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      HPV16/18型病毒檢測(cè)與宮頸癌的相關(guān)性研究

      2018-09-25 10:32:38潘智茵
      關(guān)鍵詞:載量危型鱗癌

      潘智茵

      【摘要】 目的:探究HPV16/18型病毒感染與宮頸癌的相關(guān)性,分析其臨床應(yīng)用價(jià)值。方法:選取2014年1月-2017年1月本院收治的宮頸癌患者90例為觀察組,同期來院體檢健康者90例為對(duì)照組。所有研究對(duì)象均采用羅氏Cobas HPV與實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)法測(cè)定HPV16/18DNA病毒載量,比較兩組的陽性率。結(jié)果:觀察組HPV16/18NDA載量水平及陽性率均高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);ROC曲線繪制及Logistics多因素回歸分析結(jié)果顯示,HPV16/18DNA載量水平≥(5.56±1.04)、(5.55±0.06)copies/mL為宮頸鱗癌的獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)因素(HR=1.004、0.783,P=0.045、0.031)。結(jié)論:宮頸鱗癌的發(fā)病與HPV16/18型病毒的感染具有一定相關(guān)性,建議臨床完善高危人群的宮頸癌篩查工作,實(shí)現(xiàn)早發(fā)現(xiàn)、早診治的目的,同時(shí)提示在宮頸癌癌前病變的過程中注意HPV感染。

      【關(guān)鍵詞】 宮頸癌; 人乳頭狀病毒; HPV16/18

      【Abstract】 Objective:To explore the correlation between HPV16/18 virus infection and cervical cancer and analyze its clinical application value.Method:A total of 90 patients with cervical cancer admitted to our hospital from January 2014 to January 2017 were selected as observation group,and 90 healthy people during the same period were selected as control group.Roche Cobas HPV and real-time fluorescent quantitative PCR assay were used to determine the HPV16/18DNA load of two groups,and the positive rates of two groups were compared.Result:The levels of HPV16/18NDA load and positive rate in observation group were higher than those of control group,the differences were statistically significant(P<0.05).ROC curve plotting and Logistics multivariate regression analysis showed that the levels of HPV16/18DNA load≥(5.56±1.04) and(5.55±0.06) copies/mL as an independent risk factor for cervical squamous cell carcinoma(HR=1.004,0.783,P=0.045,0.031).Conclusion:The incidence of cervical squamous cell carcinoma is associated with the HPV16/18 virus infection.It is recommended to improve the screening of cervical cancer in high-risk groups to achieve the purpose of early detection and early diagnosis and treatment,and should pay attention to HPV infection in the process of cervical cancer precancerous lesions.

      【Key words】 Cervical cancer; Human papillary virus; HPV16/18

      First-authors address:Foshan First Peoples Hospital,F(xiàn)oshan 528000,China

      doi:10.3969/j.issn.1674-4985.2018.18.013

      宮頸癌是目前發(fā)病率僅次于乳腺癌的婦產(chǎn)科常見惡性腫瘤之一,研究數(shù)據(jù)表明,全球每年有50萬左右新發(fā)宮頸癌的病例,我國(guó)大約有13萬[1]。由于我國(guó)大多數(shù)人對(duì)宮頸癌知識(shí)的知曉率低、臨床缺乏常規(guī)檢測(cè)手段等,患者宮頸癌確診時(shí)一般已處于晚期,手術(shù)治療已無法解決問題,嚴(yán)重降低患者生活質(zhì)量,危及患者生命。近年來國(guó)內(nèi)外學(xué)者發(fā)現(xiàn),人乳頭狀病毒(HPV)感染與宮頸癌的發(fā)病關(guān)系密切[2-4]。作為一種球形DNA病毒,HPV不僅能使皮膚、黏膜上皮組織受到感染,還能誘發(fā)細(xì)胞產(chǎn)生增殖失控的情況。在目前發(fā)現(xiàn)的130多種HPV亞型中,高危型HPV16/18病毒感染會(huì)在很大程度上增加宮頸癌發(fā)病的危險(xiǎn)性[5]。本研究以本院收治的90例宮頸鱗癌患者為研究對(duì)象,對(duì)其宮頸分泌物中的HPV16/18DNA進(jìn)行分析,探究?jī)烧吲c宮頸癌的相關(guān)性,現(xiàn)報(bào)道如下。

      1 資料與方法

      1.1 一般資料 選取2014年1月-2017年1月本院收治的宮頸癌患者90例為觀察組,同期來院體檢健康者90例為對(duì)照組。納入標(biāo)準(zhǔn):參照NCCN公布的《宮頸癌臨床實(shí)踐指南》中宮頸癌診斷標(biāo)準(zhǔn)[6],觀察組均經(jīng)病理證實(shí)為宮頸癌,同時(shí)病理類型為鱗癌;觀察組婦科陰道鏡檢查提示有宮頸肥大、宮頸糜爛;觀察組有白帶異常、不規(guī)則出血、排液等臨床表現(xiàn);研究對(duì)象均處于非孕期及經(jīng)期,在取材的前3 d內(nèi)無陰道沖洗、性生活、用藥史。排除標(biāo)準(zhǔn):研究近期曾行放療、化療治療,近期有使用激素類藥物治療史的患者。研究小組指定專人向患者及家屬解釋研究?jī)?nèi)容,患者自愿參與并簽署同意書,且研究?jī)?nèi)容與倫理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)相符,本院倫理委員會(huì)審核并批準(zhǔn)本研究實(shí)施。

      1.2 方法

      1.2.1 儀器和試劑 研究統(tǒng)一采用由哈爾濱凱普德生物科技有限公司提供的Cobas檢測(cè)儀器設(shè)備及試劑盒。

      1.2.2 標(biāo)本采集與檢測(cè)方法 所有研究對(duì)象均采用羅氏Cobas HPV檢測(cè)法與實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)法測(cè)定HPV16/18DNA病毒載量。標(biāo)本采集方法為:采用毛刷插入受檢者宮頸管內(nèi),圍繞子宮頸旋轉(zhuǎn)2周,刮出宮頸口和宮頸管內(nèi)的上皮細(xì)胞。將采集到的所有受試對(duì)象的Preserv Cyt或Sure Path標(biāo)本置于備好的專用試管中,掃描條碼并建立相應(yīng)工作命令文件。操作步驟根據(jù)儀器提示進(jìn)行,按要求將耗材與試劑放置于Cobas x 480提取儀器中,試劑主要有18 mL洗脫液、200 mL洗液、磁珠13.5 mL、9 mL十二烷基硫酸鈉、1.0 mL HPV Mg/Mn、兩管1.2 mL的蛋白酶K、兩管1.0 mL的HPV MMX、0.5 mL HPV陰性對(duì)照、0.5 mL HPV陽性對(duì)照。在試劑與耗材準(zhǔn)備完畢后即可開始DNA的提取。將提取完成且已自動(dòng)添加樣品和試劑的PCR板轉(zhuǎn)移至Cobas z 480全自動(dòng)分析儀中開始PCR的擴(kuò)增處理與熒光檢測(cè)。HPV16和HPV18的檢測(cè)極限分別為300、600 copies/mL。統(tǒng)計(jì)兩組HPV16/18DNA載量及陽性率,分析HPV16/18DNA載量與宮頸癌的相關(guān)性。

      1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 使用SPSS 20.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)量資料用(x±s)表示,組間比較采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,比較采用字2檢驗(yàn)或Fishers檢驗(yàn);分析ROC曲線確定宮頸癌的HPV16/18DNA載量閾值;采用Logistic回歸分析宮頸癌的獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)因素。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

      2 結(jié)果

      2.1 兩組基線資料比較 觀察組年齡25~66歲,平均(37.3±3.9)歲;體質(zhì)指數(shù)(BMI)(21.71±1.95)kg/m2。對(duì)照組年齡24~67歲,平均(37.2±4.0)歲;BMI(21.67±1.96)kg/m2。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。

      2.2 兩組HPV16/18DNA載量及陽性率比較 觀察組HPV16/18NDA載量水平及總陽性率均高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見表1。

      2.3 HPV16/18與宮頸癌的Logistics回歸分析HPV16/18DNA載量于ROC曲線下面積分別為0.606(P=0.030)和0.743(P=0.052),閾值分別為(5.56±1.04)、(5.55±0.06)copies/mL;Logistic多因素回歸分析表明,HPV16/18DNA載量水平分別≥(5.56±1.04)、(5.55±0.06)copies/mL為宮頸鱗癌的獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)因素(P<0.05)。見表2。

      3 討論

      流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示,宮頸癌是除了乳腺癌以外發(fā)病率最高的女性惡性腫瘤[7-17]。宮頸發(fā)生病變時(shí),患者會(huì)出現(xiàn)陰道流血、流液等特征,這些早期癥狀常被忽視,通常導(dǎo)致患者錯(cuò)過手術(shù)治療的機(jī)會(huì),晚期惡性病變轉(zhuǎn)移,嚴(yán)重影響其生存質(zhì)量。近年來,宮頸癌的發(fā)病人數(shù)逐年增多,同時(shí)其發(fā)病表現(xiàn)出年輕化的趨勢(shì),宮頸癌已被視為威脅全球女性健康的一個(gè)公共衛(wèi)生問題,在全球?qū)m頸癌的發(fā)病病例數(shù)中發(fā)展中國(guó)家病例數(shù)占比高達(dá)80%,我國(guó)由于人口基數(shù)大,每年新發(fā)病例占全球的28%,這對(duì)我國(guó)女性的生命健康造成嚴(yán)重威脅[8-10]。雖然宮頸癌早期患者無明顯的癥狀體征,但病情的發(fā)展是一個(gè)漸進(jìn)的過程,因此如果能在癌前病變的早期即進(jìn)行常規(guī)篩查、給予臨床診斷,進(jìn)而根據(jù)病變類型給予明確治療干預(yù),有利于提高治愈率。

      曾有學(xué)者通過跟蹤隨訪發(fā)現(xiàn),宮頸癌患者如果早期識(shí)別病變情況并給予早期干預(yù)治療,其五年生存率可達(dá)90%[11,18]。周斌等[12]研究提出,在宮頸癌的發(fā)生與病情進(jìn)展過程中HPV的作用不可忽視。朱佳英等[13]通過研究不同HPV的亞型與宮頸病變的相關(guān)性,發(fā)現(xiàn)在宮頸病變過程中低危型與高危型HPV均有參與,此外,當(dāng)疾病向惡性程度不斷發(fā)展時(shí)高危型HPV的占比隨之不斷升高,其中以HPV16/18型為甚[14]。HPVDNA的整合功能是HPV侵入機(jī)體發(fā)揮致癌作用的重要機(jī)制,而高危HPV16/18亞型均為整合形式。兩種高危亞型中起到致癌效果的主要基因?yàn)镋2、E6、E7,其中E2基因蛋白能夠通過影響病毒DNA的復(fù)制過程與mRNA的轉(zhuǎn)錄作用而致癌,除此之外,E6、E7的轉(zhuǎn)化功能受E2基因蛋白的控制。E6、E7通過降低p53抑癌基因、細(xì)胞直接轉(zhuǎn)化、宿主細(xì)胞DNA感染等作用,影響細(xì)胞周期調(diào)控蛋白與致癌基因的作用環(huán)節(jié),干擾正常的細(xì)胞周期,進(jìn)而使細(xì)胞正常的生長(zhǎng)、繁殖失控,最終導(dǎo)致癌變[15,19-20]。本研究以90例宮頸鱗癌患者及90例同期來院體檢的健康者為研究對(duì)象,通過提取分析其宮頸分泌物的DNA探究宮頸癌與HPV16/18亞型的相關(guān)性。結(jié)果顯示,觀察組HPV16/18NDA載量水平及陽性率均高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);ROC曲線繪制及Logistic多因素回歸分析結(jié)果顯示,HPV16/18DNA載量水平≥(5.56±1.04)、(5.55±0.06)copies/mL為宮頸鱗癌的獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)因素(P<0.05)。這一結(jié)果與文獻(xiàn)[16,21]的研究結(jié)果一致,宮頸上皮內(nèi)瘤變?cè)诔掷m(xù)HPV16/18型病毒的持續(xù)感染下易轉(zhuǎn)化為宮頸癌,此外,HPV16/18高病毒載量在宮頸癌的發(fā)病中作用重要。

      綜上所述,HPV16/18型病毒感染與宮頸鱗癌的發(fā)病密切相關(guān),提示臨床落實(shí)高危人群的篩查工作,通過早發(fā)現(xiàn)、早治療降低宮頸癌的發(fā)病率。本研究由于樣本數(shù)量有限,同時(shí)在選取研究對(duì)象時(shí)可能受選擇偏倚的影響,HPV16/18型病毒與宮頸癌的相關(guān)性仍需進(jìn)一步探究。

      參考文獻(xiàn)

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