法系大白母豬PRRS免疫抗體消長(zhǎng)規(guī)律與臨床實(shí)踐

許光勇，王朝軍，周海深，徐 利，盧紀(jì)和，麻文靜

（1．北京養(yǎng)豬育種中心，北京 100194；2．中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，北京 100193）

豬繁殖與呼吸綜合征（Porcine re productive and respiratory syndrome，PRRS），又稱“豬藍(lán)耳病”，是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒（Porcine reprodu ctive and respiratory syndrome virus，PRRSV）引起的一種伴有繁殖障礙及呼吸癥狀的傳染病，其臨床上常見妊娠母豬中后期流產(chǎn)、早產(chǎn)，窩均死胎、木乃伊胎和弱仔數(shù)量明顯增多，商品豬伴隨咳嗽、喘及呼吸困難等癥狀[1-2]。有關(guān)PRRS，1987年在美國(guó)出現(xiàn)，2006年在中國(guó)暴發(fā)，迄今仍是危害中國(guó)養(yǎng)豬業(yè)最嚴(yán)重的傳染病之一。由于PRRSV屬RNA病毒，其極易變異重組的特征，以及國(guó)內(nèi)疫苗的不當(dāng)使用，導(dǎo)致出現(xiàn)的PRRSV種類越來越復(fù)雜，防控工作也越來越困難。因此，本試驗(yàn)就陰性法系純種大白豬的PRRS免疫抗體消長(zhǎng)規(guī)律進(jìn)行探討，該結(jié)果對(duì)臨床防控PRRS具有應(yīng)用價(jià)值。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

50頭法系純種大白母豬來自于新建豬場(chǎng)的后備種豬群，檢測(cè)結(jié)果顯示，該群PRRS和豬偽狂犬gE抗體均為陰性，豬瘟病原陰性。由于主動(dòng)和被動(dòng)淘汰，試驗(yàn)結(jié)束時(shí)剩余33頭。

1.2 方法

全部后備種豬肌注經(jīng)典株P(guān)RRS減毒活疫苗1頭份，母豬間隔40周再次免疫1頭份。

首免后3周、6周、10周、20周、27周、33周、39周，43周（二免后3周）、59周（二免后19周）、70周（二免后30周）、85周（二免后45周）前腔靜脈采血，分離血清并于-20℃冰箱保存，ELISA法檢測(cè)PRRS抗體。

1.3 結(jié)果判定

PRRS X3抗體檢測(cè)試劑盒，美國(guó)IDEXX公司，批號(hào)J661。參照試劑盒說明書進(jìn)行操作，如果S/P值低于0．40，樣品判定為PRRSV抗體陰性；如果S/P值大于或等于0．40，樣品判定為PRRSV抗體陽性。S/P值=（樣本A650－陰性對(duì)照平均值）/（陽性對(duì)照平均值－陰性對(duì)照平均值），CV值又稱離散度=（標(biāo)準(zhǔn)偏差/樣本平均值）×100%，抗體陽性率=（S/P值大于或等于0．4的樣本數(shù)/總樣本數(shù)）×100%。

2 結(jié)果與分析

整個(gè)試驗(yàn)時(shí)間為2016年4月至2017年12月，試驗(yàn)開始有50頭法系純種大白母豬參與，試驗(yàn)結(jié)束時(shí)剩余33頭，連續(xù)跟蹤采集血液樣品11次，ELISA法檢測(cè)PRRS抗體，試驗(yàn)結(jié)果由33頭有效數(shù)據(jù)整理而得，其S/P值、離散度和抗體陽性率見圖1、圖2。

由圖1結(jié)果可知，法系純種大白豬在首次免疫PRRS活疫苗后，S/P均值隨時(shí)間推移逐漸下降，但加強(qiáng)免疫后會(huì)出現(xiàn)再一次升高，觀察到S/P值的峰值為1．61，出現(xiàn)于首免后3周。離散度隨時(shí)間逐漸升高，并于首免后27周達(dá)到峰值93．10%，隨后逐漸下降，維持在59．65%～85．16%間，由結(jié)果可以看出，再次免疫并不能長(zhǎng)期地降低離散度水平。

由圖2結(jié)果可知，首次免疫PRRS活疫苗后，抗體陽性率能夠達(dá)100%，且高陽性率維持了至少10周時(shí)間，然后其值隨時(shí)間逐漸降低，再次免疫會(huì)暫時(shí)提高抗體陽性率。S/P值處于0．4～2．0區(qū)間個(gè)體所占比例在首次免疫后10周達(dá)到了96．97%，說明法系純種大白母豬對(duì)PRRS活疫苗產(chǎn)生了良好的免疫應(yīng)答。

3 討論

陰性法系純種大白母豬在首次免疫PRRS活疫苗后，抗體S/P均值和陽性率均隨時(shí)間推移逐漸下降，再次加強(qiáng)免疫時(shí)會(huì)出現(xiàn)再一次上升的現(xiàn)象，本結(jié)果與施開創(chuàng)等[3]報(bào)道的接種PRRS活疫苗能夠提高抗體水平結(jié)果一致。離散度或CV值的變化趨勢(shì)與前兩者相反，其值隨時(shí)間逐漸升高，且長(zhǎng)期維持在較高水平。從圖中結(jié)果觀察到，S/P均值在首次免疫 3周時(shí)為 1．61，6周為 1．14，隨后逐漸下降，在39周時(shí)降到0．40，由此得知，S/P值達(dá)到峰值時(shí)間應(yīng)該是在首次免疫6周之前的時(shí)間，有可能是3周之前；再免后S/P均值會(huì)出現(xiàn)升高，但到70周（再免后30周）已經(jīng)降至0．18?？贵w陽性率在首免后10周前，保持在96．97%以上，然后隨時(shí)間推移逐漸下降，在39周時(shí)降到36．36%；再免后抗體陽性率會(huì)出現(xiàn)升高，但到59周（再免后19周）和70周（再免后30周）已經(jīng)分別降至33．33%和3．03%，由此得知，抗體陽性率在后期下降非常迅速。離散度隨時(shí)間推移其值逐漸升高，并于首免后27周達(dá)到峰值，隨后開始降低，但仍維持在高水平范圍，只有在首免后10周之前處于40%以內(nèi)，其他時(shí)間均處于60%以上，由此得知，陰性法系純種大白母豬在免疫PRRS活疫苗后抗體保持較好的整齊度時(shí)間并不會(huì)很長(zhǎng)。免疫后S/P值個(gè)體分布在0．4～2．0區(qū)間內(nèi)較為理想，該區(qū)間值代表免疫后產(chǎn)生了良好的抗體，由結(jié)果得知，在首免后20周之前，S/P值個(gè)體分布在0．4～2．0所占比例在72%以上，隨后S/P值低于0．4的個(gè)體越來越多，在70周（再免后30周）抗體陰性率達(dá)到了96．97%；雖然在首免后3周和再免后3周均出現(xiàn)了3．03%的S/P值大于2．5個(gè)體，但很快就下降了，這應(yīng)該是個(gè)體差異所導(dǎo)致。

圖1 大白母豬PRRS免疫抗體S/P均值及CV值變化

圖2 大白母豬PRRS免疫抗體陽性率及S/P值區(qū)間分布百分比

綜上，S/P均值降至0．4時(shí)間為免疫后39周，抗體陽性率于免疫后33周為48．48%，認(rèn)為法系純種大白母豬首免后33周之前抗體應(yīng)該是有效的。85周抗體陽性率為0%，說明再免抗體陽性持續(xù)時(shí)間不超過45周。但如果要使個(gè)體離散度更加均勻，應(yīng)該縮短免疫間隔。因此，養(yǎng)豬生產(chǎn)中若需長(zhǎng)期維持豬群處于陽性穩(wěn)定狀態(tài)，認(rèn)為法系純種大白母豬應(yīng)該2年免疫3次較為合理。

4 結(jié)論

陰性法系純種大白母豬免疫PRRS活疫苗，抗體陽性率和S/P值隨時(shí)間推移逐漸下降，再免能暫時(shí)提高兩者水平，離散度隨時(shí)間先升高后降低，抗體持續(xù)有效時(shí)間大概為33周。