杜梅 楊蕾 劉丹

【摘 要】 目的：考察金復(fù)康優(yōu)化方（ALG-X-012）聯(lián)合吉非替尼對(duì)非小細(xì)胞肺癌H1975的增殖影響，探究其可能的作用機(jī)制。方法：通過(guò)MTT法、劃痕實(shí)驗(yàn)、流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn)考察ALG-X-012、吉非替尼單獨(dú)用藥以及兩者聯(lián)合用藥對(duì)H1975細(xì)胞的增殖抑制、細(xì)胞遷移與凋亡的影響；Western blot法檢測(cè)兩者單獨(dú)用藥及聯(lián)合用藥對(duì) p-EGFR、p-AKT、p-mTOR相關(guān)蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果：MTT結(jié)果顯示低于5μmol/L濃度吉非替尼對(duì)H1975細(xì)胞增殖無(wú)抑制作用，但與ALG-X-012聯(lián)用給藥后，對(duì)H1975細(xì)胞即表現(xiàn)出明顯抑制作用。劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明與1μmol/L吉非替尼單獨(dú)用藥相比，聯(lián)用ALG-X-012可明顯抑制H1975細(xì)胞遷移。流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，ALG-X-012、吉非替尼及兩者聯(lián)合用藥干預(yù)H1975細(xì)胞后凋亡率分別是（3.93±0.15）%、（4.47±0.28）%與（11.43±0.96）%，聯(lián)合用藥可顯著提高吉非替尼誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡率（P<0.01）。Western blot結(jié)果顯示，吉非替尼組和ALG-X-012組對(duì)各項(xiàng)蛋白指標(biāo)均無(wú)明顯影響，聯(lián)合用藥組卻能明顯下調(diào)H1975細(xì)胞p-EGFR、p-AKT、p-mTOR蛋白表達(dá)。結(jié)論：ALG-X-012聯(lián)合低濃度吉非替尼即可顯著抑制H1975細(xì)胞的增殖，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，抑制腫瘤細(xì)胞遷移，其抗腫瘤活性的機(jī)制可能與阻斷EGFR-PI3k-AKT信號(hào)通路有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】 ALG-X-012；吉非替尼；非小細(xì)胞肺癌；表皮生長(zhǎng)因子受體酪氨酸激酶抑制劑；EGFR-PI3K-AKT信號(hào)傳導(dǎo)通路

【中圖分類號(hào)】R-33 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A 【文章編號(hào)】1007-8517（2018）07-0021-06

Abstract：Objective To observe the effects of optimized ALG-X-012 combined gefitinib on non small cell lung cancer H1975 growth， to explore its possible mechanism. Methods The MTT assay， scratch assay， flow cytometry， ALG-X-012 experiment to observe the effects of gefitinib monotherapy and combination of both on H1975 cell proliferation inhibition， cell migration and apoptosis； The expression of p-mTOR，p-EGFR and p-AKT of monotherapy and combination treatment were detected by Western blot.Results The results of MTT showed that gefitinib did not inhibit the growth of H1975 cells when the concentration was less than 5μmol/L， but it was significantly inhibited by H1975 combined with ALG-X-012. The scratch test showed that compared with 1μmol/L gefitinib， the combination of ALG-X-012 with gefitinib could significantly inhibit the migration of H1975 cells. Flow cytometry results showed that ALG-X-012， gefitinib and combination intervention after H1975 cell apoptosis rate were （3.93+0.15）%， （4.47+0.28）% and （11.43+0.96）%， combination therapy can significantly improve gefitinib induced apoptosis rate （P<0.01）. Western blot results showed that the gefitinib group and ALG-X-012 group had no significant effect on the protein indexes， while the combination group could significantly reduce the expression of p-EGFR， p-AKT， p-mTOR and p-Met protein in H1975 cells. Conclusion ALG-X-012 combined with gefitinib can significantly inhibit the proliferation of H1975 cells， induce tumor cell apoptosis and inhibit tumor cell migration. The mechanism of its antitumor activity may be related to blocking EGFR-PI3k-AKT signaling pathway.

Keywords：ALG-X-012； Gefitinib； Non-small Cell Lung Cancer； Epidermal Growth Factor Receptor Tyrosine Kinase Inhibitors； EGFR-PI3K-AKT Signaling Pathway

肺癌是全球發(fā)病率最高的惡性腫瘤之一，在我國(guó)，其發(fā)病率與死亡率亦居各種惡性腫瘤的首位。其中非小細(xì)胞肺癌（Non-small Cell Lung Cancer，NSCLC）作為肺癌的主要類型之一，占肺癌患者的85%以上，并且多數(shù)患者確診時(shí)已處于晚期，喪失了手術(shù)治療的機(jī)會(huì)[1]，而引起非小細(xì)胞肺癌的主要原因是由于EGFR（Epidermal Growth Factor Receptor，表皮生長(zhǎng)因子受體）突變，尤其是二次突變T790M[2]和c-Met的擴(kuò)增[3]。非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞H1975含有T790M和L858R雙突變，作為由T790M突變導(dǎo)致的EGFR-TKI獲得性耐藥研究模型得到廣泛應(yīng)用[4]，H1975細(xì)胞對(duì)吉非替尼的耐藥性為PC9細(xì)胞的100倍以上，其機(jī)制可能與調(diào)控T790M突變亞群細(xì)胞中的基因參與EGFR-TKI耐藥機(jī)制有關(guān)[5]。

隨著表皮生長(zhǎng)因子受體酪氨酸激酶抑制劑（ EGFR Tyrosine Kinase Inhibitors，EGFR-TKIs）的出現(xiàn)，顯著延長(zhǎng)了患者的生存期，改善了患者的生活質(zhì)量，從而改變了肺癌的標(biāo)準(zhǔn)治療模式[4]。第一代可逆性表皮生長(zhǎng)因子受體酪氨酸激酶抑制劑吉非替尼的產(chǎn)生對(duì)于EGFR突變的肺癌患者有顯著的臨床療效，并得到了廣泛的使用，其主要作用機(jī)制是競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合EGFR胞內(nèi)域上的結(jié)合位點(diǎn)，阻止EGFR受體憐酸化，從而阻止EGFR產(chǎn)生的信號(hào)向下游傳遞，抑制其下游PI3K/AKT/mTOR通路激酶的活性，阻礙腫瘤生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移、血管生成且誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡[6]。但隨著患者用藥時(shí)間的延長(zhǎng)，產(chǎn)生了嚴(yán)重的耐藥反應(yīng)，抗腫瘤作用明顯下降，限制了吉非替尼在臨床上的應(yīng)用[7]。因此，研究如何防治吉非替尼耐藥成為治療非小細(xì)胞肺癌的關(guān)鍵。

近年來(lái)，中藥與吉非替尼聯(lián)用已經(jīng)成為治療肺癌的熱點(diǎn)。例如，大黃素聯(lián)合吉非替尼可明顯抑制HCC827·GR細(xì)胞株p-EGFR，p-ERK1·2，p-Met的表達(dá)[8]；姜黃素聯(lián)合吉非替尼用于PC-9·G2，其細(xì)胞存活率比單用吉非替尼組降低13%～22%[9]。金復(fù)康處方為全國(guó)中醫(yī)腫瘤治療中心的劉嘉湘教授經(jīng)30余年的臨床實(shí)踐歸納所得，金復(fù)康與化療藥并用，有助于提高化療效果，改善免疫功能，減輕化療引起的白細(xì)胞下降。金復(fù)康優(yōu)化方（ALG-X-012）是由江蘇省中醫(yī)藥研究院在對(duì)金復(fù)康二次開(kāi)發(fā)的基礎(chǔ)上，針對(duì)金復(fù)康處方中組分結(jié)構(gòu)進(jìn)行優(yōu)化研究而成，使其處方更加簡(jiǎn)單有效地發(fā)揮抗癌作用，本研究擬通過(guò)MTT比色法，細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)，流式細(xì)胞術(shù)，蛋白質(zhì)印跡法考察了優(yōu)化方ALG-X-012聯(lián)用吉非替尼對(duì)非小細(xì)胞H1975的增殖影響并初步探討了其作用機(jī)制與EGFR-PI3k-AKT信號(hào)通路可能的關(guān)系。

1 儀器與材料

1.1 材料 ALG-X-012（黃芪飲片：批號(hào)20160513；麥冬飲片：批號(hào)20160718；淫羊藿飲片：批號(hào)20160601；黃精飲片：批號(hào)20160625，安徽井泉中藥飲片有限公司）。四甲基偶氮藍(lán)（ MTT，美國(guó)Sigma公司），DMSO（Amresco，美國(guó)），吉非替尼 （ Gefitinib，CAS： 184475-35-2， 美國(guó) Selleck 公司）。吉非替尼用DMSO配成10mmol/L儲(chǔ)備液，-20℃保存。RPMI1640 培養(yǎng)液、0.25% Tripsin（南京凱基生物），細(xì)胞培養(yǎng)皿（Corning，美國(guó)），PBS（Hyclone，美國(guó)），DMEM（Corning，美國(guó)），F(xiàn)BS（ExCell，美國(guó)），6 well cell culture plate（Corning，美國(guó)），乙醇（國(guó)藥），Annexin V-APC·7-AAD細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（凱基生物），細(xì)胞周期檢測(cè)試劑盒、全蛋白抽提試劑盒、Braford蛋白含量檢測(cè)試劑盒、5×SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液、SDS-PAGE凝膠配制試劑盒、預(yù)染蛋白分子量、電轉(zhuǎn)移緩沖液、麗春紅染色液、ECL檢測(cè)試劑盒、顯影定影試劑等均購(gòu)自碧云天公司，p-EGFR（博士德，Bm4115，稀釋比：1∶200），p-mTOR（abcam，Ab137133，1∶1000），P-AKT（Cell signaling，#4060，1∶1000），β-actin（博士德，Bm0627，1∶500）。

1.2 儀器 CO2培養(yǎng)箱（Thermo，美國(guó)），生物安全柜（Thermo，美國(guó)），低速離心機(jī)（Thermo，美國(guó)），微量移液器（Thermo，美國(guó)），Milli-Q純水機(jī)（Millipore，美國(guó)），全自動(dòng)酶標(biāo)儀（Thermo Electrom，美國(guó)），倒置顯微鏡（Leica，德國(guó)），流式細(xì)胞儀（Merck，德國(guó)）。

2 方法

2.1 ALG-X-012的制備 黃芪、黃精、麥冬以及淫羊藿按照87∶12∶77∶24的比例首次煎煮用10倍量的水，煎煮2h后，再用8倍量的水煎煮，將兩次的煎煮液合并，旋蒸濃縮至50mL，過(guò)膜備用。

2.2 細(xì)胞培養(yǎng) 人肺腺癌細(xì)胞株H1975購(gòu)于復(fù)旦大學(xué)細(xì)胞庫(kù)，來(lái)源于美國(guó)物種保存中心（American Type Culture Collection，ATCC）。用含10%胎牛血清及100U·mL青霉素和鏈霉素的RPMI1640培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2飽和濕度的培養(yǎng)箱中常規(guī)培養(yǎng)，用0.25% 胰蛋白酶消化傳代。

2.3 MTT法測(cè)定 聯(lián)合用藥對(duì)細(xì)胞增殖的影響取指數(shù)生長(zhǎng)期的H1975細(xì)胞，2000r·min-1 離心2min，棄去上清液，用培養(yǎng)液打勻，制成細(xì)胞懸液。用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，稀釋成濃度為4×104個(gè)細(xì)胞/mL的細(xì)胞懸液，接種于96孔板，每孔100μL，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。24h后分別給予空白對(duì)照組（RPMI1640無(wú)血清培養(yǎng)），ALG-X-012（0.0625、0.125、0.25、0.5、1、2、4、8、16mg/mL） 、吉非替尼（ 0.1、1，2、3、5、10、20μmol/L） 及ALG-X-012（1mg/mL） 加吉非替尼（ 1μmol/L） 聯(lián)合干預(yù)，每個(gè)濃度設(shè)置6個(gè)復(fù)孔。72h后，每孔加入20μL MTT（ 5mg/mL） ，在細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。4h后棄去上清，每孔加入150μL DMSO，振蕩后置酶標(biāo)儀上于570nm處測(cè)定每孔的吸光度（ OD值）。

細(xì)胞存活率（ %） = （給藥組OD均值- 空白組OD值） /（對(duì)照組OD均值-OD空白組值） ×100%。

2.4 劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè) 聯(lián)合用藥對(duì)細(xì)胞遷移的影響收集處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，按每孔1×105個(gè)細(xì)胞接種6孔板，培養(yǎng)24h后棄上清液，實(shí)驗(yàn)設(shè)正常細(xì)胞對(duì)照組和不同藥物實(shí)驗(yàn)組，用10μl槍頭垂直劃出劃痕，實(shí)驗(yàn)孔分別加入無(wú)血清的RPMI1640培養(yǎng)對(duì)照組，ALG-X-012（1mg/mL）、吉非替尼（1μmol/L）以及兩藥聯(lián)合（1mg/mL ALG-X-012與1μmol/L吉非替尼）培養(yǎng)基4mL。于0h、12h、24h在顯微鏡下拍照，得出劃痕寬度與面積。

劃痕面積=劃痕長(zhǎng)度×劃痕寬度。

2.5 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè) 聯(lián)合用藥對(duì)細(xì)胞凋亡的影響取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，按照每孔1×105個(gè)接種于6孔板中，按照空白組、ALG-X-012（1mg/mL）、吉非替尼（1μmol/L）、聯(lián)合給藥組（1mg/mL ALG-X-012與1μmol/L吉非替尼），繼續(xù)培養(yǎng)24h，去除培養(yǎng)基，用PBS清洗3次，用胰酶消化細(xì)胞。用PBS清洗細(xì)胞兩次，離心收集細(xì)胞，不少于1×105個(gè)細(xì)胞。加入500μL的Binding Buffer懸浮細(xì)胞，加入5μL Annexin V-APC混勻后，加入 5μL 7-AAD染液混勻。室溫下避光保存5～15min，于流式細(xì)胞儀中檢測(cè)。

2.6 Western Bolt檢測(cè) 細(xì)胞相關(guān)蛋白細(xì)胞接種于6孔板中，常規(guī)培養(yǎng)24h后，按照空白對(duì)照組、ALG-X-012（1mg/mL）、吉非替尼（1μmol/L）、聯(lián)合給藥組（1mg/mL ALG-X-012與1μmol/L吉非替尼），將細(xì)胞用胰酶消化后，各加入200ul冰預(yù)冷裂解緩沖液，混勻后冰浴30min，充分裂解，于4℃，13000r·min[-1]離心10min。將上清分裝，存于-20℃?zhèn)溆?。?yīng)用BCA分析試劑盒測(cè)定蛋白濃度，將蛋白在SDS-PAGE電泳分離， 轉(zhuǎn)膜至PVDF膜并作好標(biāo)記，用TBST洗膜 10min 3次。加入含5%脫脂奶粉封閉2h，一抗4℃搖床振蕩孵育過(guò)夜，TBST洗10min 3次。加入二抗室溫反應(yīng)2h，用TBST洗膜5～10min。將ECL化學(xué)發(fā)光液暗盒中曝光。使用Gel-Pro32軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行灰度分析。

2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 17. 0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料以（x±s）表示，采用單因素方差分析，P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 MTT法檢測(cè) 聯(lián)合用藥對(duì)細(xì)胞增殖的影響ALG-X-012組、吉非替尼組以及兩者聯(lián)合用藥對(duì)H1975細(xì)胞增殖比較結(jié)果如圖1所示，低濃度（0.1～5μmol·L）吉非替尼對(duì)H1975細(xì)胞的增殖沒(méi)有顯著的抑制作用，當(dāng)吉非替尼濃度超過(guò)5μmol/L時(shí)，對(duì)H1975細(xì)胞增殖有抑制作用，IC50=9.542±1.20μmol/L。單獨(dú)使用濃度范圍在0.0625～16mg/mL的ALG-X-012作用于耐藥H1975細(xì)胞72h，其對(duì)H1975細(xì)胞增殖沒(méi)有明顯抑制作用。ALG-X-012（1mg/mL）與吉非替尼（1μmol/L）聯(lián)合后，H1975細(xì)胞增殖被明顯抑制（細(xì)胞存活率為52%），比吉非替尼相比，抑制細(xì)胞增殖率提高了37%，出現(xiàn)ALG-X-012逆轉(zhuǎn)吉非替尼耐藥的現(xiàn)象。

3.2 劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè) 聯(lián)合用藥對(duì)細(xì)胞遷移的影響各給藥組對(duì)H1975細(xì)胞遷移能力的影響結(jié)果如圖2所示，分別給藥0h，12h，24h之后，空白對(duì)照組，ALG-X-012組及吉非替尼組對(duì)于H1975細(xì)胞都有不同程度的遷移，劃痕寬度以及面積明顯減少。聯(lián)合用藥組在12h和24h，劃痕寬度及面積與空白組比較有顯著變化，其劃痕寬度比空白組多22%～30%，面積多15%～28%，說(shuō)明聯(lián)合用藥組能夠抑制細(xì)胞遷移。進(jìn)一步說(shuō)明ALG-X-012可以增強(qiáng)吉非替尼給藥對(duì)H1975細(xì)胞的抑制作用。

3.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè) 聯(lián)合用藥對(duì)細(xì)胞凋亡的影響藥物作用于H1975細(xì)胞24h后，應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)凋亡結(jié)果，如圖3所示。單用吉非替尼（1μmol/L）細(xì)胞凋亡率為（4.47±0.28）%，單用ALG-X-012（1mg/mL）細(xì)胞凋亡率為（3.93±0.15）%。兩藥合用后細(xì)胞凋亡率為（11.43±0.96）%，相比較于單獨(dú)用藥，其凋亡率增加了2.5～2.9倍，凋亡率顯著增（P<0.05）。

3.4 Western Bolt檢測(cè) 細(xì)胞相關(guān)蛋白各組給藥后H1975細(xì)胞EGFR-PI3k-AKT信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)比較結(jié)果，如圖4所示。ALG-X-012，吉非替尼以組對(duì)p-EGFR、p- AKT、p-mTOR無(wú)明顯下調(diào)，與單獨(dú)用藥組相比，聯(lián)合用藥顯著下調(diào)p-EGFR、p- AKT、p-mTOR，其可能機(jī)制與抑制p- AKT活性，EGFR活化，p-mTOR 活化從而阻斷EGFR/PI3k/AKT通路有關(guān)。

4 討論

吉非替尼（Gefitinib）是第一代可逆性治療NSCLC分子靶向的表皮生長(zhǎng)因子受體酪氨酸激酶抑制劑，其主要攻擊的靶點(diǎn)是EGFR，EGFR的突變與異常表達(dá)引起PI3K/AKT信號(hào)通路異常 [10]，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的快速增殖、侵襲及轉(zhuǎn)移[11]，是驅(qū)動(dòng)肺癌發(fā)生和發(fā)展的主要病因之一，因此PI3K/AKT信號(hào)通路表達(dá)與肺癌發(fā)展密切相關(guān)。研究表明金復(fù)康口服液不僅能夠抑制肺癌的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，改善肺癌患者生存質(zhì)量，延長(zhǎng)生存期，與吉非替尼聯(lián)用后，對(duì)PC-9R細(xì)胞的增殖抑制影響明顯增強(qiáng)，逆轉(zhuǎn)吉非替尼對(duì)PC-9R的耐藥，且對(duì)p-EGFR有一定的下調(diào)[12]。ALG-X-012是在金復(fù)康原方的基礎(chǔ)上進(jìn)行優(yōu)化而成，本研究探討ALG-X-012聯(lián)用吉非替尼對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞H1975的影響。

MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，低于5μmol/L吉非替尼對(duì)H1975細(xì)胞增殖無(wú)明顯抑制作用，濃度為0.0625～16mg/ml ALG-X-012對(duì)H1975細(xì)胞無(wú)明顯抑制作用。但吉非替尼（1μmol/L）與ALG-X-012（1mg/mL）聯(lián)合用藥后，顯著降低了H1975細(xì)胞的存活率，比單用1μmol/L吉非替尼組降低約37%，可以看出兩藥聯(lián)用后，增加了吉非替尼對(duì)細(xì)胞的抑制作用；而后進(jìn)一步采用劃痕實(shí)驗(yàn)考察聯(lián)合用藥對(duì)細(xì)胞遷移的影響，與空白組相比，吉非替尼組，ALG-X-012組在12h和24h，劃痕寬度與面積均無(wú)明顯變化，表明單獨(dú)用藥組對(duì)H1975細(xì)胞遷移無(wú)明顯抑制作用。聯(lián)合用藥組經(jīng)過(guò)12h和24h后，與空白對(duì)照組相比，劃痕的寬度與面積有顯著性差異，空白組劃痕寬度為（511.47±31）μm，聯(lián)合用藥組為（719.67±27）μm，可得看出聯(lián)合用藥組對(duì)于H1975細(xì)胞的遷移有明顯的抑制作用；細(xì)胞凋亡檢測(cè)結(jié)果顯示，吉非替尼組與ALG-X-012組在24h后對(duì)H1975細(xì)胞凋亡無(wú)明顯誘導(dǎo)作用，但當(dāng)吉非替尼聯(lián)合ALG-X-012用藥后，與單獨(dú)用藥組比，H1975細(xì)胞凋亡率顯著提高約2.5～2.9倍，表明聯(lián)合用藥組能增加吉非替尼對(duì)H1975細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)作用。提示AL9G-X-012與吉非替尼聯(lián)用后可增加H9175細(xì)胞對(duì)吉非替尼的敏感程度，增強(qiáng)其抗腫瘤藥效。

為了探討兩者聯(lián)用可能作用的機(jī)制，實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步應(yīng)用Western blot 檢測(cè)EGFR-PI3k-AKT信號(hào)通路相關(guān)蛋白的表達(dá)。p-EGFR、p-mTOR、p-AKT蛋白都是EGFR-PI3k-AKT信號(hào)通路相關(guān)的重要蛋白，p-AKT是PIK3信號(hào)通路下游的激酶，在抑制細(xì)胞凋亡和促進(jìn)細(xì)胞增殖中有重要影響，p-mTOR參與腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化、免疫調(diào)節(jié)，其活化與EGFR-TKI耐藥有直接的關(guān)系。Western blot結(jié)果顯示，空白組、吉非替尼組、ALG-X-012組對(duì)p-EGFR、p-AKT、p-mTOR蛋白并無(wú)顯著下調(diào)，聯(lián)合用藥組相比吉非替尼組對(duì)p-EGFR、p-AKT、p-mTOR蛋白的下調(diào)顯著，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。因此ALG-X-012與吉非替尼聯(lián)用對(duì)H1975細(xì)胞的機(jī)制可能與抑制EGFR和p-mTOR的活化有關(guān)。

綜上所述，EGFR-PI3k-AKT信號(hào)通路是腫瘤生長(zhǎng)的重要通路，它的失調(diào)會(huì)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)并抑制細(xì)胞凋亡。金復(fù)康優(yōu)化方ALG-X-012與吉非替尼的聯(lián)用對(duì)非小細(xì)胞肺癌H1975細(xì)胞有顯著抑制細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，抑制腫瘤細(xì)胞遷移的作用，其機(jī)制可能是ALG-X-012阻斷了EGFR-PI3k-AKT信號(hào)通路，從而增強(qiáng)吉非替尼抗腫瘤活性。

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（收稿日期：2018-02-11 編輯：程鵬飛）