喉癌組織Survivin、Aurora-b表達(dá)及其臨床意義

劉春玲，張少燕，梁久平，李三立，曲亞明，利顯民

(深圳市寶安區(qū)人民醫(yī)院，廣東深圳518100)

喉鱗狀細(xì)胞癌是最常見(jiàn)的喉癌病理類型，病死率高、患者預(yù)后差[1，2]。研究表明，喉癌的發(fā)生、發(fā)展是多種內(nèi)源性因素(如促癌基因激活、抑癌基因失活和凋亡相關(guān)基因異常表達(dá)等)和外源性因素(吸煙、飲酒、病毒感染和空氣污染等)共同作用的復(fù)雜過(guò)程[3]。生存素(Survivin)是迄今發(fā)現(xiàn)的作用最強(qiáng)的凋亡因子之一，通過(guò)Caspase路徑抑制細(xì)胞凋亡過(guò)程，調(diào)節(jié)染色體分離和胞質(zhì)分離，增強(qiáng)細(xì)胞的增殖潛能[4]。Aurora-b是一種絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，參與調(diào)節(jié)中心體和微管功能，促進(jìn)細(xì)胞分裂的順利進(jìn)行。Survivin和Aurora-b異常表達(dá)可促進(jìn)胃癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展[5，6]，但其在喉癌中的作用并不明確。本研究觀察了喉癌組織Survivin、Aurora-b mRNA表達(dá)，現(xiàn)分析結(jié)果并探討其在喉癌發(fā)生、發(fā)展中的作用。

1 臨床資料

1.2 喉組織Survivin和Aurora-b mRNA表達(dá) 取兩組手術(shù)標(biāo)本，采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)Survivin和Aurora-b mRNA表達(dá)，采用2-ΔΔCt法計(jì)算Survivin和Aurora-b mRNA相對(duì)表達(dá)量。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，結(jié)果取平均值。以Survivin和Aurora-b mRNA表達(dá)的平均值為界限，大于平均值為高表達(dá)，小于等于平均值為低表達(dá)。結(jié)果顯示，喉癌組、正常組Survivin mRNA相對(duì)表達(dá)量分別為3.80±1.27、1.32±0.63，Aurora-b mRNA相對(duì)表達(dá)量分別為4.88±1.60、1.13±0.61。喉癌組Survivin和Aurora-b mRNA相對(duì)表達(dá)量均高于正常組(P均<0.05)。喉癌組Survivin高表達(dá)者44例、低表達(dá)者45例，Aurora-b高表達(dá)者43例、低表達(dá)者46例。

1.3 喉癌組織Survivin和Aurora-b mRNA相對(duì)表達(dá)量與患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系 喉癌組織Survivin和Aurora-b mRNA相對(duì)表達(dá)量與患者年齡、性別、腫瘤部位和組織分化程度均無(wú)關(guān)(P均>0.05)，與淋巴轉(zhuǎn)移和臨床分期均有關(guān)(P均<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 喉癌組織Survivin和Aurora-b mRNA相對(duì)表達(dá)量與患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系

1.4 喉癌組織Survivin和Aurora-b表達(dá)與患者預(yù)后的關(guān)系 分別繪制喉癌患者術(shù)后1～60個(gè)月Survivin高、低表達(dá)者及Aurora-b高、低表達(dá)者的生存曲線(見(jiàn)圖1、2)。Survivin高表達(dá)者及低表達(dá)者術(shù)后5年總生存率為分別65.91%(29/44)、84.44%(38/45)，二者比較P<0.05；術(shù)后生存時(shí)間分別為(50.30±2.48)、(54.60±2.04)個(gè)月，二者比較P<0.05。Aurora-b高表達(dá)者及低表達(dá)者術(shù)后5年總生存率分別為65.11%(28/43)、84.78%(39/46)，二者比較P<0.05；術(shù)后生存時(shí)間分別為(50.70±2.53)、(56.13±3.04)個(gè)月，二者比較P<0.05。

2 討論

Survivin、Aurora-b、著絲粒內(nèi)蛋白(INCENP)和Borealin共同組成染色體乘客復(fù)合體(CPC)；CPC是調(diào)節(jié)細(xì)胞有絲分裂、細(xì)胞增殖的重要因子[7]。Aurora-b是CPC的蛋白核心激酶，Aurora-b可使組蛋白H3、Survivin和INCENP等蛋白發(fā)生磷酸化。在有絲分裂過(guò)程中，紡錘絲的定位、染色體的分離以及細(xì)胞質(zhì)的正確分離等均依賴于Survivin和Aurora-b的精確調(diào)節(jié)，若Survivin和Aurora-b定位錯(cuò)誤，可誘導(dǎo)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展[8]。Survivin屬于細(xì)胞凋亡抑制蛋白(IAP)家族成員，一般情況下只表達(dá)于胚胎、正常成人的生殖器和胸腺組織中，但在許多腫瘤組織細(xì)胞中Survivin呈過(guò)度表達(dá)狀態(tài)[7]。研究證實(shí)，Survivin具有促癌基因的功能，可抑制細(xì)胞凋亡、增強(qiáng)細(xì)胞增殖活性、降低細(xì)胞死亡率，且與腫瘤化療耐藥性和侵襲性相關(guān)[8]；喉癌組織Survivin高表達(dá)與患者不良預(yù)后相關(guān)[9]；Survivin可用于預(yù)測(cè)喉癌放化療敏感性[10]。本研究結(jié)果顯示，Survivin在喉癌組織中表達(dá)水平顯著高于正常喉黏膜組織，提示Survivin高表達(dá)與喉癌的發(fā)生相關(guān)；喉癌患者有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和Ⅲ～Ⅳ期患者癌組織Survivin表達(dá)水平高于未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和Ⅰ～Ⅱ期患者，表明Survivin表達(dá)與喉癌細(xì)胞的侵襲性和惡性程度呈正相關(guān)。由此推測(cè)，Survivin可能通過(guò)阻礙細(xì)胞凋亡，進(jìn)而增強(qiáng)腫瘤的侵襲性和惡性程度。此外，喉癌患者Survivin高表達(dá)者術(shù)后5年總生存率低于低表達(dá)者、生存時(shí)間短于低表達(dá)者，提示喉癌組織Survivin高表達(dá)者預(yù)后不良。

圖1 Survivin高、低表達(dá)者的生存曲線

圖2 Aurora-b高、低表達(dá)者的生存曲線

Aurora 激酶共有Aurora-a、Aurora-b和Aurora-c三個(gè)類型，其中Aurora-b基因定位于染色體17q13.1，有絲分裂早期Aurora-b蛋白位于染色體著絲粒區(qū)，而在分裂后期Aurora-b蛋白則移動(dòng)至微管，校對(duì)動(dòng)粒與紡錘絲微管的錯(cuò)誤連接[11]。研究證實(shí)，Aurora-b在頭頸部鱗狀細(xì)胞癌、食道癌、卵巢癌等腫瘤組織中過(guò)量表達(dá)，且其過(guò)量表達(dá)與腫瘤惡性程度有關(guān)[12～14]。本研究結(jié)果顯示，喉癌組織Aurora-b mRNA表達(dá)顯著高于正常喉黏膜組織，說(shuō)明Aurora-b可能參與并促進(jìn)了喉癌的發(fā)生；喉癌患者有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和臨床分期Ⅲ～Ⅳ期的患者癌組織Aurora-b表達(dá)明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和Ⅰ～Ⅱ期患者，Aurora-b高表達(dá)者術(shù)后5年總生存率低于低表達(dá)者、生存時(shí)間短于低表達(dá)者。提示Aurora-b可能參與并促進(jìn)了喉癌的發(fā)生、發(fā)展。

綜上所述，Survivin和Aurora-b可促進(jìn)喉癌的發(fā)生、發(fā)展；在此過(guò)程中二者有協(xié)同作用。Survivin和Aurora-b表達(dá)有助于喉癌的診斷及病情、預(yù)后的判斷。Survivin和Aurora-b有望作為喉癌治療的新靶點(diǎn)。

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