馮巖　祝金

摘 要 糧食中的真菌毒素會(huì)對(duì)人類(lèi)和動(dòng)物的健康產(chǎn)生巨大的危害，真菌毒素的檢測(cè)技術(shù)正不斷進(jìn)步?；诖耍?jiǎn)要介紹了真菌毒素的種類(lèi)及危害，綜述了真菌毒素的主要分析檢測(cè)技術(shù)，以期為同類(lèi)研究提供參考。

關(guān)鍵詞 糧食；真菌毒素；檢測(cè)技術(shù)

中圖分類(lèi)號(hào)：TS210.7 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2018.15.080

1 真菌毒素的種類(lèi)及危害

真菌毒素是指真菌在糧食和飼料里生長(zhǎng)產(chǎn)生的有毒次級(jí)代謝產(chǎn)物，一種真菌可能會(huì)產(chǎn)生多種毒素，目前真菌毒素已知種類(lèi)有400余種[1]。真菌毒素極易污染農(nóng)作物，全球每年有大約25%的農(nóng)產(chǎn)品會(huì)被真菌毒素污染，特別是小麥、大麥、玉米、大豆和花生等，真菌毒素在糧食作物生產(chǎn)期間以及加工、生產(chǎn)、貯存和運(yùn)輸期間都可產(chǎn)生，人類(lèi)和動(dòng)物食用受污染的農(nóng)作物會(huì)對(duì)健康帶來(lái)巨大的威脅。

糧食中常見(jiàn)的真菌毒素主要有黃曲霉毒素（Aflatoxins）、赭曲霉毒素、單端孢霉烯族毒素（Trichothecenes），如脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、玉米赤霉烯酮、T2毒素等。目前，已有100多個(gè)國(guó)家和相關(guān)組織頒布了食品及飼料中常見(jiàn)真菌毒素的限量標(biāo)準(zhǔn)，我國(guó)也規(guī)定了其中幾種常見(jiàn)真菌毒素，如黃曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮、T2毒素等的限量值。對(duì)糧食產(chǎn)品中真菌毒素的分析技術(shù)進(jìn)行研究，會(huì)對(duì)國(guó)家糧食安全和人畜健康起著極其重要的作用。

2 真菌毒素的分析檢測(cè)技術(shù)

2.1 真菌毒素分析前處理技術(shù)

真菌毒素的前處理分為提取和凈化兩個(gè)步驟，所選取的提取溶劑及凈化方法需依據(jù)待測(cè)基質(zhì)和目標(biāo)真菌毒素的理化性質(zhì)來(lái)決定[2]。由于不同真菌毒素理化性質(zhì)差異大，需要選擇適合的提取溶劑，這是前處理過(guò)程最重要的環(huán)節(jié)，對(duì)回收率的高低影響很大；對(duì)提取液進(jìn)行凈化處理，可以降低基質(zhì)中色素、脂肪、蛋白等組分的干擾，降低基質(zhì)對(duì)真菌毒素離子化的影響，延長(zhǎng)色譜柱的壽命。

目前，常用的真菌毒素分析前處理技術(shù)有液液萃取法、固相萃取法、免疫親和柱凈化法及多功能凈化柱凈化法[3]。高蓓等采用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法分析測(cè)定糧食及其制品中5種真菌毒素的含量，該方法利用多功能凈化柱進(jìn)行糧食樣品前處理，操作簡(jiǎn)單高效，方便快捷，其結(jié)果可為檢測(cè)機(jī)構(gòu)和企業(yè)提供有效的技術(shù)支持。

由于有機(jī)溶劑對(duì)環(huán)境的污染程度嚴(yán)重，在實(shí)驗(yàn)效能不變的情況下，為保護(hù)環(huán)境和降低成本，減少有機(jī)溶劑提取劑的用量就成為了研究人員主要研究的課題，液液萃取和固相萃取雖然能對(duì)提取液進(jìn)行有效的凈化和富集，但實(shí)驗(yàn)步驟復(fù)雜，有機(jī)溶劑消耗量大，對(duì)毒素的專屬選擇性差，容易造成基質(zhì)對(duì)目標(biāo)毒素離子化效率的強(qiáng)烈干擾。相比而言，免疫親和柱凈化法和多功能凈化柱凈化法能更有針對(duì)性地對(duì)提取液進(jìn)行凈化和富集，方法簡(jiǎn)便，試劑用量小，特異性強(qiáng)，目前被廣泛用于糧食中真菌毒素的含量分析。雖然免疫親和柱凈化法能大大提高檢測(cè)效率，但由于免疫技術(shù)發(fā)展的限制，用免疫親和柱凈化法處理樣品可檢測(cè)的真菌毒素種類(lèi)仍然很有限，隨著檢測(cè)儀器的穩(wěn)定性、靈敏度和特異性的不斷提高，儀器方法抗干擾能力的不斷增強(qiáng)，有些不需要凈化的前處理方法也逐漸出現(xiàn)。真菌毒素檢測(cè)的前處理技術(shù)目前仍處于研究階段，其方法實(shí)用性和穩(wěn)定性需進(jìn)一步改進(jìn)。

2.2 真菌毒素分析檢測(cè)技術(shù)

目前，真菌毒素的分析檢測(cè)方法主要分為理化檢測(cè)法和快速檢測(cè)法兩大類(lèi)。理化檢測(cè)法主要包括薄層色譜法、氣相色譜法、液相色譜法及液質(zhì)聯(lián)用法等?？焖贆z測(cè)法主要包括生物傳感器法、免疫分析法、紅外光譜法等?？焖贆z測(cè)法具有簡(jiǎn)便、快捷的優(yōu)勢(shì)，適用于樣品的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)和快速篩查，該方法對(duì)實(shí)驗(yàn)條件和實(shí)驗(yàn)人員的要求不高，但其檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確度和重現(xiàn)性較差。氣相色譜和氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜具有靈敏度高和操作簡(jiǎn)便的特點(diǎn)，其適用于分析易揮發(fā)、熱穩(wěn)定的化合物，但是，大多數(shù)真菌毒素?zé)岱€(wěn)定性差，這對(duì)氣相色譜儀分析的毒素種類(lèi)存在很大限制。近年來(lái)，液相色譜及液質(zhì)聯(lián)用檢測(cè)技術(shù)飛速發(fā)展，其應(yīng)用于糧食產(chǎn)品中真菌毒素的檢測(cè)也日益成熟，該方法具有穩(wěn)定性好、靈敏度高的優(yōu)點(diǎn)，適用于大多數(shù)真菌毒素的分析研究，是目前通用的檢測(cè)方法。

鄭翠梅 等研究了液相色譜-飛行時(shí)間質(zhì)譜在真菌毒素檢測(cè)方面的應(yīng)用，樣品經(jīng)乙腈-水-乙酸混合溶劑提取，經(jīng)多功能凈化柱和強(qiáng)陰離子交換柱兩步凈化后，利用液相色譜-飛行質(zhì)譜進(jìn)行檢測(cè)，該方法的選擇性強(qiáng)、靈敏度高，能夠滿足歐盟和中國(guó)等地對(duì)真菌毒素污染檢測(cè)的要求[4]。

葉金 等采用乙腈：水：乙酸（70∶29∶1，體積比）為提取劑直接提取稀釋，并結(jié)合同位素稀釋技術(shù)，以超高效液相色譜-四級(jí)桿/靜電場(chǎng)軌道阱高分辨質(zhì)譜作為分析儀器，建立了常見(jiàn)糧食基質(zhì)（小麥、玉米等）中16種真菌毒素的快速分析方法，16種真菌毒素的線性關(guān)系、添加回收水平和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差都得到了令人滿意的結(jié)果，該方法適用于檢測(cè)糧食中多種真菌毒素[5]。

孟娟 等采用超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法對(duì)糧食及制品中6種玉米赤霉烯酮類(lèi)物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)，樣品用乙腈水提取，石墨化炭黑固相萃取柱凈化，采用超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜進(jìn)行測(cè)定。6種目標(biāo)物線性相關(guān)系數(shù)大于0.99，檢出限0.1～0.2 μg·kg-1，加標(biāo)回收79.9%～104.0%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于10%。檢測(cè)結(jié)果符合食品樣品中痕量污染物的檢測(cè)要求[6]。

3 結(jié)語(yǔ)

當(dāng)前，糧食中真菌毒素污染的現(xiàn)象頻繁發(fā)生，為保護(hù)人畜的身體健康，提高真菌毒素的檢測(cè)水平是保障糧食質(zhì)量安全的迫切要求。隨著當(dāng)今社會(huì)的發(fā)展和檢測(cè)技術(shù)的進(jìn)步，一些簡(jiǎn)便快捷、穩(wěn)定高效的檢測(cè)方法不斷涌現(xiàn)，液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)應(yīng)用于糧食中真菌毒素的分析領(lǐng)域，為真菌毒素的檢測(cè)提供了一個(gè)更加可靠的分析方法。只有對(duì)糧食中的真菌毒素進(jìn)行準(zhǔn)確的定性定量分析及有效追蹤，才能對(duì)真菌毒素污染進(jìn)行合理控制，才能為糧食食品安全提供技術(shù)支撐。

參考文獻(xiàn)：

[1] 李鳳琴.真菌毒素分析及質(zhì)量控制[J].國(guó)外醫(yī)學(xué)衛(wèi)生學(xué)分冊(cè)，2004，31（5）：265-272.

[2] 孫利，霍江蓮，崔維剛，等.糧食產(chǎn)品中真菌毒素的色譜及質(zhì)譜檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展[J].食品科學(xué)，2013，34（19）：367-375.

[3] 高蓓，姜德銘，楊永壇.同位素內(nèi)標(biāo)-液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定糧食及其制品中的5種真菌毒素[J].色譜，2017，35（6）：601-607.

[4] 鄭翠梅，張艷，王松雪，等.液相色譜-飛行時(shí)間質(zhì)譜同時(shí)測(cè)定糧食中13種真菌毒素[J].分析測(cè)試學(xué)報(bào)，2012，31（4）：383-389.

[5] 葉金，吳宇，辛媛媛，等.超高效液相色譜-四級(jí)桿/靜電場(chǎng)軌道阱高分辨質(zhì)譜快速精準(zhǔn)測(cè)定糧食中多種真菌毒素[J].分析測(cè)試學(xué)報(bào)，2017，36（4）：449-456.

[6] 孟娟，張晶，張楠，等.固相萃取-超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)糧食及其制品中的玉米赤霉烯酮類(lèi)真菌毒素[J].色譜，2010（6）：601-607.

（責(zé)任編輯：趙中正）