孔維萍 唐的木 汪凱凡 李愛萍 孫 駿

過敏性皮膚病又稱變態(tài)反應(yīng)性皮膚病，是指在接觸致敏物質(zhì)后引起皮膚過敏反應(yīng)或變態(tài)反應(yīng)的疾病，可伴有全身癥狀，甚至危及生命，嚴(yán)重影響著患者的生活質(zhì)量。脫敏治療可能是改變過敏性疾病自然進(jìn)程的唯一方法[1-2]，因此，對患者過敏原進(jìn)行檢測并去除病因成為臨床治療過敏性疾病的有效手段?；诖?，本文回顧性分析我院收治的1 579例過敏性皮膚病患者體外血清特異性IgE(specific immunoglobulin,sIgE)及總免疫球蛋白E(immunoglobulin E, IgE)檢測結(jié)果資料，統(tǒng)計(jì)分析過敏原的種類，及其在患者年齡、不同季節(jié)的分布情況，為本地區(qū)過敏性皮膚病患者的臨床治療和預(yù)防提供科學(xué)依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年1月至2017年10月在安徽省馬鞍山市人民醫(yī)院門診及住院的1 579例過敏性皮膚病患者為研究對象，其中男性615例，女性964例，年齡1～88歲，平均(35.7±17.9)歲。病程3～26 d，平均(16.1±6.9)d。納入標(biāo)準(zhǔn)：①所有患者均符合《皮膚性病學(xué)》[1]過敏性皮膚病診斷標(biāo)準(zhǔn)，均為馬鞍山市區(qū)常住居民，近期無外出史；②檢測前2周內(nèi)無糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑及抗組胺藥物應(yīng)用史；③均排除由于壓力、寒冷、日曬及運(yùn)動等物理因素所引起者。

1.2 研究方法 所有患者均采用抗原條帶法檢測總IgE(分級定性檢測)，免疫印跡法檢測患者血清sIgE(定量檢測)。比較患者不同年齡層及不同發(fā)病季節(jié)過敏原的分布特點(diǎn)。

1.2.1 過敏原檢測方法 采用德國MEDIWSS公司Allergy Screen過敏原檢測系統(tǒng)(免疫印跡法)定量檢測患者血清sIgE；使用總IgE抗體的抗原條帶，對總IgE進(jìn)行分級定性檢測。sIgE和總IgE檢測操作：分離患者血清，室溫(20～22℃)下用1∶25稀釋清洗液濕潤檢測條反應(yīng)槽中的硝酸纖維素膜。每槽上加入250 μL血清，混勻儀(30振/分)上避光孵育45 min，使血清中的sIgE抗體與相應(yīng)的抗原結(jié)合并吸附于硝酸纖維素膜表面，清洗后除去未結(jié)合的抗體。每槽加入250 μL生物素化的抗人IgE抗體，同上孵育45 min，使其與上一步反應(yīng)中結(jié)合吸附的血清sIgE結(jié)合，繼續(xù)沖洗，除去未結(jié)合的生物素化的抗人IgE抗體。每槽加入250 μL堿性磷酸酶標(biāo)記的鏈霉親和素，孵育20 min，洗滌。再每槽加入250 μL BCIP/NBT底物，孵育20 min，使其中吸附的堿性磷酸酶發(fā)生顏色反應(yīng)，顏色的深淺與血清標(biāo)本中的sIgE含量成正比。最后用流水沖洗，終止反應(yīng)，風(fēng)干干燥。使用MEDIWSS公司BLOTrix Reader C1 掃描儀掃描檢測條，讀取結(jié)果，從而確定過敏原及總IgE水平。

1.2.2 觀察指標(biāo) 觀察統(tǒng)計(jì)患者血清總lgE水平分級及sIgE分布；過敏原種類(分為吸入性和食入性兩部分)。

1.2.3 各指標(biāo)評判標(biāo)準(zhǔn) sIgE定量評判標(biāo)準(zhǔn)為MEDIWSS公司的所提供的配套標(biāo)準(zhǔn)體系，sIgE定量水平分為7級：0級(<0.35 IU/mL)；1級(0.35 ～0.75 IU/mL)為低；2級(0.75 ～3.5 IU/mL)為增加；3級(3.5 ～17.5 IU/mL)為顯著增加；4級(17.5 ～50 IU/mL)為高；5級(50 ～100 IU/mL)為較高；6級(>100 IU/mL)為極高。0級視為sIgE陰性(-)、≥1級視為sIgE陽性(+)。總IgE定性則依據(jù)抗原條帶顯示?？侷gE定性分為3級:總IgE<100 IU/mL、總IgE 在100～200 IU/mL、總IgE>200 IU/mL。陽性率=陽性數(shù)/總數(shù)×100%。

2 結(jié)果

2.1 患者總IgE水平分級及sIgE檢測結(jié)果 1 579例患者中， 總IgE>200 IU/mL的患者均多余另外兩個等級的患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。sIgE陽性患者共718例(45.47%)。其中總IgE<100 IU/mL的有147例(9.30%)、總IgE為100～200 IU/mL的有58例(3.67%)、總IgE>200 IU/mL的有513例(32.49%)。詳見表1。

表1 患者總IgE水平分級及sIgE檢測結(jié)果

2.2 sIgE陽性患者吸入性與食入性過敏原分布 718例sIgE陽性患者中，僅有吸入物sIgE陽性的患者385例(24.38%)，僅有食入物sIgE陽性的患者100例(6.33%)，吸入和食入物sIgE均出現(xiàn)陽性的患者233

例(14.76%)。有吸入性過敏原者共618例，其中戶塵螨sIgE陽性率最高，達(dá)26.60%；貓毛皮屑陽性率最低為2.09%。有食入性過敏原者共333例，其中蝦sIgE陽性率最高，達(dá)6.40%；貝類陽性率最低為1.46%。詳見表2。

表2 718例sIgE陽性患者吸入性與食入性過敏原分布 [例(%)]

2.3 sIgE陽性患者的年齡及過敏原分布 1 579例患者中，4個年齡組sIgE(+)患者比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=23.411，P<0.001)。年齡≤10歲組中sIgE(+)檢出率最高為65.41%(與其他3組合并資料相比：χ2=23.293，P<0.001)，其余各年齡組sIgE(+)檢出率相似(P>0.05)。詳見表3。各年齡組吸入物IgE陽性率均高于食入物IgE，且戶塵螨為各年齡段的易致敏物質(zhì)。詳見表4。

表3 1579例患者各年齡組sIgE檢測結(jié)果[例(%)]

表4 sIgE陽性患者各年齡層組的食入物、吸入物IgE(+)及易致敏物分布

2.4 不同季節(jié)發(fā)病患者sIgE(+)分布及易致敏物質(zhì) 每個季節(jié)發(fā)病患者其吸入物IgE(+)者均高于食入物物IgE(+)者。其中秋季食入物IgE(+)和吸入物IgE(+)例數(shù)最高。戶塵螨為每個季節(jié)易致敏物質(zhì)。詳見表5。

表5 不同季節(jié)發(fā)病患者食入物、吸入物IgE(+)及易致敏物分布

3 討論

過敏性皮膚病是皮膚病中的常見病、多發(fā)病。目前，診斷過敏原的常用方法包括皮膚點(diǎn)刺實(shí)驗(yàn)、皮內(nèi)實(shí)驗(yàn)、皮膚斑貼試驗(yàn)、體內(nèi)激發(fā)試驗(yàn)等，但該類方法存在抗原標(biāo)準(zhǔn)化困難，且試驗(yàn)也存在一定的危險(xiǎn)因素，不宜用于急性期患者，且具有易受藥物影響、假陽性率高等諸多缺點(diǎn)[3-5]?，F(xiàn)今，體外血清特異性IgE的檢測已廣泛使用，并被認(rèn)為是一種安全可靠的過敏原檢測方法，其靈敏度及特異性均較高[6]。

分子生物學(xué)研究[7-8]認(rèn)為，患者接觸致敏原后，可刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性IgE抗體，此后，特異性IgE抗體與肥大細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞表面高親和力IgE受體結(jié)合；在患者再次接觸過敏原等多因素作用下，釋放大量活性物質(zhì)，產(chǎn)生皮膚、黏膜等的一系列免疫反應(yīng)。臨床中可通過體外檢測患者血清中的特異性IgE抗體，查找導(dǎo)致患者發(fā)病的可疑變應(yīng)原。

筆者通過對本地區(qū)1 579例過敏性皮膚病患者進(jìn)行體外血清特異性IgE檢測發(fā)現(xiàn)， 45.47%的患者存在不同數(shù)量、類別，不同致敏途徑的sIgE抗體陽性。718例陽性患者中，420例(26.60%)檢出抗戶塵螨sIgE，且在不同年齡、不同季節(jié)的檢測中戶塵螨均為本地區(qū)過敏性皮膚病患者的易致敏物質(zhì)之一，遠(yuǎn)高于檢測中的其他18種。同時718例陽性患者中，618例(86.07%)患者檢出吸入物來源的sIgE抗體，333例(46.38%)患者檢出食入物來源的sIgE抗體，其中223例(32.45%)患者均有檢出吸入物、食入物來源的sIgE抗體；僅有100例(13.93%)患者單純檢出食入物來源sIgE抗體。且在不同年齡、不同季節(jié)吸入物的檢出率遠(yuǎn)高于食入物的檢出率。

吸入物中主要過敏原為戶塵螨、霉菌混合物、狗毛皮屑，戶塵螨排在首位和安徽省其他地區(qū)報(bào)道[9-10]一致，霉菌混合物及狗毛皮屑檢測陽性率高于安徽省其他地區(qū)報(bào)道，可能與本市在安徽省南部，氣候更加溫暖、潮濕，易給霉菌生長提供滋生的條件，另外本市小區(qū)內(nèi)寵物狗多見，這些提示臨床醫(yī)生要提醒患者注意居家環(huán)境，保持清潔衛(wèi)生，經(jīng)常開窗通風(fēng)，勤曬被褥，避免與寵物接觸。食入物中主要過敏原為蝦、腰果、牛奶和安徽省其他地區(qū)報(bào)道略有不同，這可能和地區(qū)飲食習(xí)慣差異相關(guān)。

≤10歲患者sIgE陽性檢出率明顯高于其他年齡組，其他年齡組的sIgE陽性率基本相當(dāng)，這可能與低齡患者體內(nèi)免疫系統(tǒng)尚不穩(wěn)定，對外環(huán)境穩(wěn)定性差。隨著機(jī)體自身免疫系統(tǒng)的完善，以及對外環(huán)境的適應(yīng)，過敏物質(zhì)亦逐漸減少。

本組資料中，以夏秋季(4～9月)sIgE陽性率高，這可能與4～9月氣溫回升，屋外活動增多，接觸致敏物質(zhì)增多相關(guān)。且各季節(jié)易致敏物質(zhì)略有差異，與各季節(jié)外界環(huán)境存在自然差異相關(guān)。

另外，本組資料顯示，總IgE分級水平較高的患者相對總IgE較低的患者sIgE陽性檢出率更高，提示過敏的高危險(xiǎn)性。其中有589例過敏性皮膚病患者血清總IgE<100 IU/mL，這可能是由于病態(tài)反應(yīng)暫時耗竭了抗體，而導(dǎo)致血清總IgE水平不高[11]。同時本組資料，816例19項(xiàng)sIgE檢測均為陰性的患者中，有多達(dá)333例(38.68%)的患者總IgE>200 IU/mL，可能此類患者的致敏原并未包含在本次研究使用的變應(yīng)原組合中；提示未檢出sIgE的患者如有較高的總IgE水平則仍存在較高的過敏風(fēng)險(xiǎn)，有助于為sIgE陰性患者進(jìn)一步檢測提供指導(dǎo)。

綜上所述，本地區(qū)主要過敏原以收入物居多，戶塵螨、霉菌混合物及狗毛皮屑等，主要致敏原。