燈盞花素軟袋大輸液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

湯秀梅 劉丹 趙娟 張煌 丁江生

摘要：目的 建立燈盞素軟袋大輸液的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法 高效液相色譜法測定該制劑中野黃芩苷的含量進(jìn)行質(zhì)量檢查;并測定其PH值，滲透壓，不溶性微粒。結(jié)果 采用以十八烷基硅烷鍵合硅膠為色譜柱;以乙腈-0.1%磷酸（18：82）為流動(dòng)相，流速1.0 mL/min，檢測波長335 nm。野黃芩苷的線性范圍為16μg/mL～400μg/mL（ r = 0.9999），平均回收率為100.2%。結(jié)論 建立的燈盞花素軟袋大輸液的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，其含量測定方法簡便，可控，可用于燈盞花素大輸液的質(zhì)量控制指標(biāo)。

關(guān)鍵詞：燈盞花素軟袋大輸液;質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn);高效液相色譜法

中圖分類號(hào)：R927.11 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1007-2349（2018）09-0065-03

Study on Quality Standard of Large Volume Parenteral Infusion of Breviscapine Soft Bag

TANG Xiu-mei， LIU Dan， ZHAO Juan， ZHANG Huang， DING Jiang-sheng

（Yunnan Institute of Materia Medica// Key Laboratory of Yunnan Traditional Chinese Medicine and Ethnic

Medicine New Drug Creation Enterprise// Innovation and Research Center of Yunnan Baiyao Group ）

【Abstract】Objective： To establish the quality standard of large volume parenteral infusion of breviscapine soft bag. Methods： High performance liquid chromatography was used to determine the content of wild baicalin in the preparation for quality inspection. The pH value， osmotic pressure and insoluble particles were determined. Results： The octadecylsilane bonded silica gel was used as the column， the mobile phase was acetonitrile -0.1% phosphoric acid （18：82）， the flow rate was 1.0 mL/min， and the detection wavelength was 335 nm. The linear range of wild baicalin was 16 μg/mL to 400 μg/mL （r=0.9999）， and the average recovery was 100.2%. Conclusion： The quality standard of the breviscapine soft bag infusion is established and the method for determining the content is simple and controllable， and can be used for the quality control index of breviscapine large volume parenteral infusion.

【Key words】breviscapine soft bag large infusion， quality standard， high performance liquid chromatography

燈盞花素軟袋大輸液是以燈盞花素為原料制成的注射劑。燈盞花素具有活血化瘀，通經(jīng)活絡(luò)的功能。用于腦絡(luò)瘀阻，中風(fēng)偏癱，心脈痹阻，胸痹心痛;中風(fēng)后遺癥及冠心病心絞痛證候者。注射給藥不經(jīng)胃腸道，故不受消化系統(tǒng)及食物的影響，直接進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)或組織、器官內(nèi)，具有吸收快，作用迅速的特點(diǎn)。對(duì)研制的燈盞花素軟袋大輸液，研究控制其質(zhì)量，建立質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

1 材料

1.1 儀器 Agilent 708-DS自動(dòng)溶出儀;Agilent 1200高效液相色譜儀;BSA224s·cw 電子天平（賽多利斯科學(xué)儀器有限公司）;CPA225D電子天平（賽多利斯科學(xué)儀器有限公司）;YZ360DB超聲儀（上海越眾儀器設(shè)備有限公司）;

1.2 試藥 甲醇（色譜純，默克公司）;其余為分析純;野黃芩苷對(duì)照品（購于中國食品藥品檢定研究院，批號(hào)110842-201207），燈盞花素軟袋大輸液（批號(hào)：20151019，20151020，20151021，云南省藥物研究所提供）。

2 方法與結(jié)果

2.1 鑒別 取供試品液，用紫外-分光光儀進(jìn)行波長掃描，在（284±2）nm和（335±2）nm的波長處有最大吸收。

2.2 pH值 使用酸度計(jì)測定，用純化水沖洗電極，擦干。電極放入待測溶液中，讀數(shù)。每批樣分別測定3次。

2.3 裝量差異 取供試品3袋，開啟時(shí)注意避免損失，將內(nèi)容物轉(zhuǎn)移至干燥500 mL量筒中倒置15 min，盡量傾凈。讀出每個(gè)容器內(nèi)容物的裝量，并求其平均裝量，均應(yīng)不少于標(biāo)示裝量的97%。

2.4 可見異物 取供試品20袋，除去容器標(biāo)簽，擦凈容器外壁，必要時(shí)將藥液轉(zhuǎn)移至潔凈透明的適宜容器內(nèi)，置供試品于遮光板邊緣處，手持供試品頸部輕輕旋轉(zhuǎn)和翻轉(zhuǎn)使藥液中可能存在的可見異物懸?。ǖ珣?yīng)避免產(chǎn)生氣泡），輕輕翻搖后即用目檢視，重復(fù)3次，均不得檢出明顯可見異物。

2.5 不溶性微粒 取供試品，用水將容器外壁洗凈，小心翻轉(zhuǎn)20次，使溶液混合均勻，小心開啟容器，先取出部分供試品溶液沖洗取樣杯，再將供試品溶液取出置取樣杯中，開啟攪拌，使溶液均勻，每個(gè)供試品依法測定至少3次，每次取樣應(yīng)不少于5 mL，記錄數(shù)據(jù)，棄第1次測定數(shù)據(jù)，取后續(xù)測定數(shù)據(jù)的平均值作為測定結(jié)果。

2.6 滲透壓摩爾濃度 取適量新沸放冷的水調(diào)節(jié)儀器零點(diǎn)，然后由表中選擇兩種標(biāo)準(zhǔn)溶液（供試品溶液的滲透壓摩爾濃度應(yīng)介于兩者之間）校正儀器，再測定供試品溶液的滲透壓摩爾濃度。

2.7 含量測定

2.7.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;乙腈-0.1%磷酸（18：82）為流動(dòng)相;柱溫為35℃;流速為每分鐘1 mL。理論板數(shù)按野黃芩苷峰計(jì)算不低于4000。

a.空白

b.對(duì)照

c.樣品

圖1 燈盞花素軟袋大輸液中野黃芩苷色譜圖

2.7.2 對(duì)照溶液的制備 取野黃芩苷對(duì)照品，精密稱定，加甲醇溶解并稀釋制成每1mL中含80μg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

2.7.3 供試品溶液 取約2 mL樣品，用0.45 μm濾頭過濾，得供試品溶液。

2.7.4 空白溶液 取約2 mL空白樣品，用0.45 μm濾頭過濾，得空白溶液。

2.7.5 線性關(guān)系考察試驗(yàn) 精密稱取野黃芩苷對(duì)照品適量，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，制得對(duì)照品母液（0.808 mg/mL），精密吸取對(duì)照品母液5 mL、1 mL、1 mL、1 mL、1 mL分別置10 mL、5 mL、10 mL、25 mL、50 mL的容量瓶中，用甲醇并定容至刻度，搖勻。精密吸取5 μL，分別進(jìn)樣，以濃度（X）對(duì)峰面積（Y）進(jìn)行線性回歸，得回歸方程y=16328.5146x-76.6416，r=0.9999，表明燈盞花素在16～400 μg/mL圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.7.6 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批供試品，分別取出6份，濾過，分別測定野黃芩苷含量，測定結(jié)果顯示重復(fù)性好，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.79%。

2.7.7 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取供試品溶液適量，濾過，室溫放置，分別于0 h、1 h、3 h、6 h、9 h、12 h、18 h、24 h進(jìn)樣測定，24 h無顯著性變化，供試品較為穩(wěn)定，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.94%。

2.7.8 準(zhǔn)確度試驗(yàn) 精密稱取野黃芩苷對(duì)照品10 mg至50 mL量瓶中，加甲醇溶解，稀釋至刻度，作為對(duì)照儲(chǔ)備液;分別精密量取5 mL樣品置10 mL量瓶中9份，每3份分別加入對(duì)照儲(chǔ)備液1 mL、 2 mL、 3 mL，用甲醇稀釋至刻度，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液;另取上述對(duì)照儲(chǔ)備液用甲醇稀釋并制成每1 mL含0.08 mg的溶液，搖勻，即得對(duì)照品溶液。取上述對(duì)照品溶液和供試品溶液，分別進(jìn)樣，按外標(biāo)法計(jì)算，即得，實(shí)驗(yàn)結(jié)果回收率98%～101%之間，平均值100.2%。

2.7.9 中間精密度 3位不同人員對(duì)同一批供試品分別測定野黃芩苷，測定結(jié)果分別為，0.0794 mg/mL，0.0791 mg/mL，0.0795 mg/mL，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差1.76%。

2.7.10 耐用性實(shí)驗(yàn) 分別改變色譜條件中的流速為0.8 mL/min，1.0 mL/min，1.2 mL/min;柱溫：25℃，30℃，40℃;流動(dòng)相：乙腈-0.1%磷酸（20：80），乙腈-0.1%磷酸（18：82），乙腈-0.1%磷酸（16：84）柱子：Ecosil-C18，Kromasi 100-5 C18，Agilent Zorbax SB-C18，分別進(jìn)樣供試品液、對(duì)照品溶液，試驗(yàn)結(jié)果顯示，測定條件有小的變動(dòng)時(shí)，所用溶劑和輔料對(duì)溶出檢測結(jié)果無影響，野黃芩苷峰分離度均1.5以上。

2.7.11 3批樣品的檢測結(jié)果 見表1。

表1 3批樣品檢測結(jié)果

3 討論

3.1 pH值 可見異物、不溶性微粒，摩爾滲透壓等為控制中藥注射劑質(zhì)量的重要指標(biāo)，對(duì)燈盞花素軟袋輸液的這些指標(biāo)均進(jìn)行研究，并列入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中。

3.2 色譜條件研究 參照《中國藥典》2010年版一部的燈盞花素含量測定色譜條件，流動(dòng)相甲醇-0.1%磷酸（40：60），流速1.0 mL/min，檢測波長335 nm。進(jìn)供試品得到的野黃芩苷色譜峰有前沿峰，對(duì)稱性不好，影響積分基線，會(huì)導(dǎo)致峰面積不準(zhǔn)確，而檢測結(jié)果也不準(zhǔn)確。調(diào)整流動(dòng)相，乙腈-0.1%磷酸（18：82），野黃芩苷色譜峰峰形對(duì)稱性好，分離度1.5以上，確定色譜條件流動(dòng)相為乙腈-0.1%磷酸（18：82），流速1.0 mL/min，柱溫30℃，檢測波長335 nm。

參考文獻(xiàn)：

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（收稿日期：2018-03-19）