(鎮(zhèn)江市公安局,江蘇 鎮(zhèn)江 212000)
某年12月,本地發(fā)生一起故意傷害致一死一傷案件?,F(xiàn)場提取附著有明顯血跡的兇器1件(圖1)、死者薛某心血、傷者張某血樣以及50余份現(xiàn)場血跡。據(jù)現(xiàn)場法醫(yī)介紹,薛某被刺中心臟,導(dǎo)致心臟破裂引起大出血死亡,張某被刺中大腿等處。為明確薛某與張某是否為同一兇器所傷,委托本鑒定所對(duì)兇器與兩個(gè)被害人之間的關(guān)系進(jìn)行鑒定。
圖1 兇器背面取樣點(diǎn)分布圖
1.2.1 初檢
兇器正反兩面均有大量明顯血跡,采用濕棉簽分別在兇器兩面各提取血跡10處,經(jīng)抗人血紅蛋白金標(biāo)試劑條法檢驗(yàn),均呈陽性。再用聚苯乙烯二乙烯基苯樹脂法提取上述20份血樣DNA,使用AmpF?STR?Identifiler?Plus PCR擴(kuò)增試劑盒(美國Thermo Fisher Scientific公司),經(jīng)9700型PCR儀(美國AB公司)進(jìn)行PCR復(fù)合擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物應(yīng)用3130xl基因分析儀(美國AB公司)分析,結(jié)果20份血樣的基因分型均與張某血樣分型結(jié)果一致,未檢出薛某的基因分型。
薛某心血和張某血樣作為已知樣本獨(dú)立檢驗(yàn),檢驗(yàn)結(jié)果見表1。
表1 薛某和張某基因分型
1.2.2 復(fù)檢
將兇器正反兩面雕刻雄鷹圖案部分各劃出前、中、后三個(gè)區(qū)域,每個(gè)區(qū)域取5個(gè)采集點(diǎn),共取30個(gè)點(diǎn)(圖1)。采用毛坤云等[1]報(bào)道的載體法提取微量血跡,用細(xì)小的濕棉線擦取直徑1~2mm圓形區(qū)域的血樣,棉線微微發(fā)紅后放入96孔PCR板中。取樣完成后將PCR板于95℃下烘干3min,然后采用直接擴(kuò)增技術(shù),每孔加入10 μL Goldeneye?DNA身份鑒定系統(tǒng)20A[基點(diǎn)認(rèn)知技術(shù)(北京)有限公司]PCR反應(yīng)液(內(nèi)含PCR緩沖液4.0μL,引物混合物2.0μL,Taq聚合酶 0.16 μL,去離子水 3.84 μL),震蕩混勻,1 000×g離心1 min后進(jìn)行PCR擴(kuò)增。PCR反應(yīng)程序:95℃5min;94℃ 30s,60℃ 1min,70℃ 1min,循環(huán) 28 次;60℃ 60min。經(jīng)3130xl基因分析儀分析,共有28個(gè)樣本檢出STR分型,其中24個(gè)樣本為張某DNA分型,4個(gè)樣本為張某和薛某的混合分型(圖2)。4個(gè)混合分型的取樣位置均處在兇器背面的12~15號(hào)采集點(diǎn)(圖1)?;旌戏中蛨D譜中等位基因峰高、面積表現(xiàn)完全符合來自張某和薛某兩人混合基因型的特點(diǎn)。
圖2 混合分型圖譜
據(jù)現(xiàn)場勘驗(yàn)員介紹,案發(fā)時(shí),兇手將薛某刺倒后追刺張某。張某在逃跑過程中,多處被刺,現(xiàn)場地面殘留大量滴落狀血跡。
尸體檢驗(yàn)見薛某內(nèi)衣上血跡較多,外衣表面及其倒地處地面無明顯血跡。左胸部刺創(chuàng),心臟破裂。胸腔內(nèi)見2000mL積血。
結(jié)合案情分析兇器上薛某血跡極少的原因,案發(fā)時(shí)天氣寒冷,薛某衣著厚實(shí),血液流出時(shí)受到衣物阻擋未大量噴濺。兇器在被拔出薛某身體時(shí)受到多層衣物的擦拭,損失了部分血跡。兇手追砍張某時(shí)揮動(dòng)兇器,也會(huì)造成血跡損失。兇器在多次刺入和拔出張某身體時(shí),反復(fù)受到肌肉組織和衣物的擦拭,最終造成薛某血跡損失殆盡,或混在大量的張某血跡中。復(fù)檢結(jié)果印證了上述猜測,由于刺入深度和角度的客觀限制,處于兇器后部某一面的薛某血跡有機(jī)會(huì)殘留下來。為了避免優(yōu)勢擴(kuò)增現(xiàn)象[2],復(fù)檢時(shí)采用了單次取樣范圍最小、模板量最少的載體法。由于載體法省去了PCR模板的純化過程,血跡中的抑制劑必然存在于擴(kuò)增體系中,因此復(fù)檢擴(kuò)增時(shí)改用Goldeneye?DNA身份鑒定系統(tǒng)20A[3],該試劑盒具有較強(qiáng)的抗血紅素抑制能力和破碎細(xì)胞膜的功能,最終獲得了理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。本案例提示,在致傷多人兇器血跡的檢驗(yàn)鑒定中,應(yīng)充分了解案情,當(dāng)未能檢出第一受傷者的血跡時(shí),應(yīng)側(cè)重檢驗(yàn)兇器后部,分區(qū)域、多點(diǎn)、微量提取,可較常規(guī)方法獲得更好的檢驗(yàn)效果。本案選用的檢驗(yàn)方法靈敏度極高,操作時(shí)鑒定人應(yīng)戴口罩、手套,同時(shí)保證眼科剪、眼科鑷等器材的潔凈,嚴(yán)防污染。