張宏嬌　廉瑩

【摘要】目的：建立高效液相色譜法（HPLC）用于保健食品添加西地那非的測(cè)定方法。方法：采用枸櫞酸西地那非作為外標(biāo)物質(zhì)，通過HPLC法進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果：檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，當(dāng)枸櫞酸西地那非含量限定在0.1～0.6mg*mL^-1之間，具有良好的線性，線性相關(guān)系數(shù)大于0.998。此外，所選取的保健食品的精密度良好，RSD、回收率依次為1.1%、99.6%，所得測(cè)定結(jié)果較滿意。結(jié)論：通過HPLC法檢測(cè)保健食品中西地那非含量，具有測(cè)定速度快、線性范圍寬等優(yōu)點(diǎn)，且各項(xiàng)指標(biāo)均可達(dá)到規(guī)范要求。

【關(guān)鍵詞】保健食品；西地那非；高效液相色譜儀；回收率；精密度

枸櫞酸西地那非是美國(guó)輝瑞公司生產(chǎn)的產(chǎn)品，主要作用是治療勃起功能障礙，但與降壓類藥物合用，會(huì)引起一系列的禁忌反應(yīng)。而具有心血管疾病的患者必須在醫(yī)生指導(dǎo)下用藥，否則會(huì)存在較大的危險(xiǎn)。此外，枸櫞酸西地那非是國(guó)家嚴(yán)禁在食品中添加的產(chǎn)品。目前，我國(guó)保健食品市場(chǎng)前景廣闊，品種繁多。然而保健品的檢驗(yàn)手段及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)還不完善，許多檢驗(yàn)指標(biāo)無(wú)法控制。HPLC檢驗(yàn)方法的確立，能有效解決保健食品非法添加化學(xué)成份檢測(cè)方法的空白，不僅為從事食品藥品、檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)開展正常檢驗(yàn)工作提供科學(xué)技術(shù)手段，也對(duì)打擊制、售假劣保健食品，凈化醫(yī)藥、保健食品市場(chǎng)產(chǎn)生重要的影響。本文作者旨在探究運(yùn)用HPLC方法檢測(cè)西地那非的含量，現(xiàn)總結(jié)報(bào)道如下。

1材料與方法

1.1儀器與試劑

所用儀器為高效液相色譜儀，UV2000檢測(cè)器。本研究所用的枸櫞酸西地那非對(duì)照品均由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供，使用的甲醇、水分別為色譜純、超純水，其它則是分析純。所有樣品來源市場(chǎng)售賣的各種有補(bǔ)腎、壯陽(yáng)功能保健食品，包含美國(guó)偉哥王、根黃金、一炮到天亮、壯根精華素等，共有16份樣品接受檢測(cè)。

1.2樣品及對(duì)照品制備方法

選取適量藥品，即：10粒膠囊混勻，精密稱取約1粒的量；片劑則挑選10片，通過研磨處理后，混勻，精密稱取約1片的量，放入10mL量瓶?jī)?nèi)，加適量的混合溶劑（比例為：甲醇-水-氨水：），混勻，膠囊、片劑超聲處理5min。用混合溶劑定容到相應(yīng)的刻度并濾過，稀釋5倍作為供試品溶液。

精密稱取適量的枸櫞酸西地那非對(duì)照品，加混合溶劑制出每1mL含2mL的枸櫞酸西地那非溶液，經(jīng)過稀釋（5倍）作為對(duì)照品溶液。

2結(jié)果

2.1分析線性關(guān)系

通過測(cè)定發(fā)現(xiàn)，所選定的保健食品中枸櫞酸西地那非處在0.1～0.6范圍之內(nèi)，展現(xiàn)出較好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為γ=0.9998。

2.2回收率及精密度調(diào)查結(jié)果

依照樣品出發(fā)精密添加50mg對(duì)照品及相應(yīng)的輔料，遵循上文的指標(biāo)方式完成制備并開展檢測(cè)，通過連續(xù)8次的分析，獲取精密度及回收率，RSD為，回收率達(dá)到，表明試驗(yàn)精度較高，所得結(jié)果令人滿意。

2.3所檢樣品分析

運(yùn)用高效液相色譜法對(duì)入選的16分樣品進(jìn)行檢測(cè)，測(cè)得某一片劑高效液相色譜圖（如圖1所示）。依據(jù)所選樣品的色譜圖與對(duì)照品峰面積進(jìn)行比較，進(jìn)而求出樣品枸櫞酸西地那非的含量。深入分析16份樣品測(cè)得結(jié)果可知，受檢樣品含有一定程度的枸櫞酸西地那非。

3討論

近些年，對(duì)于中成藥及保健食品打擊造假的難點(diǎn)問題，主要表現(xiàn)在對(duì)這些藥物或食品中加入禁止添加的藥物枸櫞酸西地那非。眾所周知，枸櫞酸西地那非作為西藥處方藥，國(guó)家命令禁止將該藥物加入中成藥中，而某些中成藥或者保健品內(nèi)擅自加入枸櫞酸西地那非是違法的合成原料，其毒副作用難以估計(jì)。針對(duì)這種情況，如何有效節(jié)省檢測(cè)費(fèi)用、提出高效率的檢測(cè)方法，嚴(yán)厲打擊假劣藥品和保健食品，控制其質(zhì)量是做好藥物及食品安全監(jiān)管的重要保障。對(duì)于西地那非檢測(cè)，常使用的方法包括：紫外光譜法、薄層色譜法、高效液相色譜法等，其中，前兩種檢測(cè)方法由于干擾無(wú)法有效排除，在實(shí)際運(yùn)用中受到一定的限制。

高效液相色譜法常選擇乙腈作為流動(dòng)相，其具有成本高、毒性大的特征，加之，中藥成份比較復(fù)雜，產(chǎn)生的干擾也會(huì)由于不同的品種存在一定的差異，很難找出適合加入西地那非的各類中藥或保健食品的普遍方法。而根據(jù)我國(guó)法定檢測(cè)方法對(duì)其開展檢測(cè)，對(duì)檢測(cè)技術(shù)水平有較高的要求，而基層單位難以全面掌握并隨時(shí)運(yùn)用。本次研究中，通過對(duì)16個(gè)市場(chǎng)銷售的保健食品西地那非的檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果表明，高效液相色譜法用于保健食品西地那非含量檢測(cè)中可行，能夠在同一時(shí)間完成大批量樣品檢測(cè)，大大節(jié)省檢測(cè)所用的時(shí)問，且檢測(cè)結(jié)果真實(shí)可靠。此外，高效液相色譜法能夠發(fā)揮篩選定性的功效，運(yùn)用這種方法對(duì)保健食品內(nèi)的枸櫞酸西地那非含量進(jìn)行檢測(cè)，所需耗樣量較少，線性范圍更寬，能提升檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性及靈敏度。必須注意，部分補(bǔ)腎壯陽(yáng)類保健食品生產(chǎn)商家會(huì)在制劑內(nèi)加入枸櫞酸西地那非，這種行為是違法的。為有效打擊這種保健食品制假摻偽的行為，本文作者所用的檢測(cè)方法用于測(cè)定保健品中加入枸櫞酸西地那非含量是可行的，能夠?yàn)槭称繁O(jiān)督部門開展相關(guān)檢查工作提供一定參考。