干擾素在生豬治療病毒性疾病中的應(yīng)用

董榕

（江蘇省射陽(yáng)縣畜牧獸醫(yī)站 224300）

干擾素作為一種廣譜抗病毒劑，屬于蛋白質(zhì)的一種，結(jié)合細(xì)胞對(duì)表層的受體作用，使其產(chǎn)生具備抗病毒行的蛋白，達(dá)到抑制乙肝病毒復(fù)制作用。經(jīng)過(guò)實(shí)踐證明，干擾素在豬病毒性疾病治療方面療效顯著，成為一種常見且效果理想的治療方法。同時(shí)，改變了對(duì)豬病毒性疾病不能根治只能預(yù)防的局面，為豬病毒性疾病治療提供便利條件。

1 干擾素概念分析與基因工程

1.1 干擾素概念

干擾素 (IFN) 是動(dòng)物淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等在誘導(dǎo)因子作用下分泌的一種具有調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能、抗病毒、抗腫瘤等多種生物活性的分泌性蛋白質(zhì)，是機(jī)體防御系統(tǒng)的重要組成部分。干擾素于 1957年被 Isaacs 和 Lindenmann 兩人發(fā)現(xiàn)，由于其獨(dú)特的功能，掀起了一場(chǎng)研究干擾素的熱潮。干擾素現(xiàn)已被廣泛應(yīng)用于獸醫(yī)臨床治療。干擾素分為白細(xì)胞型、成纖維細(xì)胞、淋巴細(xì)胞，不同的細(xì)胞有不同效果，需要結(jié)合疾病特點(diǎn)科學(xué)選擇。實(shí)踐證明，干擾度對(duì)豬病毒性疾病有良好的抑制效果，這也是生物科學(xué)一項(xiàng)巨大突破，成為自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的先進(jìn)生物醫(yī)藥制品。不同的干擾素在治療效果方面有著一定不同，抗病毒療效：生豬免疫系統(tǒng)中，I 型干擾素有助于調(diào)節(jié)病毒。生豬受到病毒親體后，I 型干擾素會(huì)發(fā)揮抑制病毒生長(zhǎng)效果，可以激發(fā)免疫細(xì)胞、抑制病毒復(fù)制、傳遞信號(hào)等，從而基因發(fā)揮作用并合成具有抗病毒的蛋白實(shí)現(xiàn)消滅病毒效果。抗菌效果：IFN-γ 可以減低轉(zhuǎn)鐵蛋白受體，減少細(xì)菌供鐵量。通過(guò)誘導(dǎo)后形成內(nèi)源性NO，達(dá)到殺菌效果?？辜纳x效果：干擾素有助于促進(jìn)巨噬細(xì)胞激發(fā)，借助誘導(dǎo)型-氧化氮合酶催化L-精氨酸生成NO 達(dá)到殺滅接種病原體作用。免疫效果：IFN-γ 是一種免疫調(diào)節(jié)因子，可以刺激中性粒細(xì)胞，擴(kuò)大吞噬功能達(dá)到免疫調(diào)節(jié)效果。

1.2 干擾素基因工程

一直以來(lái)，我國(guó)都致力于反病毒研究中，干擾素作為一種天然抗病毒蛋白質(zhì)得到了重視，成為現(xiàn)代反病毒主要藥物。動(dòng)物干擾素生產(chǎn)成本大、中間差異顯著、干擾素在動(dòng)物體內(nèi)不可長(zhǎng)時(shí)間穩(wěn)定，有待進(jìn)一步研究。同時(shí)，干擾素動(dòng)物分泌量少，因而選擇基因工程研究形式，制備高效的干擾素成為主要研究?jī)?nèi)容。目前，世界上多選擇酵母等真核生物細(xì)胞用于干擾素表達(dá)系統(tǒng)，基于理論上分析更靠近臨床動(dòng)物運(yùn)用。我國(guó)主要將大腸桿菌、乳酸菌等原核生物細(xì)胞用于干擾素表達(dá)系統(tǒng)與生物發(fā)酵器。

2 干擾素在豬治療病毒性疾病中的應(yīng)用

伴隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，科學(xué)家們開始嘗試在動(dòng)物中應(yīng)用干擾素進(jìn)行抗病毒治療研究，特別是豬養(yǎng)殖中。豬養(yǎng)殖過(guò)程，病毒性疾病作為重要影響因素，隨病毒性疾病類型逐漸增多、越來(lái)越復(fù)雜，研究出治療病毒性疾病的藥物已成為當(dāng)務(wù)之急。傳統(tǒng)生豬養(yǎng)殖中病毒性疾病治療沒有特定藥物，只能依靠預(yù)防，一旦發(fā)現(xiàn)將會(huì)以混合感染、繼發(fā)感染、高熱型出現(xiàn)，尤其是新生幼崽有較高的死亡率。由此可見，干擾素的科學(xué)運(yùn)用尤為關(guān)鍵。干擾素對(duì)豬病毒性疾病治療是依靠自身強(qiáng)大的特異性，即同種動(dòng)物形成的干擾素，可以對(duì)同種屬的動(dòng)物或細(xì)胞形成具有保護(hù)效果的作用，但對(duì)其種屬應(yīng)用效果較差。此外，干擾素適用性廣，藥物殘留少且無(wú)污染，未來(lái)發(fā)展空間巨大[1]。

目前，我國(guó)在干擾素上停留于研究階段，僅用于多見且治療困難的病毒性傳染病，如緊急應(yīng)急。接種某疫苗后而免疫效果沒有產(chǎn)生的一段時(shí)間中，輔助接種有緊急防控病毒性傳染的效果。臨床應(yīng)用中一直停留于提高干擾素效果、延長(zhǎng)干擾素機(jī)體內(nèi)半衰期、擴(kuò)大動(dòng)物干擾素效果研究?，F(xiàn)階段，豬干擾素制劑應(yīng)用較為常見，在其他疾病治療效果上不夠理想，特別是犬類疾病。想要提升干擾素效果、延長(zhǎng)半衰期，一些專家和研究人員通過(guò)不同的形式展開研究，其中包含基因工程、設(shè)計(jì)新的干擾素載體展開干擾素體內(nèi)保護(hù)，讓其治療效果得到進(jìn)一步提升。

2.1 傳染性胃炎、腹瀉、輪狀病毒應(yīng)用

采取肌肉注射，1 次/d，持續(xù) 3d。若條件允許可以搭配復(fù)方穿心蓮、雙黃連有助于提高治療效果。

2.2 豬藍(lán)耳病應(yīng)用

按照生豬 0.1ml/kg 劑量肌肉注射，每天注射一次，持續(xù)3d，搭配復(fù)方靈芝多糖注射治療效果更顯著。不過(guò)，在治療過(guò)程中若病毒未完全生成只使用干擾素即可，待病毒全部生成后搭配其他藥品能提高治療效果。

2.3 口蹄疫

采取感染素與轉(zhuǎn)移因子的混合肌肉注射形式，持續(xù)3d，每2天1 次或選擇復(fù)方靈芝多糖混合直射。治療過(guò)程中做好心肌炎預(yù)防藥物注射，如天王大敗毒、五毒康等可以提高治療效果。

3 干擾素在豬病毒性治療用藥注意事項(xiàng)

現(xiàn)階段，干擾素多是原核表達(dá)或酵母表達(dá)產(chǎn)品，產(chǎn)物純化工藝煩瑣，并且與天然產(chǎn)物結(jié)構(gòu)具有一定不同。通過(guò)模擬干擾素空間結(jié)構(gòu)和蛋白翻譯后的修飾，有助于提升活性。因?yàn)楦蓴_素在體內(nèi)半衰期短，所以以腺病毒形式融入干擾素基因療效時(shí)間更長(zhǎng)，藥效長(zhǎng)久，能提升干擾素治療效果。干擾素進(jìn)入生豬體內(nèi)5min 即可讓機(jī)體處于抗病毒環(huán)境，2h 內(nèi)出現(xiàn)抗病毒蛋白，5h 處于高峰階段，在3 周內(nèi)對(duì)病毒的重復(fù)感染具有抵制效果。但在豬病毒性治療應(yīng)用方面也要注意以下幾點(diǎn)，首先，因?yàn)楦蓴_素具有抵制病毒復(fù)制效果，對(duì)于動(dòng)物疫苗，使用弱毒性疫苗也具有抵制效果。所以，干擾素注射后96h 內(nèi)不可注射疫苗。其次，使用徹底滅菌的注射液或生理鹽水稀釋干擾素，確保干擾素的作用。最后，干擾素只可以使用一次，解凍后立即使用，不可二次解凍。治療時(shí)，與其他藥物搭配有助于提高療效。

豬患病過(guò)程中應(yīng)用干擾素可以配合轉(zhuǎn)移因子有助于提升治療效果，降低疫病引起的損失。若豬機(jī)體組織受傷嚴(yán)重處于敗血癥階段，應(yīng)用干擾素也難以達(dá)到理想效果?；疾『笃诓扇∽⑸湫问揭搽y以達(dá)到理想效果。干擾素具有對(duì)活毒疫苗達(dá)到抑制效果，因凍干疫苗免疫72h 前不可使用，滅活疫苗不受干擾素制約，應(yīng)用疫苗過(guò)程中配合干擾素能預(yù)防在疫苗產(chǎn)生免疫力前的野毒感染。治療過(guò)程中，如果不配合其他藥物難以達(dá)到理想效果。干擾素可以通過(guò)注射、飲水、滴口形式展開，預(yù)防與治療病毒性疾病1～2 次即可。如果在多種疾病環(huán)境下應(yīng)用需增加計(jì)量3 倍，持續(xù)3d，才能達(dá)到理想效果。干擾素可以與其他抗病毒藥物搭配應(yīng)用，或者與卵黃抗體應(yīng)用。干擾素必須在病毒感染早期，即體內(nèi)病毒尚未擴(kuò)散或引起嚴(yán)重病變之前臨床上使用才能奏效。應(yīng)用基因工程干擾不會(huì)促使抗體形成與減弱抗體，建議在應(yīng)用后一周根據(jù)傳染病免疫特點(diǎn)接種疫苗，有助于提高免疫效果，避免氣態(tài)疾病侵害。干擾素也可以搭配抗生素，具有抑制細(xì)菌性疾病的混合感染效果，添加電解多維可以加快康復(fù)效果[2]。

4 干擾素在豬病毒性疾病治療的研究

在國(guó)外研究方面，Buddaer 研究對(duì)豬繁殖和呼吸綜合征病毒及重組表達(dá)的豬IFN-a 的作用，實(shí)驗(yàn)用重組代表豬IFN-a 處理豬肺巨噬細(xì)胞后，PRRSV 的增殖明顯減少。Vandenbroeck 研究發(fā)現(xiàn)，重組豬IFN-y 能提高偽狂犬病毒滅活苗二次免疫后的lgG、lgA 反應(yīng)，減輕偽狂犬病毒攻毒后的發(fā)熱與體重降低癥狀。同時(shí)，實(shí)踐證明，在偽狂犬病毒滅活苗中加入IFN-y 有助于提升高黏膜免疫與全身免疫效果。Chinsangaram 研究得出，大腸桿菌表達(dá)的豬IFN-a 對(duì)口蹄疫病毒具有抵抗效果，對(duì)蛋白質(zhì)翻譯效果也具有抵抗效果，這與雙股RNA 依靠的蛋白激酶有密切聯(lián)系。國(guó)外學(xué)者研究了長(zhǎng)效淋巴細(xì)胞樣干擾素皮下運(yùn)用劑型干擾素制劑，效果理想。

在國(guó)內(nèi)研究中，有學(xué)者研究豬淋巴細(xì)胞IFN-y 基因的克隆與體內(nèi)外基因表達(dá)，對(duì)白鼠、豬免疫系統(tǒng)和豬瘟、豬肺疫、豬丹毒三聯(lián)疫苗與副傷寒疫苗應(yīng)答效果與機(jī)理展開研究得出，干擾素具有促進(jìn)免疫應(yīng)答的作用。其他學(xué)者通過(guò)豬白細(xì)胞IFN 對(duì)哺乳幼崽與斷奶幼崽病毒性腹瀉、細(xì)菌混合感染的腹瀉，也要干擾素具有預(yù)防控制作用。此外，對(duì)豬α 干擾素、豬β 干擾素與豬γ 干擾素的抗病毒活性及其免疫佐劑進(jìn)行研究，結(jié)果表明，PoIFN-α、γ 可增強(qiáng) CSFV 細(xì)胞苗在豬體內(nèi)的 IgG 及 IgG2的抗體水平并調(diào)節(jié)Th1 免疫反應(yīng)，即PoIFN-α 對(duì)IgG 的調(diào)控劑量呈正相關(guān)。利用干擾素進(jìn)行仔豬高致病性 PRRS、豬瘟（CSF）、豬偽狂犬病、豬圓環(huán)毒病的治療，成活率可達(dá)到 90%以上。

5 結(jié)語(yǔ)

綜合分析，干擾素在豬病毒性疾病治療方面效果顯著，但并不表示干擾素可以治療任何疾病，其應(yīng)用要求在病毒未完全擴(kuò)散前且與其他具備滅菌效果的注射液科學(xué)搭配。只有這樣才能達(dá)到理想的治療效果，幫助豬群健康成長(zhǎng)。此外，在預(yù)防治療時(shí)應(yīng)用干擾素配合免疫接種有助于凈化病毒效果，確保干擾素治療效果提升，推動(dòng)生豬養(yǎng)殖業(yè)持續(xù)穩(wěn)定發(fā)展。在今后發(fā)展中，想要進(jìn)一步擴(kuò)大干擾素適用范圍，在今后研究中需立足于不同種屬動(dòng)物干擾素間結(jié)構(gòu)、功能、控制分析，找到動(dòng)物干擾素相同點(diǎn)，從而獲得新的廣譜、高效干擾素臨床制劑。