吳亞召 ，杜芳 ，2，張文雋 ，雷萍

（1.陜西省微生物研究所，陜西西安 710043；2.農(nóng)業(yè)生物技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)生物學(xué)院，北京 100193）

茶樹(shù)菇（Agrocybe aegerita）隸屬擔(dān)子菌亞門(mén)（Basidiomycotina）、層菌綱 （Hymenomycetes）、傘菌目（Agaricales）、 糞 銹 傘 科 （Bolbitiaceae）、 田 頭 菇 屬（Agrocybe），又名茶薪菇、油茶菇[1]。春秋季野生于楊樹(shù)、油茶等闊葉樹(shù)的枯死或枯干部分。其肉質(zhì)脆嫩，味道鮮美香濃，口感佳，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值極高[2,3]。干菇的蛋白質(zhì)含量為27.5%，總糖為54.4%，含人體所需的18種氨基酸，尤其是人體不能合成的8種氨基酸，還含有豐富的B族維生素和多種礦物質(zhì)元素與抗癌多糖。長(zhǎng)期食用具有補(bǔ)腎、潤(rùn)肺、醒腦、抗衰老和降低膽固醇等功能，是一種營(yíng)養(yǎng)價(jià)值、藥用價(jià)值較高的珍稀食用菌[4,5]。本文對(duì)陜西省微生物研究所采集分離的茶樹(shù)菇ASW05菌種的生物學(xué)特性進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，為該菌種的人工栽培與加工提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

茶樹(shù)菇ASW05菌種來(lái)自于陜西省微生物研究所微生物資源中心第三研究室。

1.2 培養(yǎng)基

1.2.1 母種培養(yǎng)基

采用綜合PDA培養(yǎng)基。

1.2.2 碳源測(cè)定基礎(chǔ)培養(yǎng)基

蛋白胨0.5%、KH2PO40.1%、MgSO40.05%、維生素B110mg/L、瓊脂2%，pH自然。用蒸餾水配制。

1.2.3 氮源測(cè)定基礎(chǔ)培養(yǎng)基

葡萄糖2%、KH2PO40.1%、MgSO40.05%、維生素B110mg/L、瓊脂2%，pH自然。用蒸餾水配制。

1.2.4 栽培料培養(yǎng)基

蘋(píng)果木屑30%、棉籽殼57%、麩皮12%、白砂糖1%、石灰1%。

1.3 方法

1.3.1 溫度對(duì)菌絲生長(zhǎng)的影響

以綜合PDA培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，在5～35℃范圍內(nèi)設(shè)7個(gè)處理，接入茶樹(shù)菇ASW05菌種后，培養(yǎng)7d，以平板培養(yǎng)基上菌落直徑為菌絲生長(zhǎng)量的指標(biāo)。試驗(yàn)重復(fù)5次，取其菌落直徑的平均值，比較菌絲生長(zhǎng)情況，選擇出菌絲最適生長(zhǎng)溫度。

1.3.2 pH值對(duì)菌絲生長(zhǎng)的影響

以綜合PDA培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，用0.1mol/LHCl或0.1mol/LNaOH將培養(yǎng)基分別調(diào)節(jié)到7個(gè)不同pH值，接入茶樹(shù)菇ASW05菌種后，于25℃下恒溫培養(yǎng)7d，以平板培養(yǎng)基上菌落直徑作為菌絲生長(zhǎng)量的指標(biāo)。試驗(yàn)重復(fù)5次，取其菌落直徑的平均值，比較菌絲生長(zhǎng)情況，選擇菌絲最適pH值。

1.3.3 培養(yǎng)基含水量對(duì)菌絲生長(zhǎng)的影響

取烘干的栽培料（原料均在60℃下烘干至恒重），分別按培養(yǎng)基含水量 50%、55%、60%、65%、70%、75%配料，裝入12cm×22cm耐高溫聚乙烯塑料袋。每袋裝入培養(yǎng)基干料150g，每組由10個(gè)菌袋組成，將茶樹(shù)菇ASW05菌種接入制備好的菌袋中，于25℃下恒溫培養(yǎng)，進(jìn)行菌絲生長(zhǎng)情況測(cè)定。試驗(yàn)重復(fù)5次，以菌絲在10個(gè)菌袋中平均生長(zhǎng)速度作為菌絲生長(zhǎng)量指標(biāo)，選擇菌絲最適培養(yǎng)基含水量。

1.3.4 碳源對(duì)菌絲生長(zhǎng)的影響

碳源測(cè)定基礎(chǔ)培養(yǎng)基7份，分別添加2%葡萄糖、2%玉米粉、2%淀粉、2%蔗糖、2%甘露糖、2%麥芽糖、2%乳糖。每個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)分別加入20mL培養(yǎng)基，每組由5個(gè)平板組成，將茶樹(shù)菇ASW05菌種接入制備好的平板中，于25℃下恒溫培養(yǎng)7d，以平板培養(yǎng)基上菌落直徑作為菌絲生長(zhǎng)量的指標(biāo)。試驗(yàn)重復(fù)5次，取其菌落直徑的平均值，比較菌絲生長(zhǎng)情況，選擇菌絲的最適碳源。

1.3.5 氮源對(duì)菌絲生長(zhǎng)的影響

碳源測(cè)定基礎(chǔ)培養(yǎng)基6份，分別添加0.5%蛋白胨、0.5%酵母粉、0.5%牛肉膏、0.5%麩皮、0.5%NH4NO3、0.5%(NH4)2SO4。每個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)分別加入20mL培養(yǎng)基，每組由5個(gè)平板組成，將茶樹(shù)菇ASW05菌種接入制備好的平板中，于25℃下恒溫培養(yǎng)7d，以平板培養(yǎng)基上菌落直徑作為菌絲生長(zhǎng)量的指標(biāo)。試驗(yàn)重復(fù)5次，取其菌落直徑的平均值，比較菌絲生長(zhǎng)情況，選擇菌絲的最適氮源。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同溫度對(duì)茶樹(shù)菇ASW05菌絲生長(zhǎng)的影響

表1顯示了不同溫度對(duì)茶樹(shù)菇ASW05菌絲生長(zhǎng)的影響。從表1中的數(shù)據(jù)可以看出，茶樹(shù)菇ASW05菌絲體的生長(zhǎng)速度對(duì)溫度變化比較敏感，菌絲生長(zhǎng)速度隨著溫度的升高而加快，在25℃時(shí)達(dá)到最大，然后又逐漸降低；溫度為25℃時(shí)，菌落直徑最大，為6.26cm；30℃時(shí)，菌落直徑次之，為6.24cm，兩者之間差異不顯著，但與其他試驗(yàn)組數(shù)據(jù)成極顯著差異。溫度為5℃時(shí)，菌落直徑最小，為0cm。因此，茶樹(shù)菇ASW05菌絲在10～35℃下均能生長(zhǎng)，適宜生長(zhǎng)溫度為25～30℃，在5℃下基本不生長(zhǎng)，在25℃生長(zhǎng)速度最快。

表1 不同溫度對(duì)茶樹(shù)菇ASW05菌絲生長(zhǎng)的影響Table 1 Effects of different temperature on the growth of mycelia of Agrocybe aegiritASW05

2.2 不同pH值對(duì)茶樹(shù)菇ASW05菌絲生長(zhǎng)的影響

表2 不同pH值對(duì)茶樹(shù)菇ASW05菌絲生長(zhǎng)的影響Table 2 Effect of pH value on the growth of mycelia of Agrocybe aegiritASW05

茶樹(shù)菇ASW05菌絲體在不同的pH值下生長(zhǎng)情況試驗(yàn)結(jié)果如表2所示。從表2中的數(shù)據(jù)可以看出，隨著pH值的升高，茶樹(shù)菇ASW05菌落直徑先增大后減少，當(dāng)pH值為6.5時(shí)，達(dá)到最大，為6.40cm，與其他試驗(yàn)組呈現(xiàn)極顯著差異；當(dāng)pH值為6.0時(shí)，菌落直徑次之，為6.28cm，與其他試驗(yàn)組也呈現(xiàn)極顯著差異；當(dāng)pH為4.0時(shí)，菌落直徑最小，為0cm。菌絲體在pH值5.0～7.0內(nèi)均能生長(zhǎng)，適宜生長(zhǎng)的pH值范圍為6.0～6.5，在pH為4時(shí)基本不生長(zhǎng)。

2.3 培養(yǎng)基不同含水量對(duì)茶樹(shù)菇ASW05菌絲生長(zhǎng)的影響

茶樹(shù)菇ASW05菌絲體在不同含水量條件下生長(zhǎng)情況試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3，以菌絲滿袋時(shí)間作為測(cè)定指標(biāo)。

表3 不同含水量對(duì)茶樹(shù)菇ASW05菌絲生長(zhǎng)的影響Table 3 Effect of different water content on the growth of mycelia of Agrocybe aegirit ASW05

從表3中的數(shù)據(jù)可以看出，茶樹(shù)菇ASW05菌絲體生長(zhǎng)的含水量范圍為55%～75%，含水量為50%時(shí)幾乎不生長(zhǎng)。適宜的含水量為60%～65%，在含水量65%時(shí)菌絲的生長(zhǎng)速度最快，為25d，與其他試驗(yàn)組呈現(xiàn)極顯著差異。

2.4 不同碳源對(duì)茶樹(shù)菇ASW05菌絲生長(zhǎng)的影響

表4 不同碳源對(duì)茶樹(shù)菇ASW05菌絲生長(zhǎng)的影響Table 4 Effect of different carbon sources on the growth of mycelia of Agrocybe aegirit ASW05

在不同的碳源培養(yǎng)基條件下茶樹(shù)菇ASW05菌絲體生長(zhǎng)情況試驗(yàn)結(jié)果如表4所示。從表4中的數(shù)據(jù)可以看出，茶樹(shù)菇ASW05菌絲體在供試的6種碳源上均能生長(zhǎng)，生長(zhǎng)最慢的是乳糖，為1.20cm；而生長(zhǎng)最快的是葡萄糖和玉米粉，分別為6.36cm、6.34cm，兩組菌落直徑與其他試驗(yàn)組的呈現(xiàn)極顯著差異；且菌絲濃密健壯，生長(zhǎng)勢(shì)旺盛。其次是白砂糖，為5.62cm，與其他試驗(yàn)組的呈現(xiàn)極顯著差異。因此，茶樹(shù)菇ASW05菌絲體生長(zhǎng)的最適碳源是葡萄糖和玉米粉。

2.5 不同氮源對(duì)茶樹(shù)菇ASW05菌絲生長(zhǎng)的影響

表5 不同氮源對(duì)茶樹(shù)菇ASW05菌絲生長(zhǎng)的影響Table 5 Effect of different nitrogen sources on the growth of mycelia of Agrocybe aegirit ASW05

茶樹(shù)菇ASW05菌絲體在不同氮源培養(yǎng)基生長(zhǎng)情況試驗(yàn)結(jié)果如表5所示。從表5中的數(shù)據(jù)可以看出，茶樹(shù)菇ASW05菌絲體在以蛋白胨為氮源的培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)最快，菌落直徑為6.21cm，與其他試驗(yàn)組的呈現(xiàn)極顯著差異；其次是酵母粉和牛肉膏，且菌絲濃密，生長(zhǎng)勢(shì)旺盛。因此，茶樹(shù)菇ASW05菌絲體生長(zhǎng)的最適氮源是蛋白胨。

3 小結(jié)

本研究結(jié)果表明，茶樹(shù)菇ASW05菌絲生長(zhǎng)的溫度范圍為10～35℃，以25℃最適；在pH4.5～7.0范圍內(nèi)均能生長(zhǎng)，以6.5最適；培養(yǎng)基含水量55%～75%時(shí)菌絲均能生長(zhǎng)，最適含水量為60%～65%；最適碳源是葡萄糖和玉米粉，最適氮源是蛋白胨。本項(xiàng)研究的數(shù)據(jù)為茶樹(shù)菇ASW05菌種生產(chǎn)和栽培工藝的確定提供了科學(xué)的依據(jù)。在對(duì)茶樹(shù)菇ASW05的營(yíng)養(yǎng)條件進(jìn)行探索時(shí)發(fā)現(xiàn)，在缺少碳、氮源時(shí)，菌絲的生長(zhǎng)情況較差，尤其是缺少氮源時(shí)菌絲不萌發(fā)，碳源乳糖對(duì)茶樹(shù)菇ASW05菌絲有抑制作用。

參考文獻(xiàn)：

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