聶小偉,花象柏
(1.江西新希望農(nóng)牧科技有限公司,江西 九江 330300;2.江西農(nóng)業(yè)大學動物科技學院)
2018年3月,江西省南昌市進賢縣一個存欄430頭育肥豬的豬場,其所飼養(yǎng)的115 kg左右的育肥豬出現(xiàn)發(fā)燒、嘔吐、腹瀉和急性死亡為特征的傳染病,經(jīng)臨床初診和實驗室檢測,確定為豬腸炎型沙門氏菌病。通過采取針對性措施,病情得到有效控制。鑒于該種類型的豬沙門氏菌病所見報道不多,特總結報告如下,供同行參考。
2018年3月21日,畜主反映一欄(20頭左右)豬部分出現(xiàn)嘔吐、腹瀉,體溫40℃~41.5℃,精神沉郁,食欲明顯下降。3月22日擴散至3欄,有30頭左右的豬發(fā)病,死亡2頭。至3月25日共發(fā)病200多頭,死亡10頭,平均每頭采食量從每天3.2 kg下降至0.325 kg。
發(fā)病豬體溫升高至40℃~41.5℃;嘔吐;腹瀉,初期腹瀉物為灰黃色,后期腹瀉物中帶有脫落的消化道黏膜碎片和一些血液,糞便有惡臭;精神極度萎靡,食欲減退,甚至廢絕。死亡豬的病程為1~3 d。
圖1 灰黃色腹瀉物
圖2 帶有脫落的消化道黏膜碎片的腹瀉物
氣管中充滿白色泡沫;胃黏膜瘀血,尤以胃底明顯;小腸黏膜呈彌漫性瘀血,腸內(nèi)容物呈灰黃色水樣;腸系膜淋巴結腫大。
圖3 胃底黏膜瘀血
圖4 腸內(nèi)容物呈灰黃色水樣
根據(jù)臨床癥狀和病理變化,初診為腸道細菌性感染。無菌采集樣品進行細菌分離鑒定及藥敏實驗。
4.1細菌分離
無菌采取病死豬心臟、肝臟、肺臟、脾臟和小腸內(nèi)容物等病料,分別接種于普通瓊脂培養(yǎng)基和麥康凱瓊脂培養(yǎng)基,37℃培養(yǎng)24 h。 觀察到在普通瓊脂培養(yǎng)基上生長出邊緣整齊、濕潤、圓形、無色半透明的小菌落為主;在麥康凱瓊脂培養(yǎng)基上生長出無色半透明、圓形、邊緣整齊、濕潤隆起的菌落為主。兩種培養(yǎng)基上生長的菌落均符合沙門氏菌菌落特點[1]。
圖5 普通培養(yǎng)基生長的菌落
圖6 麥康凱培養(yǎng)基生長的菌落
4.2染色鏡檢
挑取單菌落,進行革蘭氏染色鏡檢。鏡下可見兩端鈍圓或卵圓形,不運動,不形成芽孢和莢膜的革蘭氏陰性小桿菌,符合沙門氏菌的形態(tài)和染色特征[1]。
4.3PCR擴增
挑取單菌落,LB液體培養(yǎng)基37℃震蕩培養(yǎng)12~16 h,以通用引物 P1∶AGAGTTTGATCCT GGCTCAG,P2∶GGTTACCTTGTTACGACTT為引物,以菌液為PCR模板,進行PCR擴增。PCR擴增產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳,可見一條大小在1500 bp左右的條帶。
圖7 菌液PCR產(chǎn)物電泳圖
Lane M∶DNA Marker/DL2000,Lane1-3∶菌 液PCR產(chǎn)物,Lane4:陰性對照
4.4測序鑒定
將分離株PCR擴增產(chǎn)物送上海生工測序,測序結果經(jīng)NCBI比對確定為豬沙門氏菌。
4.5藥敏實驗
采用瓊脂紙片擴增法,用滅菌棉拭子將培養(yǎng)的分離株菌液均勻涂布于瓊脂平板上,將藥敏紙片貼到培養(yǎng)基表面,37℃培養(yǎng)16~18 h,藥敏結果見下表。可見分離的豬沙門氏菌對鏈霉素、新霉素、多西環(huán)素、頭孢噻呋、氧氟沙星、頭孢曲松和丁胺卡那等敏感,對林可霉素、氟苯尼考、阿莫西林和土霉素等耐藥。
表1 分離菌藥敏實驗結果 mm
5.1搞好欄舍衛(wèi)生,盡量保持干燥;每日上、下午對欄舍及豬用聚維酮碘、來蘇兒各消毒一次。
5.2前期全場豬只普遍用生理鹽水稀釋硫酸鏈霉素肌注,連用3 d;第4天起,只對不吃料的豬肌注,劑量按說明書使用,每日上、下午各1次。
5.3飼料中按規(guī)定用量拌硫酸新霉素和強力霉素,連用7~10d;飲水中按劑量投硫酸新霉素和強力霉素,1次/d,飲完藥水換清水給豬飲用;由于病豬精神和食欲極度萎靡,為提高豬群采食欲望,改自由采食為分餐飼喂,1餐/d;自第4天后改為每日2餐飼喂。
通過以上綜合防控措施,死淘逐日減少,豬群精神和食欲逐漸恢復正常,用藥7天后豬群完全恢復正常。治療前共死亡10頭,治療后共死亡2頭,豬群轉歸良好。
6.1本次發(fā)病依據(jù)臨床癥狀、剖檢變化、實驗室檢測和防控效果,可以確定為育肥豬沙門氏菌病。豬沙門氏菌病的主要病原為豬霍亂和鼠傷寒等兩種沙門氏菌。前者主要引起敗血癥等全身性疾病,即豬副傷寒[2]。這種病在20世紀50~60年代是危害養(yǎng)豬業(yè)的一個重要疫??;由于豬副傷寒疫苗的廣泛使用,使該病在20世紀70年代以后的流行大為減少。后者主要引起急性胃腸炎,表現(xiàn)發(fā)熱,黃色水樣腹瀉,胃腸道有散在出血,但無大量出血,脫水和急性死亡[3]。根據(jù)這一參考文獻,本次發(fā)病可進一步認定為由鼠傷寒沙門氏菌引起的腸炎型沙門氏菌病。
6.2豬沙門氏菌病主要經(jīng)口攝入被沙門氏菌污染的飼料和飲水而引起。由于本次發(fā)病未對飼料和飲水進行細菌的檢測,故尚不清楚引起本次發(fā)病的病原來自何處。鄭龍龍等(2015)通過對30多個發(fā)生斷奶后仔豬腹瀉的豬場調(diào)研后發(fā)現(xiàn),飲水中污染大腸桿菌和沙門氏菌是斷奶后仔豬腹瀉的主因[4]。本次發(fā)病具有傳播迅速的特征,故認為飲水污染造成的傳播可能性最大,提示養(yǎng)豬場一定要關注飲水的衛(wèi)生標準。
6.3本次發(fā)病根據(jù)藥敏實驗結果用藥,療效很好。在開始用藥時,發(fā)病豬全群精神食欲欠佳,故決定全群肌注用藥3 d,第4天開始則只對部分病重仍不采食或采食較少的豬肌注用藥,直至它們完全恢復為止。飼料和飲水中則添加與注射藥不同的敏感藥物,通過多途徑給予治療藥物,才使病情迅速控制。通過加強欄舍清潔和帶豬消毒,以減少環(huán)境中的病原數(shù)量,在綜合防控的成效中,也起著重要的作用。