魯美鈺,仲維蘭,司春楓,劉青花,關(guān)淑貞,楊小平,徐茂磊

(濱州醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，山東 煙臺(tái) 264003)

1971年,Folkman教授提出了“腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移依賴于新生血管生成”的理論，該理論的出現(xiàn)為抗腫瘤血管生成藥物提供了新的研究方向和理論基礎(chǔ)。眾所周知，腫瘤在發(fā)生、發(fā)展的過程中會(huì)形成大量的新生血管，這些新生的血管為腫瘤的生長(zhǎng)提供其所需要的營(yíng)養(yǎng)和水分，同時(shí)向遠(yuǎn)處擴(kuò)散腫瘤細(xì)胞，在體內(nèi)不同部位形成新的轉(zhuǎn)移灶。Hanahan等研究發(fā)現(xiàn)，在腫瘤血管生成的過程中會(huì)受到“血管生成開關(guān)”的調(diào)節(jié)[1]，血管生成的增強(qiáng)因子或抑制因子會(huì)發(fā)生相應(yīng)的變化，當(dāng)“開關(guān)”處于開放狀態(tài)時(shí)，形成大量的新生血管。近年來，抗腫瘤血管生成研究已從早期的非特異性栓塞、切斷腫瘤血管發(fā)展到對(duì)腫瘤血管進(jìn)行特異性、靶向性阻斷的新高度。

1 腫瘤血管生成的機(jī)制

在腫瘤持續(xù)生長(zhǎng)的過程中，當(dāng)腫瘤體積達(dá)到一定程度后,腫瘤持續(xù)生長(zhǎng)所需要的營(yíng)養(yǎng)成分來源于新生的腫瘤血管。血管新生主要包括以下幾個(gè)方面：(1)缺氧、缺血等刺激性因子擴(kuò)張毛細(xì)血管，使毛細(xì)血管的通透性大大增加。(2)進(jìn)而纖維蛋白滲出，抑制血管生長(zhǎng)等基質(zhì)發(fā)生相應(yīng)變化。(3)同時(shí)膠原酶被激活，細(xì)胞基底膜破壞，細(xì)胞外的基質(zhì)進(jìn)行重新塑形。(4)血管生成因子使血管內(nèi)皮細(xì)胞增生。(5)新生成的血管內(nèi)皮細(xì)胞排列成管狀結(jié)構(gòu)，最后形成新的腫瘤血管。目前發(fā)現(xiàn)腫瘤新生血管主要有芽生式血管、套疊式血管、馬賽克血管、充塞式血管以及血管生成擬態(tài)等幾種不同生成方式，其生成機(jī)制也各不相同。

1.1 芽生式血管

最早發(fā)現(xiàn)的腫瘤血管新生方式是芽生式血管生成。在血管生成因子(angiogenic factor)作用下,處于靜息狀態(tài)的血管內(nèi)皮細(xì)胞(vascular endothelial cell)降解細(xì)胞基底膜，然后侵入到細(xì)胞外基質(zhì)中，逐漸形成管腔狀結(jié)構(gòu)，最后形成血管。上述血管新生的過程中起最重要作用的因子為血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子 (vascular endothelial growth factor，VEGF)。研究表明，VEGF可以擴(kuò)張毛細(xì)血管，增大細(xì)胞膜的通透性，進(jìn)而使纖維蛋白原從血管中滲出，內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生遷移，最后形成管狀樣結(jié)構(gòu)。近些年研究發(fā)現(xiàn)VEGF 家族由VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D 及胎盤生長(zhǎng)因子(placental growth factor,PLGF)等構(gòu)成，VEGF-A是VEGF家族中重要組成部分，通過VEGFR-2 信號(hào)傳導(dǎo)作用于內(nèi)皮細(xì)胞，然后刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞的生成，當(dāng)VEGFR-2 缺乏時(shí)，VEGF 信號(hào)傳導(dǎo)因受影響，使血管生成受到一定的限制。同時(shí)，VEGF還可誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞的增殖，增強(qiáng)纖溶酶原和金屬蛋白酶的活性，加速細(xì)胞外基質(zhì)及其它物質(zhì)的降解，內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生遷移[2]。

1.2 套疊式血管

血管壁向毛細(xì)管腔內(nèi)凹陷，然后逐步的靠近、接觸，進(jìn)而融合。血管融合處管壁細(xì)胞膜逐漸變薄，演變成小孔，孔狀結(jié)構(gòu)逐漸增大、融合，形成管腔樣通道，該血管新生的方式為套疊式生長(zhǎng)。套疊式血管生成的特點(diǎn)是在已有的血管管腔內(nèi)形成大量的跨血管組織微柱，該過程形成迅速，在幾分鐘內(nèi)就可完成。

1.3 馬賽克血管

顯微鏡下觀察腫瘤血管壁上排列著血管內(nèi)皮細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞，兩者構(gòu)成腫瘤的血管管腔，在生成的腫瘤邊緣部位，腫瘤細(xì)胞群被一團(tuán)密布的血管網(wǎng)包圍，稱為馬賽克血管[3]。腫瘤細(xì)胞侵入血管管腔并暫時(shí)停留在血管壁上，激活促腫瘤血管生成因子，使腫瘤血管基底膜降解加速，以利于腫瘤細(xì)胞穿入以增加馬賽克血管的數(shù)量。

1.4 充塞式血管

在腫瘤形成的早期階段,腫瘤血管保持正常的形態(tài)。但隨著腫瘤的持續(xù)生長(zhǎng)，腫瘤內(nèi)部的血管組織被腫瘤細(xì)胞逐步地包圍進(jìn)而填充，該處血管逐漸退化，由于腫瘤血管的退化，腫瘤內(nèi)部發(fā)生缺氧,促進(jìn)VEGF的表達(dá)，在腫瘤邊緣部位形成新的血管，此血管生成方式稱為充塞式血管。VEGF、血管緊張素等都在該血管生成方式的過程中起了重要作用。研究證實(shí)腫瘤邊緣新生血管很難被抗血管生成藥物清除。

1.5 血管生成擬態(tài)

侵襲性生長(zhǎng)的惡性腫瘤，在沒有內(nèi)皮細(xì)胞的參與下，腫瘤細(xì)胞發(fā)生相應(yīng)變化，并進(jìn)一步通過自身的變形形成管腔狀結(jié)構(gòu)，該血管生成方式與傳統(tǒng)腫瘤血管生成方式完全不同，它本身并不依附于血管內(nèi)皮細(xì)胞，腫瘤與血液可直接接觸，是一種全新的腫瘤血管生成方式，稱之為“血管生成擬態(tài)”[4]。

2 抗血管生成藥物分類及其作用機(jī)制

2.1 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子抑制劑

2.1.1VEGF/VEGFR的分子靶向藥物 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子是指腫瘤來源的血管生成促進(jìn)因子，研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤細(xì)胞和腫瘤的相關(guān)間質(zhì)細(xì)胞均可分泌該類生長(zhǎng)因子，其作用為促進(jìn)血管新生和炎癥的形成。

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子抑制劑能夠消除血管生成促進(jìn)因子，抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞的生成和轉(zhuǎn)移，減緩基底膜降解。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子抑制劑用于臨床的時(shí)間并不長(zhǎng)，但大量研究結(jié)果表明，該類藥物有明顯的治療效果。貝伐單抗(avastin)是美國(guó)食品及藥物管理局批準(zhǔn)的第一個(gè)抗腫瘤血管生成的人源化單克隆抗體，可與VEGF-A結(jié)合，減少血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子與受體的結(jié)合，抑制血管的生長(zhǎng)[5]。阿柏西普(zaltrap)作為血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的受體，可與血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子-A、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子-B和PLGF等靶點(diǎn)結(jié)合，已批準(zhǔn)其用于結(jié)腸癌、直腸癌和腎細(xì)胞癌的臨床治療[6]。以上兩種藥物均可治療糖尿病性黃斑水腫，最近研究顯示,若黃斑水腫患者的視力損失較輕微,選擇阿柏西普的治療效果優(yōu)于貝伐單抗。

2.1.2內(nèi)源性血管生成抑制劑 內(nèi)源性血管生成抑制劑可直接抑制腫瘤血管的生成。血管抑素(angiostatin)能抑制腫瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)，降低血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的活性，抑制腫瘤血管新生，從而減緩腫瘤的生長(zhǎng)[7-8]。血管內(nèi)皮抑素(endostatin)是一種常見的內(nèi)源性抗血管生成抑制劑，其抗腫瘤效果比血管抑素顯著。其作用機(jī)制是競(jìng)爭(zhēng)纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子，抑制內(nèi)皮細(xì)胞增殖，從而減緩多種實(shí)體腫瘤原發(fā)灶和轉(zhuǎn)移灶的生長(zhǎng)轉(zhuǎn)移[9]，研究表明在膀胱癌中顯示了良好的抗腫瘤作用。重組人血管內(nèi)皮抑素(恩度)作用于多條細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)的通路，其作用機(jī)制為降低腫瘤血管生長(zhǎng)相關(guān)蛋白，抑制腫瘤新生淋巴管的生成，對(duì)非小細(xì)胞肺癌的治療效果甚佳[10]。最新研究顯示，重組人血管內(nèi)皮抑素對(duì)中晚期宮頸癌患者也有較好的療效[11]。

2.2 小分子受體酪氨酸激酶抑制劑

血管內(nèi)皮細(xì)胞上的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體(vascular endothelial growth factor receptor,VEGFR)屬于酪氨酸激酶(tyrosine kinase,TK)依賴性受體，研究表明降低TK的活性可有效抑制腫瘤血管的生成。酪氨酸激酶受體抑制劑(tyrosine kinase inhibitors,TKI)通過細(xì)胞膜進(jìn)行擴(kuò)散，競(jìng)爭(zhēng)細(xì)胞內(nèi)受體酪氨酸激酶結(jié)構(gòu)域ATP結(jié)合的位點(diǎn)，從而抑制相應(yīng)受體的激活，進(jìn)而抑制腫瘤血管新生。

索拉非尼(sorafenib)是一種以VEGFR、P38、Raf-1、c-KIT、PDGFR-β和Flt-3為靶點(diǎn)的多激酶抑制劑，對(duì)腫瘤血管的新生具有明顯的抑制作用，用于無法切除的肝細(xì)胞癌和晚期腎細(xì)胞癌患者的臨床應(yīng)用，治療效果顯著。舒尼替尼(sunitinib)是多種酪氨酸激酶抑制劑，主要抑制CSF-1R、 VEGFRs、PDGFR-β、RET和PDGFR-α[12-13],對(duì)于胃腸道間充質(zhì)瘤、轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌和晚期胰腺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤具有良好的臨床治療效果[14]。

2.3 抑制整合蛋白分子藥物

腫瘤細(xì)胞在侵襲過程中，內(nèi)皮細(xì)胞與基底膜的相互作用是通過整合素介導(dǎo)的。整合素(integrin)屬于以α、β異二聚體形式表達(dá)的跨膜糖蛋白家族，其主要功能是與相應(yīng)的配體結(jié)合，促進(jìn)細(xì)胞與細(xì)胞、基底膜的黏附。血管內(nèi)皮細(xì)胞表面的整合素可以與細(xì)胞外基質(zhì)某位點(diǎn)相結(jié)合，從而加快內(nèi)皮細(xì)胞的遷移和腫瘤血管的形成。在黑色素瘤和神經(jīng)膠質(zhì)瘤的研究中，發(fā)現(xiàn)整合素αvβ3可以黏附相應(yīng)的轉(zhuǎn)移受體，同時(shí)還可降解細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix，ECM),促進(jìn)腫瘤血管新生。整合素拮抗劑西侖吉肽(cilengitide)，可被整合素識(shí)別并進(jìn)行相應(yīng)結(jié)合，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞發(fā)生凋亡，抑制腫瘤血管新生，從而減緩腫瘤的生長(zhǎng)，目前正處于對(duì)惡性膠質(zhì)瘤Ⅲ期的臨床試驗(yàn)階段[15]。

2.4 化療藥物

近年來研究發(fā)現(xiàn)，化療藥物不僅具有抑制腫瘤細(xì)胞增殖的作用,同時(shí)也可抑制腫瘤血管新生。紫杉醇是臨床常用的化療藥物，其作用機(jī)制是在細(xì)胞分裂的過程中使細(xì)胞停滯在G2/M期，細(xì)胞發(fā)生凋亡，從而有效的抑制腫瘤形成過程中新生血管的生成[16]。臨床上廣泛應(yīng)用于乳腺癌、肺癌、卵巢癌及食管癌等惡性腫瘤的中晚期治療。環(huán)磷酰胺進(jìn)入體內(nèi)后，可對(duì)腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生強(qiáng)烈的細(xì)胞毒作用，同時(shí)對(duì)免疫系統(tǒng)也有顯著的抑制作用，從而抑制新生血管的生成，對(duì)惡性淋巴瘤有一定的療效[17]。

2.5 非特異性血管生成抑制劑

其他一些藥物盡管他們抑制血管生成的機(jī)制目前還未明確，但通過體內(nèi)外研究已證實(shí)其具有抗血管生成的作用。沙利度胺(thalidomide)因其對(duì)胎兒產(chǎn)生嚴(yán)重致畸作用而被廣泛關(guān)注。近年來研究發(fā)現(xiàn)，沙利度胺可抑制血管新生。其作用機(jī)制是通過抑制VEGF和成纖維細(xì)胞因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)的分泌，從而抑制血管新生[18]。此外，羧基氨基咪唑、丙戊酸、依澤替米貝等也可抑制血管新生，還有正在臨床實(shí)驗(yàn)的白細(xì)胞介素-12、舒拉明鈉、角鯊胺等都具有抗腫瘤血管生成的作用。

2.6 基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑

基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMPs)是參與細(xì)胞外基質(zhì)重構(gòu)的最重要的蛋白水解酶。研究表明，MMPs可以使血管的基底膜發(fā)生重構(gòu)，使細(xì)胞外基質(zhì)和血管基底膜同時(shí)發(fā)生降解，進(jìn)而釋放血管生成調(diào)節(jié)因子，進(jìn)而為腫瘤血管提供足夠的生長(zhǎng)空間[19]。近年來，人們發(fā)現(xiàn)MMPs家族中的明膠酶A和明膠酶B在腫瘤的轉(zhuǎn)移中起重要作用。Fernandez-Garcia 等[20]通過免疫組織化學(xué)法檢測(cè)乳腺癌中的纖連蛋白及MMP-9表達(dá)情況發(fā)現(xiàn)，乳腺癌細(xì)胞產(chǎn)生的纖連蛋白與乳腺癌組織中單核細(xì)胞產(chǎn)生的MMP-9、MMP-11之間存在潛在的循環(huán)通路，進(jìn)而促進(jìn)了乳腺癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑(matrix metallo proteinase inhibitor,MMPI)可有效抑制乳腺癌的轉(zhuǎn)移。MMP-14的單抗dx-2400，其作用機(jī)制為通過抑制MMP-14，減少M(fèi)MP-2的含量，抑制腫瘤血管新生，從而減緩腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移灶的形成[21]。

2.7 疫苗

抗腫瘤血管生成疫苗是抗血管新生治療的一個(gè)新領(lǐng)域，抗腫瘤血管生成疫苗治療具有抗瘤譜廣、毒副作用低、藥物易于到達(dá)靶部位、不易產(chǎn)生耐藥性等優(yōu)點(diǎn)。抗腫瘤血管生成疫苗主要作用于血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子和血管內(nèi)皮細(xì)胞等靶點(diǎn)。在一項(xiàng)以VEGF為靶抗原的臨床研究中發(fā)現(xiàn)，用VEGF突變體聯(lián)合細(xì)菌為佐劑制備的CIGB-247疫苗在50例晚期實(shí)體瘤患者中展現(xiàn)出較明顯的療效，明顯延長(zhǎng)了生存期[22]。以人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)作為抗原制備的疫苗在臨床研究中對(duì)腦腫瘤和轉(zhuǎn)移性結(jié)腸癌也顯示了一定的治療效果，但是在治療性免疫中并不能完全控制腫瘤的生長(zhǎng)[23-26]。徐茂磊等[27-30]對(duì)HUVEC疫苗治療方案進(jìn)行了優(yōu)化，以HUVEC細(xì)胞為抗原，引入OK432等為佐劑制備得到佐劑優(yōu)化的新型HUVEC疫苗，該疫苗激發(fā)機(jī)體產(chǎn)生了更強(qiáng)的免疫應(yīng)答，在預(yù)防性及治療性免疫中對(duì)B16F10黑色素瘤、EAC乳腺癌以及小鼠H22肝細(xì)胞癌等腫瘤均顯示了較好的治療效果[31-36]。

3 結(jié)語

血管生成抑制劑通過降低某些血管活性因子的活性抑制內(nèi)皮細(xì)胞的增殖或遷移、改善腫瘤生長(zhǎng)微環(huán)境從而達(dá)到抗腫瘤的作用，該治療方法使藥物易于到達(dá)靶部位、不易產(chǎn)生耐藥性和對(duì)機(jī)體產(chǎn)生較低的毒副作用。抗腫瘤血管生成治療用于腫瘤臨床治療的時(shí)間并不很長(zhǎng)，但大量實(shí)驗(yàn)表明[37-40]，該治療方法具有較明確的治療效果及廣闊的應(yīng)用前景，與化療藥物聯(lián)用，具有協(xié)同增效的治療作用。但由于腫瘤血管生成機(jī)制相對(duì)復(fù)雜，易受腫瘤類型影響，基因組缺乏相對(duì)的穩(wěn)定性，也給治療帶來了一定困難，此外，抗腫瘤血管生成治療還具有雙重性的特點(diǎn)，一方面能夠有選擇性的作用于新生的腫瘤血管，另一方面對(duì)機(jī)體正常的血管也有一定的影響，因此如何進(jìn)一步開發(fā)特異性針對(duì)腫瘤血管的靶向藥物分子，提高抗腫瘤血管的治療效果，是抗血管生成靶向藥物今后研發(fā)的主要方向之一。此外，根據(jù)個(gè)體差異、腫瘤不同類型制定個(gè)體化治療策略，積極尋找新的靶點(diǎn)、研發(fā)新的藥物、多種藥物聯(lián)合應(yīng)用也還需要進(jìn)一步研究。

[1] HANAHAN D.Rethinking the war on cancer[J].Lancet,2014,383(9916):558-563.

[2] 孫文早,王亮,黃晶,鄒毅,等.血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子VEGF和轉(zhuǎn)錄因子YY1在垂體瘤中表達(dá)的意義[J].安徽醫(yī)藥,2015,19(9):1776-1777.

[3] WANG N,WU Y,ZENG N,et al.E2F1 Hinders Skin Wound Healing by Repressing Vascular Endothelial Growth Factor(VEGF) Expression,Neovascularization,and Macrophage Recruitment[J].PLoS One,2016,11(8):e0160411.

[4] KANDARAKOV OF,KALASHNIKOVA MV,VARTANIAN AA.Homogeneous and heterogeneous 3D melanoma models in vitro[J].Molekuliarnaia biologiia,2015,49(6):998-1001.

[5] 鄢文,靳文,王昂,宋維舒,等.貝伐單抗聯(lián)合培美曲塞維持治療對(duì)晚期非鱗狀非小細(xì)胞肺癌患者循環(huán)microRNA-19以及白細(xì)胞介素-27表達(dá)的影響[J].安徽醫(yī)藥,2015,19(9):1786-1790.

[6] MACDONALD DA，Martin J，Muthusamy KK，et al.Aflibercept exhibits VEGF binding stoichiometry distinct from bevaci zumab and does not support formation of immunelike complexes[J].Angiogenesis,2016,19(3):389-406.

[7] LIANG YZ,Zeng ZL,Hua LL,et al.Expression and significance of angiostatin,vascular endothelial growth factor and matrix metalloproteinase-9 in brain tissue of diabetic rats with ischemia reperfusion[J].Asian Pacific Journal of Tropical Medicine,2016,9(6):587-591.

[8] PAN JG,Zhou X,Han RF.Potent antitumour activity of the eombination of HSV-TK and endostatin armed oneolyfic adeno-associated virusfor bladder cancer in vitro and in vivo[J].Journal of Surgical Oncology,2012,105(3):249-257.

[9] WANG P,JIANG LZ.Recombinant human endostatin reduces hypertrophic scar formation in rabbit ear model through down-regulation of VEGF and TIMP-1[J].African Health Sciences,2016,16(2):542-553.

[10] SHANG LQ,ZHAO J,WANG W,et al.Inhibitory Effect of Endostar on Lymphangiogenesis in Non-small Cell LungCancer and Its Effect on Circulating Tumor Cells[J].Zhongguo Fei Ai Za Zhi,2014,17(10):722-729.

[11] HU W,FANG J,NIE J,et al.Efficacy and safety of extended use of platinum-based doublet chemotherapy plus endostatin in patients with advanced nonsmall cell lung cancer[J].Medicine (Baltimore),2016,95(28):e4183.

[12] GU W,WANG B,GAN H,et al.Prognostic value of pathological features of primary lesion in metastatic renal cell carcinoma treated with sorafenib[J].Future Oncol,2016,12(15):1783-1793.

[13] KYRIAKOPOULOS CE,CHITTORIA N,CHOUEIRI TK,et al.Outcome of patients with metastatic sarcomatoid renal cell carcinoma:results from the International Metastatic Renal Cell Carcinoma Database Consortium[J].Clinical Genitourinary Cancer,2015,13(2):e79-85.

[14] FUNAKOSHI T，LATIF A，GALSKY MD.Risk of hematologic toxicities in cancer patients treated with suni-tinib:a systematic review and meta-analysis[J].Cancer Treat Rev,2013,88(1):30-41.

[15] KHASRAW M,LEE A,MCCOWATT S,et al.Cilengitide with metronomic temozolomide,procarbazine,and standard radiotherapy in patients with glioblastoma and unmethylated MGMT gene promoter in ExCentric,an open-label phase II trial[J].Journal of neuro-oncology,2016,128(1):163-171.

[16] MATSUOKA A,MAEDA O,MIZUTANI T,et al.Bevacizumab Exacerbates Paclitaxel-Induced Neuropathy:A Retrospective Cohort Study[J].PloS One,2016,11(12):e0168707.

[17] ASATI DP,INGLE V,JOSHI D.Subcutaneous panniculitis-like T-cell lymphoma with macrophage activation syndrome treated by cyclosporine and prednisolone[J].Indian Dermatology Online Journal,2016,7(6):529-532.

[18] FENG YM,LIANG GJ,PAN B,et al.Notch pathway regulates female germ cell meiosis progression and early oogenesis events in fetal mouse[J].Cell Cycle,2014,13(5):782-791.

[19] 吳筠,蔡德鴻,陳宏,張樺,柯涓.血清MMP-9水平與IGT人群亞臨床動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系[J].安徽醫(yī)藥,2015,19(5):934-936.

[20] FERNANDEZ-GARCIA B,EIRO N,MARIN L,et al.Expression and prognostic significance of fibronectin and matrix metalloproteases in breast cancer metastasis[J].Histopathology,2014,64(4):512-522.

[21] CORA D,ASTANINA E,GIRAUDO E.Semaphorins in cardiovascular medicine[J].Trends in Molecular Medicine,2014,20(10):589-598.

[22] GAVILONDO JV,HERNANDEZ-BERNAL F,AYALA-AVILA M,et al.Specific active immunotherapy with a VEGF vaccine in patients with advanced solid tumors.Results of the CENTAURO antigen dose escalation phase I clinical trial[J].Vaccine,2014,32(19):2241-2250.

[23] BOTTCHER M,HOFMANN AD,BRUNS H,et al. Mesenchymal Stromal Cells Disrupt mTOR-Signaling and Aerobic Glycolysis During T-Cell Activation[J].Stem Cells,2016,34(2):516521.

[24] TANAKA M,TSUNO NH,FUJII T,et al.Human umbilical vein endothelial cell vaccine therapy in patients with recurrent glioblastoma[J].Cancer Science,2013,104(2):200-205.

[25] TANAKA M,YAMAGUCHI M,SHIOTA M,et al.Establishment of neutralizing rat monoclonal antibodies for fibroblast growth factor-2[J].Monoclonal Antibodies in Immunodiagnosis and Immunotherapy,2014,33(4):261-269.

[26] TANAKA M,MIYAJIMA M,HISHIOKA N,et al.Humic acid induces the endothelial nitric oxide synthase phosphorylation at Ser1177 and Thr495 Via Hsp90α and Hsp90β upregulation in human umbilical vein endothelial cells[J].Environmental Toxicology,2015,309(2):223-231.

[27] XU ML,XING Y,ZHOU L,et al.Improved efficacy of therapeutic vaccination with viable human umbilical vein endothelial cells against murine melanoma by introduction of OK432 as adjuvant[J].Tumor Biology,2013,34(3):1399-1408.

[28] XU ML,ZHOU L,YANG XP.Anti-tumor effects of OK432 optimized umbilical vein endothelial cell vaccine in murine breast cancer[J].Chinese Pharmacological Bulletin,2014,30(10):1430-1436.

[29] XU ML,ZHOU L,ZHAN P,et al.Enhanced antitumor efficacy by combination treatment with a human umbilical vein endothelial cell vaccine and a tumor cell lysate based vaccine[J].Tumor Biology,2013,34(5):3173-3182.

[30] XU ML,ZHOU L,ZHANG YL.A Fixed Human Umbilical Vein Endothelial Cell Vaccine With 2 Tandem Repeats of Microbial HSP70 Peptide Epitope 407-426 As Adjuvant for Therapy of Hepatoma in Mice[J].Journal of Immunotherapy,2015,38(7):276-284.

[31] PONT I,CALATAYUD-PASCUAL A,LPEZ-CASTELLANO A,et al.Anti-angiogenic drug loaded liposomes:Nanotherapy for early atherosclerotic lesions in mice [J].PloS One,2018,13(1):e0190540.

[32] MAJ E,FILIP-PSURSKA B,MILCZAREK M,et al.Vitamin D derivatives potentiate the anticancer and anti-angiogenic activity of tyrosine kinase inhibitors in combination with cytostatic drugs in an A549 non-small cell lung cancer model[J].International Journal of Oncology,2018,52(2):337-366.

[33] MU X,FANG C,ZHOU J,et al.Fusion with human lung cancer cells elongates the life span of human umbilical endothelial cells and enhances the anti-tumor immunity[J].Journal of Cancer Research and Clinical Oncology,2016,142(1):111-123.

[34] RENNER DN,MALO CS,JIN F,et al.Improved Treatment Efficacy of Antiangiogenic Therapy when Combined with Picornavirus Vaccination in the GL261 Glioma Model [J].Neurotherapeutics:the Journal of the American Society for Experimental Neuro Therapeutics,2016,13(1):226-236.

[35] PFANKUCHE VM,SPITZBARTH I,LAPP S,et al.Reduced angiogenic gene expression in morbillivirus-triggered oncolysis in a translational model for histiocytic sarcoma[J].Journal of Cellular and Molecular Medicine,2017,21 (4):816-830.

[36] FUJIWARA Y,OKADA K,OMORI T,et al.Multiple therapeutic peptide vaccines for patients with advanced gastric cancer[J].International Journal of Oncology,2017,50 (5):1655-1662.

[37] BORHANI K,BAMDAD T.Low Dose of Lenalidomide Enhances NK Cell Activity:Possible Implication as an Adjuvant [J].Iranian Journal of Immunology:IJI,2017,14 (2):151-158.

[38] LI L,YANG S,SONG L,et al.An Endogenous Vaccine Based on Fluorophores and Multivalent Immunoadjuvants Regulates Tumor Micro-Environment for Synergistic Photothermal and Immunotherapy[J].Theranostics,2018,8 (3):860-873.

[39] GORDY JT,LUO K,FRANCICA B,et al.Anti-IL-10-mediated Enhancement of Antitumor Efficacy of a Dendritic Cell-targeting MIP3α-gp100 Vaccine in the B16F10 Mouse Melanoma Model Is Dependent on Type I Interferons[J].Journal of Immunotherapy,2018，17(2)：237-239.

[40] INDRACCOLO S,WALENTA S.Uncovering Metabolic Effects of Anti-angiogenic Therapy in Tumors by Induced Metabolic Bioluminescence Imaging[J].Methods in Molecular Biology,2016,1464:175-184.