強 璐,王雨萌,徐 林

(北京中醫(yī)藥大學第三附屬醫(yī)院口腔科,北京 100029;*通訊作者,E-mail:shzhangrui@21cn.com)

復發(fā)性阿弗他潰瘍(recurrent ahthous ulcer,RAU)是口腔黏膜疾病中最常見的、具有周期發(fā)作特點的非化膿性炎癥性疾病[1]。RAU的發(fā)病率高達20%,且反復發(fā)作較難徹底治愈,嚴重影響患者的生活質量。細胞因子是由活化的免疫細胞及部分非免疫細胞分泌的具有調控免疫、炎癥及細胞生長等功能的小分子蛋白質[2]。有研究表明,細胞因子廣泛參與了RAU潰瘍局部的炎癥與免疫反應,在RAU的發(fā)生和發(fā)展中起著重要的作用[3]。白細胞介素-8(interleukin-8,IL-8)是細胞因子的一種,是調節(jié)機體對損傷及炎癥反應的重要的趨化因子之一[4]。然而,IL-8在RAU患者唾液中的局部表達情況及其與RAU的關系仍然沒有明確,本研究擬檢測RAU患者唾液中IL-8水平并探討其與RAU活動性的關系。

1 材料與方法

1.1 研究對象

本研究設計為前瞻性的橫斷面研究,2016年5月開始設計,2016年12月開始實施,研究對象為2016-12～2017-12在北京中醫(yī)藥大學第三附屬醫(yī)院口腔科確診的輕型RAU患者117例,其中男性54例,女性63例,年齡15-65歲。診斷標準符合陳謙明[5]主編的《口腔黏膜病學》第三版復發(fā)性阿弗他潰瘍的診斷標準。口腔中出現(xiàn)潰瘍不超過3 d且未使用全身藥物或局部藥物者定義為RAU活動期(活動期組,n=61),既往有RAU病史,但10 d內至此次檢查無潰瘍發(fā)作者定義為RAU間歇期(間歇期組,n=56)。另外選取我院進行體檢的年齡及性別匹配的健康成年人58例作為對照組。主要排除標準:①甲狀腺功能亢進;②急慢性涎腺炎或涎腺結石;③牙周病及其他口腔黏膜疾病;④2型糖尿病;⑤嚴重的肝腎功能障礙;⑥惡性腫瘤。

1.2 研究方法

1.2.1 唾液樣本采集 采用非刺激法采集RAU患者和對照組的唾液標本。所有患者均空腹,樣本收集前囑受試者用生理鹽水漱口3次,然后囑受試者坐于治療椅上,頭位端正,雙眼平視前方,使口腔腺體分泌唾液自然流于口底,然后將空針注射器置于口底唾液中間,盡量不觸碰黏膜,取1 ml唾液裝入無菌EP管中,3 000 r/min離心5 min后置于-80 ℃冰箱中備用。

1.2.2 ELISA檢測 IL-8水平采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測,ELISA試劑盒購自美國Diagnostic Products公司,嚴格按照使用說明書進行操作,各組血清標本的吸光光度值由BIO-RAD680酶標儀檢測。

1.3 統(tǒng)計分析

用Kolmogorov-Smirnov檢驗對各組數(shù)據(jù)進行正態(tài)性檢驗。正態(tài)分布的連續(xù)性變量采用均數(shù)±標準差表示,三組間比較采用方差分析及Tukey post-hoc檢驗。計數(shù)資料用百分率表示,兩組及三組間比較采用卡方檢驗。采用多因素Logistic逐步回歸法評價其各變量與RAU活動期的相關性。所有統(tǒng)計分析均采用SPSS22.0軟件進行。以雙側P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 基本臨床資料及唾液IL-8水平

各組間年齡、性別等基本臨床資料差異無統(tǒng)計學意義,而活動期組唾液IL-8水平顯著高于間歇期組,間歇期組唾液IL-8水平顯著高于對照組(見表1)。

2.2 各變量與RAU活動性的獨立相關性

在RAU患者中,對各變量與RAU活動性的獨立相關性進行分析,結果見表2。將各變量納入多因素Logistic逐步回歸分析,結果顯示,唾液IL-8水平是RAU活動性的獨立危險因子(優(yōu)勢比1.071,95%可信區(qū)間1.042-1.100;P<0.001)。

表1 各組的基本臨床資料及唾液IL-8水平Table 1 Baseline characteristics and salivary IL-8 levels in RAU patients and controls

表2 RAU活動性的多元Logistic回歸分析Table 2 Multiple Logistic regression analysis of active RAU

3 討論

RAU的反復發(fā)作會影響患者說話、進食,嚴重影響患者的生活質量。因此,對RAU發(fā)病進行動態(tài)的監(jiān)測和風險評估具有重要的意義。與血液標本相比,唾液標本具有無創(chuàng)、易采集、易于被患者接受等優(yōu)點,因此,利用唾液標本來監(jiān)測口腔健康和疾病狀態(tài),預測疾病的發(fā)生發(fā)展已成為近幾年研究的熱點。

本研究觀察到,活動期RAU患者唾液IL-8水平較間歇期患者明顯升高,而間歇期RAU患者唾液IL-8水平又較健康對照者顯著升高。這一研究結果表明,RAU患者唾液內IL-8處于高表達狀態(tài),并可能與疾病活動性相關。單核巨噬細胞、T細胞、中性粒細胞、內皮細胞、成纖維細胞等在炎癥刺激下均可以分泌IL-8[6,7]。而有研究表明,RAU患者口腔潰瘍局部可以檢測到CD4+及CD8+T細胞、B細胞、成熟的巨噬細胞、單核細胞的生成增多及腫瘤壞死因子-α(TNF-α)等炎癥因子的高表達[8,9]。而活動期RAU患者的外周血中也檢測出了TNF-α的高表達[10],證明局部甚至全身炎癥反應參與了RAU的病理生理過程。而這也能夠解釋本研究所觀察到的結果。

在RAU患者中,我們進一步進行了多因素Logistic回歸評價了唾液IL-8水平與RAU活動性的獨立相關性,結果顯示,在排除了年齡、性別、BMI及吸煙狀態(tài)等混雜因素后,唾液IL-8水平是預測RAU活動性的獨立危險因子,證明了唾液IL-8可以作為預測RAU發(fā)病及其活動性的重要的生物標記物。

本研究主要局限在實驗設計方面,該小樣本、單中心的橫斷面研究得出的結論在應用于臨床實踐前,尚需大樣本、多中心前瞻性研究來證實。

綜上所述,RAU患者潰瘍期唾液IL-8水平顯著升高,唾液IL-8水平是預測RAU活動性的獨立危險因子。