蔣征奎，李 曉，張新峰

1.鄭州大學附屬腫瘤醫(yī)院(河南省腫瘤醫(yī)院)藥學部(鄭州 450000), 2.河南省植物天然產(chǎn)物開發(fā)工程研究中心(河南省科學院)(鄭州 450000)

中藥苦參是豆科槐屬植物苦參的根，味苦、性寒，有清熱燥濕、殺蟲、利尿的功效，苦參有治療濕熱、黃疽、痢疾、腸炎、皮膚瘙癢等癥的作用，同時還能夠?qū)⒖咕翱拱┑茸饔糜行Оl(fā)揮出來[1]。近年來，醫(yī)學界進行了很多研究[2]，發(fā)現(xiàn)苦參及其生物堿有多種藥理作用，如對過敏、病原微生物、心律失常等進行抵抗，用于濕熱下痢、黃疸、赤白帶下、陰部瘙癢等，常與黃柏、龍膽草等合用；用于周身風癢，疥瘡頑癬，常合赤芍、地黃、白蘚皮等同用；用于麻風，常與大風子等同用?？鄥⒂糜诙喾N外科疾患，如濕疹、癤瘡、癬疥、麻風等?？杉逅庀?，亦可水煎內(nèi)服。苦參能治療下焦?jié)駸岬男”悴焕?，常配車前子、木通同用。而相關(guān)醫(yī)學學者也日益廣泛地關(guān)注了其抗腫瘤活性[3]。本研究探討了中藥苦參在小鼠體內(nèi)的抗腫瘤作用，現(xiàn)報告如下。

材料與方法

1 材 料

動物選用河南醫(yī)科大學動物實驗中心提供的雌雄封閉群昆明種小鼠20只，體重18-20 g；藥物選用河南醫(yī)科大學一附院藥材科提供的苦參，苦參原液(g/ml)的制備方法為將1000 g苦參取出來，然后將1000 ml蒸餾水加入，進行24 h的浸泡，隔水進行1 h的煮沸，將藥液倒出后在將水加入進行1 h的煮沸，將藥液倒出，合并濃縮為1000 ml；試劑選用GIBCO Laboratories提供的RPMI 1640培養(yǎng)液及Fluka AG Swiss提供的MTT；細胞株選用本所藥理研究組提供的ECA細胞株，小鼠S180肉瘤。

2 方 法

2.1 體內(nèi)抑瘤實驗：為腹水型小鼠S180肉瘤接種2×105/只細胞，24 h后將其隨機分為2.5 g/kg苦參組、5.0 g/kg苦參組、10.0 g/kg苦參組、對照組四組，每組5只。苦參組采用0.1 ml苦參溶液灌胃，每天1次，飲水中不再將藥液加入，給藥劑量分別為2.5、5.0、10.0 g/kg；對照組小鼠任意應(yīng)用自來水。用藥后10 d脫頸活殺，將瘤取出來稱重。反復(fù)進行3次實驗，將抑瘤率計算出來，計算方法為對照組與苦參組平均瘤重之差與對照組平均瘤重的百分率[4]。

2.2 體外抑瘤實驗：用培養(yǎng)液稀釋具有良好生長的艾氏腹水癌(Ehrlich ascites cancer,ECA)細胞為1×105/ml濃度，在40孔培養(yǎng)板上將200 μl加入到每孔中，苦參組將不同濃度(5 μg、10 μg、20 μg、40 μg)的苦參藥液加入到每孔中，平行作3孔，對照組不將苦參加入其中，在37℃、5%CO2濕環(huán)境中放置，進行72h的孵育，在酶標測定儀上570 nm處運用MTT比色法對各孔OD值進行測量，然后將細胞生長抑制率計算出來，計算方法為1與含苦參孔平均光密度(Optical density,OD)值與正常對照孔平均OD值之比差的百分率[5]。

3 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 21.0統(tǒng)計學軟件，四組小鼠的抑瘤率、不同苦參含量小鼠的瘤細胞生長抑制率等計數(shù)資料用率表示，用χ2檢驗，檢驗水準α=0.05。

結(jié) 果

1 四組小鼠的抑瘤率比較

2.5 g/kg苦參組、5.0 g/kg苦參組、10.0 g/kg苦參組小鼠的瘤重均顯著低于對照組(P<0.05)，而10.0 g/kg苦參組小鼠的瘤重顯著低于2.5 g/kg、5.0 g/kg苦參組小鼠(P<0.05)，抑瘤率顯著高于2.5 g/kg、5.0 g/kg苦參組小鼠(P<0.05)，5.0 g/kg苦參組小鼠的瘤重顯著低于2.5 g/kg苦參組(P<0.05)，抑瘤率顯著高于2.5 g/kg苦參組(P<0.05)， 見表1。

表1 四組小鼠的抑瘤率比較

注：與5.0 g/kg苦參組比較，△P<0.05；與10.0 g/kg苦參組比較，#P<0.05；與對照組比較，*P<0.05

2 不同苦參含量小鼠的瘤細胞生長抑制率比較 200 μg/ml苦參含量小鼠的瘤細胞生長抑制率顯著高于100 μg/ml苦參含量小鼠(P<0.05)，見表2。

表2 不同苦參含量小鼠的瘤細胞生長抑制率比較(%)

注：與100 μg/ml苦參含量小鼠比較，*P<0.05

討 論

苦參又名枯骨、草槐、地槐等，是常用臨床中藥之一，是豆科植物苦參Sophora Flavescens Ait的干燥根，具有清熱燥濕、殺蟲、止癢安神之功效，為歷代中醫(yī)治療多種皮膚病所推崇。現(xiàn)代臨床藥理研究表明苦參有抗病原體、抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫、抑制變態(tài)反應(yīng)、鎮(zhèn)靜、利尿等作用。中藥苦參在臨床各科治療中應(yīng)用廣泛,尤其是國醫(yī)大師李濟仁在中醫(yī)痹病和乳糜尿等疾病的治療中取得了顯著的療效[6-8]。近年來,中藥苦參提取物及其復(fù)方制劑在腫瘤治療上也有廣泛的應(yīng)用并取得了較好的效果。研究發(fā)現(xiàn)苦參及其復(fù)方注射液能有效地抑制腫瘤細胞的增殖與轉(zhuǎn)移,而且還能促進腫瘤細胞的凋亡并誘導(dǎo)細胞分化?，F(xiàn)階段，臨床還沒有完全明確苦參的抗腫瘤作用機理[9-11]。相關(guān)醫(yī)學學者HE染色苦參+瘤細胞體外培養(yǎng)的標本，鏡下觀察到瘤細胞死亡特征，即具有越來越大的體積，缺乏完整的細胞膜，胞核破碎等，發(fā)生這一現(xiàn)象的原因可能是苦參殺傷了瘤細胞[12-14]。同時，相關(guān)醫(yī)學學者用苦參對腫瘤細胞凋亡實驗進行誘導(dǎo)，結(jié)果表明，瘤細胞有凋亡征象，即具有越來越小的體積，缺乏規(guī)則的形態(tài)，有突起出現(xiàn)在膜表現(xiàn)，出芽、皺縮等[15-17]。此外，苦參及其生物堿一方面能夠?qū)⒖鼓[瘤作用發(fā)揮出來，另一方面還不會破壞正常細胞，甚至能夠促進白細胞數(shù)及機體免疫功能的提升[18-20]。本研究結(jié)果表明，2.5 g/kg苦參組、5.0 g/kg苦參組、10.0 g/kg苦參組小鼠的瘤重均顯著低于對照組(P<0.05)，而10.0 g/kg苦參組小鼠的瘤重顯著低于2.5 g/kg、5.0 g/kg苦參組小鼠(P<0.05)，抑瘤率顯著高于2.5 g/kg、5.0 g/kg苦參組小鼠，5.0 g/kg苦參組小鼠的瘤重顯著低于2.5 g/kg苦參組，抑瘤率顯著高于2.5 g/kg苦參組；200 μg/ml苦參含量小鼠的瘤細胞生長抑制率顯著高于100 μg/ml苦參含量小鼠，和相關(guān)醫(yī)學研究結(jié)果一致。

總之，中藥苦參在小鼠體內(nèi)的抗腫瘤作用顯著，值得臨床充分重視并進一步深入研究。

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