楊井泉，張?jiān)品?，?磊，沈 敏

(新疆農(nóng)墾科學(xué)院 省部共建綿羊遺傳改良與健康養(yǎng)殖國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，新疆 石河子 832000)

隨著我國(guó)畜禽養(yǎng)殖業(yè)的迅速發(fā)展，畜禽糞便排放不斷增加，由此產(chǎn)生的生態(tài)環(huán)境問(wèn)題也變得日益突出。目前我國(guó)每年產(chǎn)生畜禽糞便排放總量高達(dá)38億噸，而綜合利用率和無(wú)害化處置率只有分別不到60%和50%[1]，仍有40%未得到有效處理和利用，給周邊環(huán)境和居民生活帶來(lái)不利的影響，已成為農(nóng)業(yè)面源污染的主要來(lái)源。畜禽糞便富含纖維素、粗蛋白等有機(jī)質(zhì)和一定的礦物質(zhì)和微量元素，可作為生產(chǎn)有機(jī)肥料的原料[2]。

生物堆肥是養(yǎng)殖場(chǎng)固體廢棄物資源化利用的主要手段，具有投資小、效益高、可以使大量有機(jī)固體廢棄物重復(fù)資源化利用等優(yōu)點(diǎn)，但存在發(fā)酵周期長(zhǎng)、產(chǎn)生臭味、纖維素木質(zhì)素等分解不徹底、肥效低等缺陷[3]。堆肥是由群落結(jié)構(gòu)演替非常迅速的多個(gè)微生物群體共同作用而實(shí)現(xiàn)固體廢物資源化、無(wú)害化的一個(gè)動(dòng)態(tài)過(guò)程，微生物在其中發(fā)揮了主要作用，是決定堆肥發(fā)酵周期長(zhǎng)短和臭味大小的關(guān)鍵因素。如果在堆肥基質(zhì)中添加可加快基質(zhì)分解速度并能除臭的微生物組合，則既能加快堆肥腐熟進(jìn)程又能有效地減少臭味的逸出，對(duì)于提高堆肥產(chǎn)品質(zhì)量和控制環(huán)境污染具有重要作用[4-6]。

本試驗(yàn)以某生物濾池樣品為菌源進(jìn)行纖維素酶活性測(cè)定和除臭試驗(yàn)，分離篩選出有一定除臭功能高效纖維素降解菌株，并對(duì)其生理生化特征和分子水平的種屬進(jìn)行鑒定，以期為進(jìn)一步開發(fā)用于養(yǎng)殖廢棄物堆肥處理的復(fù)合微生物菌劑奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

菌源樣品采自某垃圾處理廠生物濾池。標(biāo)準(zhǔn)菌株綠色木霉(40502)由新疆天物生態(tài)科技股份有限公司惠贈(zèng)。

1.2 培養(yǎng)基及試劑

(1)赫奇遜(Hutchinson)氏培養(yǎng)基：用于纖維素降解菌株的富集培養(yǎng)。KH2PO41.0 g、NaCl 0.1 g、MgSO4·7H2O 0.3 g、NaNO32.5 g、FeCl30.001 g、CaCl20.1 g，無(wú)淀粉濾紙1張剪碎加入，攪拌并定容至1 000 mL，pH7.2左右，121 ℃高壓滅菌 15 min。

(2)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基：用于細(xì)菌的分離培養(yǎng)。牛肉膏3.0 g、蛋白胨10.0 g、NaCl 5.0 g，瓊脂15-20 g，加水溶解并定容至1 000 mL，pH7.4～7.6。121 ℃高壓滅菌20 min。

(3)羧甲基纖維素鈉培養(yǎng)基(CMC-Na培養(yǎng)基)：用于纖維素降解菌的篩選。羧甲基纖維素鈉(CMC- Na)20 g、Na2HPO42.5 g、KH2PO41.5 g、蛋白胨2.5 g、酵母膏0.5 g、H2O 1 000 mL，瓊脂20 g，pH 7.0～7.2，121 ℃高壓滅菌15 min。

(4)發(fā)酵培養(yǎng)基：用于測(cè)定酶活。麩皮5.0 g，蛋白胨0.5 g，Mandel's無(wú)機(jī)鹽營(yíng)養(yǎng)液100 mL，121 ℃滅菌20 min。

(5)生孢培養(yǎng)基：蛋白胨1.0 g、酵母膏0.7 g、(NH4)2SO40.2 g、Mg SO4·7H2O 0.2 g、K2HPO41.0 g，瓊脂20 g，加H2O至 1 000 mL，pH 7.0～7.2。121 ℃高壓滅菌15 min。傾入無(wú)菌直形試管制成斜面。

(6)革蘭氏碘液：碘化鉀2.0 g，碘1.0 g，加蒸餾水300 mL。用于纖維素水解圈的測(cè)定。

(7)DNS 試劑(3,5-二硝基水楊酸)、檸檬酸緩沖液、葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液等按照QB 2583- 2003標(biāo)準(zhǔn)配制。

(8)NH3選擇性培養(yǎng)基：稱取蔗糖50.0 g、KH2PO42.0 g、MgSO40.5 g、FeSO40.1 g、1%ZnSO45.0 mL、NaCl 2.0 g，加蒸餾水1 000 mL充分溶解后。按照每瓶10 mL的量分裝于50 mL三角瓶中，高壓滅菌。接菌前每瓶分別加入100 μL氨水，搖勻備用。

(9)Na2S選擇性培養(yǎng)基：KH2PO42 g、NH4Cl 0.4 g、Na2CO30.2 g、MgCl2·6H2O 0.2 g，瓊脂18 g，加蒸餾水1 000 mL充分溶解，pH 7.0，高壓滅菌。待在培養(yǎng)基冷卻至40～50 ℃左右，加入10 g硫化鈉，迅速混合均勻，倒平板。

1.3 方 法

1.3.1 纖維素降解細(xì)菌的分離 稱取10 g樣品置于無(wú)菌三角瓶，加入100 mL生理鹽水?dāng)嚢杈鶆蚝螅? mL懸液加入盛有 50 mL赫奇遜氏培養(yǎng)基的三角燒瓶，30 ℃、150 rpm條件下培養(yǎng)30 min以進(jìn)行纖維素降解菌的富集。將富集后的培養(yǎng)液進(jìn)行10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6倍的梯度稀釋，分別取100 μL稀釋液涂布牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，置于37 ℃恒溫培養(yǎng)24 h。挑取形態(tài)不同的單菌落分別接種牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，純化培養(yǎng)后置于4 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.2 CMC水解圈測(cè)定 取分離菌株的液體培養(yǎng)物各5 μL，分別點(diǎn)種CMC培養(yǎng)基，30 ℃恒溫倒置培養(yǎng)1 d。取出培養(yǎng)板，加入革蘭氏碘液浸染3～5 min。觀察菌落周圍有無(wú)明顯水解圈，并測(cè)量水解圈直徑(H)與菌落直徑(C)，計(jì)算H/C比值，根據(jù)H/C比值大小初步確定分離菌株纖維素酶活力的高低。

1.3.3 分離菌株纖維素酶活力測(cè)定 選取H/C比值較大的分離菌株以及標(biāo)準(zhǔn)菌株，分別接種于液體發(fā)酵培養(yǎng)基，30 ℃、150 rpm振蕩培養(yǎng)4 d，3 000 rpm離心10 min，收集上清液，進(jìn)行纖維素酶活性測(cè)定。測(cè)定指標(biāo)包括：①纖維素酶總活性：采用濾紙酶活性(FPA)檢測(cè)法；②外切β-1,4-葡萄糖苷酶(簡(jiǎn)稱CBH或C1酶)活性：采用微晶纖維素(MCC)酶活性測(cè)定法；③內(nèi)切β-1,4-葡萄糖苷酶(簡(jiǎn)稱EG或Cx酶)活力檢測(cè)：采用羧甲基纖維素(CMC)酶活性測(cè)定法；④β-葡萄糖苷酶(簡(jiǎn)稱BG)活性：采用Barush和Swiain法[7]，以水楊酸苷作底物。酶活力單位用IU/mL表示，即每mL 酶液在1 min內(nèi)使底物降解產(chǎn)生1 μmol葡萄糖所需的的酶量。

1.3.4 分離菌株的除臭能力檢測(cè)

1.3.4.1 氨水和硫化鈉利用情況 將分離菌株分別接入加有100 μL氨水的10 mLNH3選擇性液體培養(yǎng)基中，用封口膜密封瓶口后，28 ℃、150 rpm震蕩培養(yǎng)1 d。觀察菌液的變化，菌液混濁說(shuō)明菌株能夠直接利用NH3，菌液保持透明則說(shuō)明菌株不能直接利用NH3。

將分離菌株分別劃線接種于加有硫化鈉的選擇性固體培養(yǎng)基中，28 ℃培養(yǎng)1 d。觀察不同菌株的生長(zhǎng)情況，能夠生長(zhǎng)的菌株說(shuō)明其具有利用和降解硫的能力。

1.3.4.2 豬糞除臭效果檢測(cè) 將分離菌株分別接入10 mL牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基，28 ℃、150 rpm條件下培養(yǎng)1 d。稱取新鮮豬糞50.0 g，裝入1 000 mL燒杯中，加入5 mL培養(yǎng)菌液和5 mL無(wú)菌水，混合均勻。每個(gè)菌株做6個(gè)重復(fù)，其中3個(gè)用于氨氣濃度測(cè)定，3個(gè)用于硫化氫濃度測(cè)定。同時(shí)設(shè)一組只加無(wú)菌水的空白對(duì)照。在測(cè)氨的大燒杯中，放入裝有20 mL硼酸溶液的50 mL小燒杯；在測(cè)硫化氫的大燒杯中，放入裝有20 mL鋅銨絡(luò)鹽溶液的50 mL小燒杯。將大燒杯口密封后，室溫(25 ℃)放置。5 d后取出小燒杯中的吸收液，通過(guò)硼酸吸收凱氏法測(cè)定氨氣釋放量，亞甲基藍(lán)分光光度法測(cè)定硫化氫釋放量，進(jìn)一步檢測(cè)菌株清除NH3和H2S的能力。同時(shí)換入新加入20 mL硼酸溶液或鋅銨絡(luò)鹽溶液的50 mL小燒杯。如此每隔5 d進(jìn)行一次測(cè)定，到第20 d為止。

1.3.5 篩選菌株菌落形態(tài)及生理生化鑒定 根據(jù)分離菌株的菌落形態(tài)特征及生理生化特征，參照《伯杰細(xì)菌鑒定手冊(cè)》(第八版)[8]和《常見細(xì)菌系統(tǒng)鑒定手冊(cè)》[9]進(jìn)行菌種初步鑒定。

將篩選菌株在牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基上劃線培養(yǎng)，得到單菌落，觀察分離菌株的菌落形態(tài)特征，包括菌落形狀、大小、顏色、邊緣、透明度、表面、隆起形狀及培養(yǎng)基顏色變化等。挑取單菌落，進(jìn)行革蘭氏染色、菌體芽孢染色并鏡檢。

將篩選菌株劃線接種于生孢培養(yǎng)基，30 ℃培養(yǎng)4～7 d。常規(guī)涂片，革蘭氏染色，油鏡觀察菌體是否形成芽孢。

生理生化鑒定主要進(jìn)行糖類發(fā)酵試驗(yàn)和碳源利用試驗(yàn)。

1.3.6 篩選菌株的16S rDNA 序列鑒定 提取分離細(xì)菌的基因組總DNA，擴(kuò)增16S rDNA的V3-V4區(qū)保守序列，PCR上下游引物序列分別為27F：5′-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3′，1492R：5′-GGTTACCTTGTTACGACTT-3′。 PCR 反應(yīng)體系為50 μL：DNA模板15 ng，上下游引物(10 uM)各2 μL，dNTPs(2.5 mM)4 μL，10×PCR buffer 5 μL，Taq DNA聚合酶(2.5 U/μL，TaKaRa)0.3 μL，ddH2O補(bǔ)充至50 μL。反應(yīng)條件為：95 ℃ 5 min；95 ℃ 30 s，57 ℃ 30 s，72 ℃ 40 s，循環(huán)30 次；72 ℃ 10 min。1.5%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)PCR產(chǎn)物，電泳檢測(cè)合格后切膠回收，送生工測(cè)序。利用DNASTAR 5.0軟件分析測(cè)序結(jié)果，并與GenBank中的相關(guān)序列進(jìn)行Blast比對(duì)，初步判定各菌株的種屬。

1.3.7 篩選菌株的安全性檢驗(yàn) 分別吸取候選菌株的培養(yǎng)菌液0.2 mL，接種1月齡京白小鼠，每株菌液接種3只小鼠。同時(shí)設(shè)3只對(duì)照小鼠。維持正常飼養(yǎng)狀態(tài)。每天觀察并記錄小鼠的精神狀態(tài)以及飲食情況，連續(xù)觀察5 d。

2 結(jié)果與分析

2.1 纖維素降解菌的初篩結(jié)果

菌源樣品經(jīng)過(guò)富集培養(yǎng)、菌種分離，共獲得38株細(xì)菌。利用CMC瓊脂培養(yǎng)基和Grans's碘液染色法，對(duì)分離菌株進(jìn)行纖維素酶活性初篩，結(jié)果共有21株細(xì)菌產(chǎn)生了清晰的水解圈，其水解圈直徑與菌落直徑比值(H/C比值)介于1.86～5之間，說(shuō)明這些菌株均能產(chǎn)生一定量的纖維素酶。表1所示為部分纖維素降解菌的初篩結(jié)果。由表1知，菌株X-1和X-6的水解圈直徑(H)和H/C比值相對(duì)較高，提示這兩個(gè)菌株的纖維素酶降解能力相對(duì)較強(qiáng)。

表1 部分纖維素降解菌的初篩結(jié)果Table 1 The initial screening results of some cellulose degradation bacteria

2.2 纖維素降解菌纖維素酶活性檢測(cè)結(jié)果

試驗(yàn)進(jìn)一步對(duì)21個(gè)初篩菌株的纖維素酶活性進(jìn)行了測(cè)定。部分菌株檢測(cè)結(jié)果如表2所示，其中菌株X-1和X-6的纖維素酶總活性(FPA)及纖維素酶主要組分Cen、Cex、BG的酶活性均高于標(biāo)準(zhǔn)菌株綠色木霉，確定為纖維素酶活性較高的分離菌株。

2.3 分離菌株的除臭能力檢測(cè)

2.3.1 氨水和硫化鈉利用情況 如表3所示，菌株X-1能夠在添加硫化鈉的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，但在添加氨水的培養(yǎng)基中不生長(zhǎng)，說(shuō)明該菌株可以利用硫化鈉；菌株X-6能夠在添加氨水培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，而在添加硫化鈉的培養(yǎng)基上不生長(zhǎng)，說(shuō)明該菌株可以利用氨水作為氮源；菌株X-2、X-3和X-20對(duì)氨水和硫化鈉均不能利用。菌株X-1和X-6可利用硫或氮的培養(yǎng)特性提示其在清除NH3和H2S方面可能具有一定作用。

表2 部分菌株的纖維素酶活性檢測(cè)結(jié)果Table 2 Test results of cellulase activity in partial isolated strains IU/mL

表3 部分分離菌株的氨水和硫化鈉利用情況Table 3 Utilization of NH3 and Na2S in partial isolated strains

2.3.2 豬糞除臭效果檢測(cè)結(jié)果 如表4所示，2個(gè)分離菌株分別對(duì)豬糞中的H2S和NH3具有一定的清除能力。菌株X-1對(duì)豬糞中的H2S 和NH3均具有較高的清除率，接種20 d后對(duì)H2S和NH3的清除率分別達(dá)到44.56%和29.13%；菌株X-6則可有效利用NH3，接種20 d后對(duì)NH3的清除率達(dá)到41.87%，但對(duì)H2S沒(méi)有明顯的清除效果。

2.4 菌株X-1、X-6的初步鑒定

2.4.1 菌株的形態(tài)特征及生理生化特性 菌株X-1菌落呈乳白色凸起，圓形，不透明，表面光滑，邊緣整齊。革蘭氏染色呈陽(yáng)性小桿菌(圖1A)；在生孢培養(yǎng)基上培養(yǎng)4 d后，經(jīng)革蘭氏染色、油鏡觀察，可見有大量芽孢形成(圖1B)。芽孢位于菌體中部，呈橢圓形，直徑大于菌體直徑，使得整個(gè)菌體膨脹呈梭形。生化鑒定結(jié)果表明，菌株X-1能利用試驗(yàn)所選所有糖類物質(zhì)。如表5所示，X-1能分解果糖產(chǎn)酸并產(chǎn)氣；能分解葡萄糖、蔗糖、甘露醇、鼠李糖、棉子糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。說(shuō)明X-1可利用較多糖類物質(zhì)作為碳源和能源，但分解糖的能力有一定差異。酶類試驗(yàn)結(jié)果(表6)表明，菌株X-1產(chǎn)生淀粉酶和過(guò)氧化氫酶，不產(chǎn)生脲酶、氧化酶和脂肪酶；不產(chǎn)生明膠酶；接種三糖鐵瓊脂的斜面和底面都為黃色，說(shuō)明菌株X-6可產(chǎn)生乳糖，不產(chǎn)生H2S；不產(chǎn)生黑色素；耐鹽試驗(yàn)結(jié)果表明，菌株X-1可耐受1%氯化鈉。

表4 篩選菌株NH3和H2S清除能力檢測(cè)結(jié)果Table 4 Test results of the absorbance of NH3 and H2S in isolated strains

圖1 菌株 X-1、X-6的革蘭氏染色和芽孢形成結(jié)果(100×) A、C：菌株 X-1、X-6在常規(guī)培養(yǎng)基上培養(yǎng)4 d后菌落的革蘭氏染色結(jié)果；B、D：菌株 X-1、X-6在生孢培養(yǎng)基上培養(yǎng)4 d后菌落的革蘭氏染色結(jié)果，箭頭所指為芽孢Fig.1 The results of Gram's stain and spore formation of strains X-1 and X-6 A and C: The results of Gram's stain of colonies of X-1 and X-6 cultivated in routine medium B and D: The results of Gram's stain of colonies of X-1 and X-6 cultivated in sporulation medium for 4 days

菌株X-6菌落呈乳白色凸起，圓形，不透明，表面光滑，邊緣整齊。革蘭氏染色呈陽(yáng)性小桿菌(圖1C)；在生孢培養(yǎng)基上培養(yǎng)4 d后，經(jīng)革蘭氏染色、油鏡觀察，可見有大量芽孢形成(圖1D)。芽孢位于菌體中部，呈圓柱形，直徑小于菌體直徑。生化鑒定結(jié)果表明，菌株X-6能利用試驗(yàn)所選部分糖類物質(zhì)作為碳源和能源。如表5所示，X-6能分解葡萄糖、蔗糖和木糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣；能輕微利用棉子糖；不能利用果膠、甘露醇、果糖和鼠李糖。酶類試驗(yàn)結(jié)果(表6)表明，菌株X-6產(chǎn)生淀粉酶和過(guò)氧化氫酶，不產(chǎn)生脲酶、氧化酶、脂肪酶和明膠酶；接種三糖鐵瓊脂的斜面和底面都為黃色，說(shuō)明菌株X-1可產(chǎn)生乳糖，不產(chǎn)生H2S；不產(chǎn)生黑色素；耐鹽性一般，可耐受1%氯化鈉。

2.4.2 篩選菌株的16S rDNA 序列鑒定 以篩選菌株X-1、X-6基因組總DNA為模板，經(jīng)PCR擴(kuò)增均獲得長(zhǎng)度為1 516 bp的DNA片段。 將篩選菌株的測(cè)序結(jié)果分別輸入GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行Blast比對(duì)。分析結(jié)果表明，菌株X-1的V3-V4區(qū)擴(kuò)增序列與燦爛類芽孢桿菌(Paenibacilluslautusstrain12S5，KM374740.1)相似度為99%，初步確定菌株X-1屬于類芽孢桿菌屬中的燦爛類芽孢桿菌(Paenibacilluslautus)[8-9]。菌株X-6的V3-V4區(qū)擴(kuò)增序列與煙酸芽胞桿菌(BacillusniacinistrainBM1C4，EU221335)相似度為99%，初步確定菌株X-6屬于芽孢桿菌屬中的煙酸芽胞桿菌(Bacillusniacini)[8-9]。

2.4.3 篩選菌株的安全性檢驗(yàn) 試驗(yàn)小鼠在接種菌株X-1、X-6的培養(yǎng)菌液后，除注射當(dāng)天表現(xiàn)輕微的應(yīng)激性沉郁外，后續(xù)幾天均再無(wú)異常表現(xiàn)。接種5 d后，將試驗(yàn)小鼠脫頸致死進(jìn)行解剖，接種小鼠組織器官未發(fā)現(xiàn)如何異常。說(shuō)明2個(gè)分離菌株均為安全菌株。

表5 分離菌株的碳源利用檢測(cè)結(jié)果Table 5 The results of utilization of the carbon sources of the screened strains

表6 分離菌株的生化特征Table 6 The biochemical characteristics of the screened strains

綜上所述，試驗(yàn)最終分離篩選出兩株具有較高纖維素酶活性和一定除臭功能的環(huán)境友好型細(xì)菌，根據(jù)兩個(gè)菌株的菌落形態(tài)、生理生化特征以及基于16S rDNA序列的分子鑒定結(jié)果，初步鑒定菌株X-1屬于類芽孢桿菌屬中的燦爛類芽孢桿菌(Paenibacilluslautus)，菌株X-6屬于芽孢桿菌屬中的煙酸芽胞桿菌(Bacillusniacini)。

3 討 論

有關(guān)纖維素降解菌的定性篩選，國(guó)內(nèi)目前主要是利用羧甲基纖維素(CMC)為底物結(jié)合0.1%剛果紅特異性染色的方法[10-11]。剛果紅在CMC培養(yǎng)基上的浸染時(shí)間為15～20 min，較為快速。但剛果紅是一種聯(lián)苯胺類染料，存在致癌風(fēng)險(xiǎn)[12]，且對(duì)菌株生長(zhǎng)和纖維素酶產(chǎn)量有一定影響[13]。2008年，Kasana等[13]首次報(bào)道了利用革蘭氏碘液染色篩選纖維素降解菌的方法，革蘭氏碘液能夠與CMC培養(yǎng)基中的纖維素結(jié)合形成烏青色的復(fù)合物，而與被水解的纖維素則不結(jié)合，從而在產(chǎn)纖維素酶菌株菌落周圍形成一個(gè)顏色差異明顯、邊緣清晰的水解圈。本試驗(yàn)采用CMC培養(yǎng)基結(jié)合革蘭氏碘液染色方法，在較短時(shí)間內(nèi)完成了產(chǎn)纖維素酶候選菌株的定性篩選，并根據(jù)水解圈直徑與菌落直徑比值(H/C比值)大小初步篩選出2株纖維素酶產(chǎn)生能力相對(duì)較強(qiáng)的菌株。而且從進(jìn)一步的纖維素酶活性檢測(cè)數(shù)據(jù)來(lái)看，初篩結(jié)果和定量檢測(cè)結(jié)果趨勢(shì)基本一致，具有很好的參考價(jià)值。整個(gè)染色過(guò)程只需要3～5 min，相對(duì)于剛果紅染色，該方法更為安全、有效、方便、快捷，值得推廣。

試驗(yàn)重點(diǎn)對(duì)分離菌株的纖維素酶活性進(jìn)行了檢測(cè)，期望得到產(chǎn)酶量高、酶系組成比較齊全的安全菌株。結(jié)果表明，分離菌株X-1、X-6的3個(gè)主要的纖維素酶組分C1、Cx和BG的酶活都比較高，其中X-1的C1、Cx和BG酶活均在100 IU/mL以上，纖維素酶總活性(FPA)分別為77.97和70.95 IU/mL，纖維素酶活性接近[10，15]或高于[13]部分文獻(xiàn)所報(bào)道的分離菌株，而低于金迪等[16]的文獻(xiàn)報(bào)道。另外，從生理生化試驗(yàn)結(jié)果來(lái)看，兩個(gè)分離菌株除了高產(chǎn)纖維素酶外，還可產(chǎn)生淀粉酶和過(guò)氧化氫酶。纖維素酶和淀粉酶是飼用復(fù)合酶制劑的兩個(gè)重要組分[17]，由于淀粉酶活性不是本次試驗(yàn)關(guān)注的重點(diǎn)，因此未做進(jìn)一步研究。在養(yǎng)殖環(huán)境治理過(guò)程中，除臭是涉及空氣污染的一個(gè)重要治理環(huán)節(jié)。簡(jiǎn)保全等[18]針對(duì)H2S和NH3在糞便堆肥過(guò)程中的釋放特點(diǎn)進(jìn)行的研究表明，H2S的產(chǎn)生主要集中在升溫期和高溫期初期(1～13 d)，NH3的揮發(fā)主要集中在升溫期和高溫期(1～20 d)，即堆肥的前20 d是H2S和NH3的主要釋放期。本次分離菌株通過(guò)新鮮豬糞除臭試驗(yàn)結(jié)果表明，在接種第15～20 d，菌株X-1 和X-6分別對(duì)H2S和NH3表現(xiàn)出較好的脫臭功能，是兩株兼具纖維素降解和除臭功能的環(huán)境友好型細(xì)菌。后續(xù)將對(duì)這兩個(gè)分離菌株的功能做進(jìn)一步試驗(yàn)研究，同時(shí)繼續(xù)篩選纖維素降解菌株和除臭菌株，為最終開發(fā)復(fù)合菌劑，實(shí)際應(yīng)用于養(yǎng)殖廢棄物環(huán)境污染治理奠定技術(shù)基礎(chǔ)。