天菌絲開始萌發(fā)，經(jīng)10天左右長滿試管，相同接種時間和培養(yǎng)條件下，12個靈芝菌株的菌絲體長勢存在差別（表2），其中編號為8、9、10、12的菌株菌絲長勢好，長滿試管斜面快，菌絲潔白；編號為2、3、7的菌株菌絲長勢弱，生長速度慢，菌絲稀疏，且產(chǎn)生黃色色素。

2月中旬制作栽培袋，菌絲滿袋時間為4月中下旬，養(yǎng)菌時間在60天左右，因東北氣溫較低，5月下旬林下覆土栽培，經(jīng)一個月左右時間出現(xiàn)原基。試驗證明覆土產(chǎn)生原基的快慢與菌絲長勢成正相關(guān)（表2）。12、8、9和10號菌株，覆土產(chǎn)生原基時間分別為27天、28天、28天和28天。其余菌株均超過30天。2號菌株最慢，35天才產(chǎn)生原基。

表2 不同靈芝菌株周期生長對比

注 ：菌絲長勢“+”多表示菌絲粗壯濃白，“+”少表示菌絲長勢較弱。

2.2 子實體形態(tài)

9月中旬靈芝子實體達(dá)到成熟，彈射孢子前對各品種進行拍照（圖1），采收后測量子實體的菌蓋大小和菌柄長短并計算平均值。曬干后，每品種隨機挑選20個樣本，測每個子實體干重并計算平均值。結(jié)果，平均干重以12號菌株較高，為60.25 g；編號11和3居次，分別為51.22 g和50.18 g（表3）。

3 結(jié) 論

通過對12個靈芝菌株的菌絲生長和在林下仿野生出菇的對比試驗，發(fā)現(xiàn)12號靈芝菌株菌絲生長速度快，子實體菌蓋呈暗紅色，菌蓋大而厚，菌柄短，表現(xiàn)性狀優(yōu)良，子實體形態(tài)更接近野生靈芝，與其他菌株存在明顯的差異。本試驗靈芝菌株的子實體形態(tài)受當(dāng)?shù)氐臍夂驐l件影響明顯，因此因地制宜選育出適合本地區(qū)的靈芝菌種，對于發(fā)展林下仿野生栽培靈芝產(chǎn)業(yè)有著重要的意義。繼之，應(yīng)對適合林下仿野生栽培的菌株進行進一步的試驗研究，以觀察其穩(wěn)定性，并測定靈芝多糖、萜類化合物等的含量。

圖1 試驗菌株的靈芝子實體照片

表3 子實體形態(tài)特征及單重

[1] 戴玉成, 曹云, 周麗偉, 等. 中國靈芝學(xué)名之管見[J]. 菌物學(xué)報, 2013, 32(6): 947-952.

[2] 于華崢, 劉艷芳, 周帥, 等. 靈芝子實體、菌絲體及孢子粉中多糖成分差異比較研究[J]. 菌物學(xué)報, 2016, 35(2): 170-177.

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[4] 張曉云, 楊春清. 靈芝的化學(xué)成分和藥理作用[J]. 國外醫(yī)藥·植物藥分冊, 2006, 21(4): 152-155.

[5] 呂文輝, 張源. 靈芝的藥用價值[J]. 中華綜合臨床醫(yī)學(xué)雜志, 2008, 10(4): 71.

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現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項（CARS-20）

杜忠偉（1989—），男，農(nóng)學(xué)碩士，研究實習(xí)員，從事食藥用菌栽培育種研究，E-mail：337230214@qq.com。

，E-mail：wangxin5887@163.com。

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