何 偉，龔會(huì)琴，何 鈺，蒲忠祿，楊鴻波，段亞玲

（貴州省分析測(cè)試研究院，貴陽(yáng) 550000）

高效氯氰菊酯（beta-cypermethrin）是Chinoin Pharmaceutical＆Chemical Works公司開(kāi)發(fā)的擬除蟲(chóng)菊酯類殺蟲(chóng)劑。其殺蟲(chóng)譜廣，擊倒速度快，殺蟲(chóng)活性高，適用于棉花、蔬菜、果樹(shù)、茶樹(shù)等作物害蟲(chóng)及衛(wèi)生害蟲(chóng)的防治[1]389-394。虱螨脲（lufenuron）是由汽巴-嘉基（現(xiàn)屬先正達(dá)）公司開(kāi)發(fā)的苯甲酰脲類殺蟲(chóng)殺螨劑。其具有胃毒作用，通過(guò)阻礙幼蟲(chóng)蛻皮，而使其停止取食，致其死亡。其適于防治對(duì)擬除蟲(chóng)菊酯和有機(jī)磷類殺蟲(chóng)劑產(chǎn)生抗性的害蟲(chóng)。虱螨脲用于玉米、蔬菜、柑橘、棉花、馬鈴薯、葡萄、大豆等作物，防治刺吸式口器害蟲(chóng)，對(duì)益蟲(chóng)的成蟲(chóng)和捕食性蜘蛛作用溫和[1]175-178。

高效氯氰菊酯和虱螨脲的分析方法已有報(bào)道[2-10]，但兩者復(fù)配制劑的分析方法未見(jiàn)報(bào)道。本文建立液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法，同時(shí)分離測(cè)定乳油中高效氯氰菊酯和虱螨脲，以期為產(chǎn)品質(zhì)量控制及應(yīng)用研究中分析測(cè)試工作提供參考。該方法操作簡(jiǎn)便、快速，分離效果好，準(zhǔn)確度和精密度高。

1 試驗(yàn)部分

1.1 試劑和溶液

甲醇（色譜純）；甲酸（色譜純）；超純水（電阻率18.2 MΩ·cm）；乙酸銨（優(yōu)級(jí)純）；虱螨脲標(biāo)樣（質(zhì)量分?jǐn)?shù)99.45%）、高效氯氰菊酯標(biāo)樣（質(zhì)量分?jǐn)?shù)98.00%），德國(guó)Dr.Ehrenstorfer公司；8%高氯·虱螨脲乳油（5.5%高效氯氰菊酯＋2.5%虱螨脲），廣西匯豐生物科技有限公司。

1.2 儀器

液質(zhì)聯(lián)用儀：Agilent 1290-6470A LC-MS/MS，具有AJSESI離子源；Masshunter數(shù)據(jù)采集、定性分析、定量分析工作站；色譜柱：Agilent Eclipse Plus-C18柱［50 mm×2.1 mm，1.8 μm（USDAY34375）］。

1.3 儀器操作條件

1.3.1 液相色譜操作條件

進(jìn)樣體積：5 μL；流速：0.25 mL/min；柱溫：35 ℃；流動(dòng)相：10 mmol/L乙酸銨水溶液（含0.1%甲酸）＋甲醇，體積比17∶83。保留時(shí)間：虱螨脲約為1.6min，高效氯氰菊酯約為2.8 min。

1.3.2 MSD操作條件

離子源：AJS ESI源；離子源參數(shù)：干燥氣N2，干燥氣溫度300℃，干燥氣流速6 L/min；鞘氣N2，鞘氣溫度250℃，鞘氣流速11 L/min；霧化器壓力138 kPa；噴嘴電壓-500～0 V；毛細(xì)管電壓-3 500～4 000 V。監(jiān)測(cè)模式：MRM。MRM離子采集主要參數(shù)如表1所示。

表1 MRM離子采集參數(shù)

1.4 測(cè)定步驟

1.4.1 標(biāo)樣儲(chǔ)備液的配制

稱取虱螨脲標(biāo)樣（99.45%）0.001 55 g和高效氯氰菊酯標(biāo)樣（98.00%）0.002 43 g，分別置于100 mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，得虱螨脲、高效氯氰菊酯質(zhì)量濃度分別為15.41 mg/L和23.81 mg/L的標(biāo)樣儲(chǔ)備液。

1.4.2 混合標(biāo)樣溶液配制

吸取適量上述標(biāo)樣儲(chǔ)備液，以50%甲醇水溶液為溶劑配制虱螨脲質(zhì)量濃度為154.15 μg/L，高效氯氰菊酯質(zhì)量濃度為238.14 μg/L的混合標(biāo)樣母液，并稀釋配制成系列梯度混合標(biāo)樣工作溶液。

1.4.3 試樣溶液的配制

稱取8%高氯·虱螨脲乳油試樣0.012 5 g（精確至0.000 2 g），置于100 mL容量瓶中，用去離子水溶解并稀釋至刻度，搖勻，過(guò)0.45 μm濾膜。

1.4.4 測(cè)定

在1.3儀器操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，直至相鄰2針標(biāo)樣溶液中各有效成分的響應(yīng)值相對(duì)變化＜1.5%后，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測(cè)定。高效氯氰菊酯和虱螨脲混合標(biāo)樣及8%高氯·虱螨脲乳油樣品色譜圖見(jiàn)圖1和圖2。

圖1 高效氯氰菊酯和虱螨脲混合標(biāo)樣色譜圖

圖2 8%高氯·虱螨脲乳油試樣色譜圖

1.4.5 計(jì)算

將測(cè)得的2針試樣溶液以及試樣前后2針標(biāo)樣溶液中高效氯氰菊酯或虱螨脲峰面積分別進(jìn)行平均。試樣中高效氯氰菊酯（或虱螨脲）的質(zhì)量分?jǐn)?shù)w（%）按下式計(jì)算。

式中：A1為標(biāo)樣溶液中高效氯氰菊酯（或虱螨脲）峰面積的平均值；A2為試樣溶液中高效氯氰菊酯（或虱螨脲）峰面積的平均值；m1為高效氯氰菊酯（或虱螨脲）標(biāo)樣的質(zhì)量（g）；m2為高效氯氰菊酯（或虱螨脲）試樣的質(zhì)量（g）；P為標(biāo)樣中高效氯氰菊酯（或虱螨脲）的質(zhì)量分?jǐn)?shù)（%）。

2 結(jié)果與討論

2.1 分析方法的線性相關(guān)性試驗(yàn)

試驗(yàn)按1.3儀器操作條件進(jìn)行，分別以高效氯氰菊酯或虱螨脲質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，高效氯氰菊酯或虱螨脲相應(yīng)峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。高效氯氰菊酯線性方程為y＝857 x＋26，線性相關(guān)系數(shù)為0.993；虱螨脲線性方程為y＝591 x＋11，線性相關(guān)系數(shù)為0.999。試驗(yàn)結(jié)果表明，高效氯氰菊酯、虱螨脲在測(cè)試質(zhì)量濃度范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系。

2.2 分析方法的精密度試驗(yàn)

按1.3儀器操作條件對(duì)試樣溶液進(jìn)行分析，測(cè)得高效氯氰菊酯和虱螨脲的標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.06和0.04，變異系數(shù)分別為2.45%和3.22%，結(jié)果見(jiàn)表2。

2.3 分析方法的準(zhǔn)確度試驗(yàn)

在已知質(zhì)量濃度的8%高氯·虱螨脲乳油試樣溶液中，分別加入一定量的高效氯氰菊酯和虱螨脲標(biāo)樣，在1.3儀器操作條件下進(jìn)行分析。測(cè)得高效氯氰菊酯的平均回收率為110.28%，虱螨脲的平均回收率為93.98%，結(jié)果見(jiàn)表3。

2.4 檢測(cè)限和定量限

取虱螨脲質(zhì)量濃度為0.12 μg/L，高效氯氰菊酯質(zhì)量濃度為0.19 μg/L的標(biāo)樣工作液，重復(fù)測(cè)定6次，根據(jù)S/N值計(jì)算檢測(cè)限（LOD）和定量限（LOQ），結(jié)果見(jiàn)表4。試驗(yàn)結(jié)果表明，虱螨脲的LOD為0.005 7 μg/L，LOQ為0.019 μg/L，高效氯氰菊酯的LOD為0.054 μg/L，LOQ為0.18 μg/L。

表2 精密度試驗(yàn)結(jié)果

表3 準(zhǔn)確度試驗(yàn)結(jié)果

表4 分析方法的檢出限和定量限 μg/L

3 結(jié)論

試驗(yàn)建立了一種簡(jiǎn)便、快速測(cè)定8%高氯·虱螨脲乳油中有效成分的分析方法。試驗(yàn)結(jié)果表明：在測(cè)試濃度范圍內(nèi)，該方法對(duì)高效氯氰菊酯和虱螨脲具有良好的線性關(guān)系，分離效果好，準(zhǔn)確度和精密度較高。高效氯氰菊酯和虱螨脲出峰時(shí)間短，3 min內(nèi)可完全出峰，快速出峰縮短了檢測(cè)時(shí)間，減少了溶劑用量，大大提高了工作效率。方法對(duì)高效氯氰菊酯和虱螨脲具有較低的檢測(cè)限和定量限，且方法操作簡(jiǎn)便、快速，是產(chǎn)品質(zhì)量控制和應(yīng)用研究中較為理想的分析方法。