謝雯　陳敏　譚繼權

〔摘要〕 目的 了解長沙地區(qū)圍產期孕婦B族鏈球菌（GBS）帶菌狀況及對妊娠結局的影響。方法 對2016年10月至2017年3月在湖南省婦幼保健院產科就診的2 183例圍產期孕婦分別采集陰道分泌物及直腸拭子應用顯色培養(yǎng)法進行B族鏈球菌檢測，以培養(yǎng)結果為GBS陽性的161例孕婦為觀察組，隨機抽取180例培養(yǎng)結果為GBS陰性的孕婦為對照組，比較兩組的妊娠結局。結果 長沙地區(qū)圍產期孕婦B族鏈球菌帶菌率為7.4%。其中年齡<35歲孕婦GBS帶菌率為7.8%，高齡孕婦（≥35歲）帶菌率為5.6%，兩者比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。分離培養(yǎng)的161株 GBS中未檢出青霉素G、氨芐西林、利奈唑胺、美洛培南、頭孢曲松、頭孢吡肟、萬古霉素耐藥菌株，但GBS對紅霉素、克林霉素和四環(huán)素耐藥率較高，分別為62.73%、54.04%和65.84%。陽性觀察組孕婦發(fā)生胎膜早破者67例（41.6%），陰性對照組孕婦發(fā)生胎膜早破者50例（27.8%），兩組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。陽性觀察組孕婦胎兒窘迫、早產、急性絨毛膜羊膜炎的發(fā)生率均高于陰性對照組，但差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。結論 顯色培養(yǎng)法檢測B族鏈球菌可有效縮短細菌鑒定時間，適宜基層醫(yī)院推廣。圍產期孕婦攜帶GBS可增加胎膜早破、胎兒窘迫、早產及產褥感染的風險，導致不良妊娠結局。對于GBS陽性孕婦應及時進行抗菌藥物干預治療，保障母嬰安全。

〔關鍵詞〕 妊娠末期；鏈球菌感染；妊娠結局

〔中圖分類號〕R714.2 〔文獻標志碼〕B 〔文章編號〕doi：10.3969/j.issn.1674-070X.2018.05.026

Analysis of Group B Streptococcus in Perinatal Pregnant Women in Changsha and Its Effect on Pregnancy Outcome

XIE Wen*， CHEN Min， TAN Jiquan

（Hunan Provincial Maternal and Child Health Care Hospital， Changsha， Hunan 410008， China）

〔Abstract〕 Objective To investigate group B streptococcus （GBS） of perinatal pregnant women and its influence on pregnancy outcome. Methods The 2183 cases of perinatal women hospitalized in Hunan Provincial Maternal and Child Health Care Hospital from October 2016 to March 2017 were selected. The vaginal secretions and rectal swab of cases were gathered and detected by color culture method in testing GBS. The 161 cases of perinatal pregnant women with GBS positive results were assigned into the observation group. The randomly selected 180 cases of perinatal pregnant women with GBS negative results were divided into the control group. The pregnancy outcomes of the two groups were compared. Results The carrier rate of GBS status among perinatal women in Changsha regions was 7.4%. The carrier rate among pregnant women under age 35 was 7.8%， and the maternal women （≥35 years old） was 5.6%， the differences between the two groups have no statistically significance （P>0.05）. Drug resistant strains， penicillin G， ampicillin， linezolid， meropenem， ceftriaxone， cefepime and vancomycin were not detected in the 161 cases of isolation cultured GBS strains. However， GBS strains presented a high drug resistance rate on erythromycin， clindamycin and tetracycline， each with 62.73%， 54.04% and 65.84%. 67 cases （41.6%） in the positive observation group of pregnant women had premature rupture of membranes， while 50 cases （27.8%） in the negative control group occured premature rupture of membranes. The contrasting difference between two groups had statistical significance （P<0.05）. The incidence rate of fetal distress， premature delivery and acute chorionic amnionitis in observation group was higher than that in negative control group， but the difference had no statistical significance （P<0.05）. Conclusion The color culture method in detecting GBS is effective in shortening the examination period of bacterium， thus suitable to promote in basic level hospitals. The perinatal women carrying GBS increase the risk of premature rupture of membranes， fetal distress， premature delivery and puerperal infection， leading to harmful pregnancy outcome. In order to secure the safety of mother and child， pregnant women with positive GBS should be timely intervened with antibacterial drugs.

〔Keywords〕 third trimester of pregnancy； streptococcal infections； pregnancy outcome

B族鏈球菌（group B Streptococcus，GBS）又稱無乳鏈球菌，是寄居于人類泌尿生殖道及下消化道的一種β溶血革蘭氏陽性鏈球菌，健康人群帶菌率可達15%～35%[1]。目前普遍認為，GBS是圍產期嚴重感染性疾病的主要致病菌之一。2010年的美國疾病控制預防中心GBS防治指南建議對所有妊娠35～37周的孕婦分別采集陰道下1/3和直腸（通過直腸括約?。┦米舆M行細菌培養(yǎng)，培養(yǎng)結果陽性的孕婦即存在GBS定值，應給予GBS預防性治療[2]。中華醫(yī)學會婦產科學分會頒布的孕前和孕期保健指南則將GBS列為妊娠33～36周產前檢查備查項目，妊娠35～37周篩查，具有高危因素的孕婦（如合并糖尿病、前次妊娠出生的新生兒有GBS感染等），取肛周與陰道下1/3的分泌物培養(yǎng)[3]。本院自2016年以來采用顯色培養(yǎng)法對圍產期孕婦進行GBS篩查，現(xiàn)將長沙地區(qū)圍產期孕婦GBS帶菌狀況及對妊娠結局的影響總結如下。

1 材料與方法

1.1 標本來源

選取2016年10月至2017年3月在本院產科進行產前檢查及住院分娩的2 183例圍產期孕婦為研究對象，年齡19～47歲，孕周33～37周，受檢者取樣前1周內未使用任何抗菌藥物，由產科醫(yī)師以無菌拭子分別采集陰道下1/3的分泌物和直腸拭子立即送檢。以培養(yǎng)結果為GBS陽性的161例孕婦為觀察組，隨機抽取180例培養(yǎng)結果為GBS陰性的孕婦為對照組，排除妊娠合并高血壓、心臟病、糖尿病等疾病及滴蟲、霉菌、支原體等其他生殖道感染，比較兩組的妊娠結局。

1.2 儀器和試劑

B族鏈球菌顯色平板、哥倫比亞血瓊脂平板均購自鄭州安圖生物工程股份有限公司，TDR—200B自動細菌鑒定/藥敏分析儀、鏈球菌卡購自湖南長沙天地人生物科技有限公司。紅霉素、克林霉素紙片購自杭州天和微生物試劑有限公司。質控菌株為肺炎鏈球菌（ATCC49619）。

1.3 細菌培養(yǎng)及鑒定

標本接種于GBS顯色平板，置35～37 ℃溫箱中培養(yǎng)18～24 h觀察結果，生長淡紅色到深紅色菌落即初篩為B族鏈球菌。陽性標本轉種至哥倫比亞血瓊脂平板，挑取β溶血、觸酶陰性的革蘭氏陽性球菌經(jīng)TDR—200B自動細菌鑒定/藥敏分析儀進行鑒定。常規(guī)藥敏試驗采用稀釋法，藥敏結果判斷標準依據(jù)CLSI M100-S23文件。D試驗（誘導性克林霉素耐藥試驗）采用紙片擴散法（K-B法）。D試驗陽性者修正克林霉素的藥敏結果。

1.4 統(tǒng)計分析

采用SPSS 19.0軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，計量資料以“x±s”表示，組間比較采用t檢驗，計數(shù)資料以頻數(shù)和率表示，組間比較采用？字2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 圍產期孕婦帶菌狀況

2 183例圍產期孕婦中共檢出GBS陽性孕婦161例，帶菌率為7.4%。其中年齡<35歲孕婦GBS帶菌率為7.8%（135/1720），高齡孕婦（≥35歲）帶菌率為5.6%（26/463），兩者比較差異無統(tǒng)計學意義（？字2=2.663，P>0.05）。GBS陽性孕婦平均年齡（30.3±3.8）歲，GBS陰性孕婦平均年齡（30.9±4.1）歲，兩者比較差異無統(tǒng)計學意義（t=1.357，P>0.05）。

2.2 B族鏈球菌藥敏試驗結果

藥敏結果顯示，分離培養(yǎng)的161株 GBS中未檢出青霉素G、氨芐西林、利奈唑胺、美洛培南、頭孢曲松、頭孢吡肟、萬古霉素耐藥菌株。紅霉素、克林霉素和四環(huán)素耐藥率較高，分別為62.73%、54.04%和65.84%。具體情況見表1。

2.3 圍產期孕婦感染B族鏈球菌對妊娠結局的影響

陽性觀察組孕婦發(fā)生胎膜早破者67例（41.6%），陰性對照組孕婦發(fā)生胎膜早破者50例（27.8%），兩組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。陽性觀察組孕婦胎兒窘迫、早產、急性絨毛膜羊膜炎的發(fā)生率均高于陰性對照組，但差異無統(tǒng)計學意義。見表2。

3 討論

B族鏈球菌正常寄居于婦女陰道和人體腸道，健康人群帶菌率可達30%左右，可引起新生兒早期爆發(fā)性敗血癥和晚期發(fā)病的化膿性腦膜炎，病死率約15%[4]。孕婦B族鏈球菌帶菌率隨人種、地域、年齡不同而不同。據(jù)文獻報道，國內孕婦的帶菌率約為5%～15%[5-7]。本研究結果顯示，長沙地區(qū)圍產期孕婦GBS帶菌率為7.4%，略低于張麗華等報道的廣東東莞地區(qū)，且年齡<35歲孕婦與高齡孕婦（≥35歲）帶菌率比較，差異無統(tǒng)計學意義，不排除檢測方法、社會經(jīng)濟狀況等因素的影響。目前，細菌培養(yǎng)仍然是明確GBS感染的金標準，但其分離培養(yǎng)耗時較長，且孕婦生殖道和直腸中存在多種細菌，鑒別診斷操作復雜。本院采用GBS顯色培養(yǎng)法進行圍產期孕婦GBS篩查，顯色平板在普通培養(yǎng)基的基礎上添加人工合成的特異性酶底物，經(jīng)目的菌酶系統(tǒng)的酶解作用釋放出顯色原而顯色。作為初篩試驗，該法有效縮短了對細菌的鑒定時間，適用于基層醫(yī)院推廣，但由于方法特異性的限制，陽性標本尚需進一步鑒定。

本研究藥敏試驗結果顯示，分離培養(yǎng)的161株 GBS中未檢出青霉素G、氨芐西林、利奈唑胺、美洛培南、頭孢曲松、頭孢吡肟、萬古霉素耐藥菌株，說明青霉素仍然可以作為預防和治療GBS感染的首選用藥。但近年國內亦有報道[8]顯示GBS對青霉素G、氨芐西林的中介率分別達到19.7%和19.2%，提示隨著產時抗生素預防策略（intrapartum antibiotic prophylaxis， IAP）的實施，國內逐漸出現(xiàn)了對青霉素敏感性下降的GBS菌株，值得我們密切關注。本研究結果顯示，GBS對紅霉素、克林霉素耐藥率分別高達62.73%和54.04%，與張麗華等[7]報道接近，且GBS菌株對紅霉素和克林霉素的耐藥性具有較高的一致性。雖然GBS對喹諾酮類藥物敏感性尚可，但其對嬰兒影響較大，故一般不推薦孕婦使用。因此從青霉素嚴重過敏的孕婦分離到B族鏈球菌時，一定要根據(jù)藥敏試驗結果合理選用抗生素，避免耐藥菌株的擴散。

感染是胎膜早破的主要發(fā)病因素。GBS可上行感染胎膜，通過炎癥細胞的吞噬作用及細菌產生的蛋白水解酶的直接侵襲，使胎膜局部張力減低，從而導致胎膜早破。筆者比較了161例GBS陽性與180例GBS陰性圍產期孕婦的妊娠結局，結果顯示，GBS陽性觀察組孕婦胎膜早破的發(fā)生率（41.6%）顯著高于陰性對照組（27.8%）。GBS陽性觀察組胎兒窘迫、早產、急性絨毛膜羊膜炎的發(fā)生率均高于陰性對照組，但差異無統(tǒng)計學意義，提示圍產期孕婦攜帶GBS可增加胎膜早破、胎兒窘迫、早產及產褥感染的風險，導致不良妊娠結局。

綜上所述，對圍產期孕婦進行GBS篩查，培養(yǎng)陽性者合理選擇抗生素，適時采取預防性干預治療，可減少妊娠不良結局的發(fā)生。

參考文獻：

[1] 朱 敏，范建霞，程利南.圍產期B族鏈球菌感染的研究進展[J]. 中華婦產科雜志，2005，40（2）：137—141.

[2] VERANI JR， MCGEE L， SCHRAG SJ. Prevention of perinatal group B streptococcal disease-revised guidelines from CDC， 2010[J]. MMWR Recomm Rep. 2010 Nov 19，59（RR-10）：1-36.

[3] 中華醫(yī)學會婦產科學會產科學組.孕前和孕期保健指南[J].中華婦產科雜志，2011，46（2）：150-153.

[4] 尚 紅，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].4版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2015：655-658.

[5] 尉建霞，范 玲，陳 雪.孕晚期B族鏈球菌帶菌者母兒結局及高危因素分析[J].中國婦幼健康研究，2016，27（1）：81-83.

[6] 馬延敏，吳連方，黃醒華，等.孕婦B族溶血性鏈球菌帶菌與母嬰預后的關系[J].中華婦產科雜志，2000，35（1）：32-35.

[7] 張麗華，楊維青，張 麗，等.廣東東莞地區(qū)2009—2014年圍產期孕婦B群鏈球菌的分離與耐藥性分析[J].中國感染與化療雜志，2015，15（6）：575-578.

[8] 陳惠玲，鄧家德，葉惠芬，等.圍產期生殖道感染B族溶血性鏈球菌的耐藥性及耐藥基因檢測[J].中華婦產科雜志，2010，45（9）：701-703.