耿振 王丹 姜延國

（遼寧省丹東市衛(wèi)生健康服務(wù)中心 遼寧丹東 118000）

1 前言

尿碘水平作為監(jiān)測及評(píng)價(jià)人群或個(gè)體碘營養(yǎng)狀況的重要指標(biāo)之一[1]，因其實(shí)用性強(qiáng)和靈敏性高等特點(diǎn)，受到碘缺乏病防治工作者的廣泛認(rèn)同。 因此，尿碘的準(zhǔn)確檢測，對及時(shí)跟蹤了解人群中碘營養(yǎng)狀況的動(dòng)態(tài)分布具有極其重要的指導(dǎo)意義。

目前，國家碘缺乏病實(shí)驗(yàn)室利用實(shí)驗(yàn)室間比對質(zhì)控考核的方式，控制全國各級(jí)碘缺乏病實(shí)驗(yàn)室尿碘的檢測質(zhì)量，確保檢測數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性達(dá)到要求?，F(xiàn)將近年來檢測工作中積累的經(jīng)驗(yàn)和教訓(xùn)總結(jié)如下。

2 尿碘檢測技術(shù)探討

2.1 人員操作要求

碘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液、標(biāo)準(zhǔn)使用系列溶液的配制；準(zhǔn)確吸取樣品及試劑的手法。其中，標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的配制及其穩(wěn)定性，是影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的關(guān)鍵。

2.1.1 操作者需要熟練操作十萬分之一電子天平

為了更經(jīng)濟(jì)，實(shí)驗(yàn)室采用自配的碘酸鉀標(biāo)準(zhǔn)貯備液，需要使用十萬分之一電子天平準(zhǔn)確稱量0.168 6 g經(jīng)105～110℃烘干至恒重的碘酸鉀。建議操作者除戴手套與口罩外，輕輕拍打手腕，多次反復(fù)清洗稱量燒杯及玻璃棒，洗液共同移入容量瓶中，用去離子水定容至刻度。

2.1.2 操作者需要快速添加試劑， 并保持手法的一致性

在加入1.00 mL 過硫酸銨、2.50 mL 亞砷酸和0.30 mL硫酸鈰銨的過程中，建議操作者使用0.10～1.00 mL 移液器、1.00～5.00 mL 移液器， 且應(yīng)保持添加試劑手法的一致性。 操作者在每15 s 或者30 s 添加硫酸鈰銨的過程中， 要準(zhǔn)確快速地吸取足量硫酸鈰銨，切莫在槍頭尖端留有空氣。

2.1.3 尿樣或質(zhì)控樣的取樣技術(shù)探討

尿樣或質(zhì)控樣比較黏稠，利用50～250 μL 移液器吸取250 μL 樣品時(shí)，總會(huì)有殘留液掛在槍頭內(nèi)壁。建議操作者：（1）充分混勻質(zhì)控樣或尿樣。 蓋緊瓶蓋或采尿管蓋，手持塑料瓶或采尿管，在水平桌面上劃圈混勻約15 s，靜置片刻取樣。（2）移液器的槍頭尖端應(yīng)伸入尿液液面以下，緩慢吸取尿樣。（3）快速將移液器壓到第一檔位，停留10 s 左右，待黏稠的殘留尿液流至移液器槍頭尖端時(shí)，快速壓動(dòng)移液器至第二檔位。

2.2 儀器穩(wěn)定性要求

在整個(gè)檢測過程中，使用的儀器有電子天平、紫外可見分光光度計(jì)、超級(jí)恒溫水浴鍋、消解儀和漩渦振蕩器等。其中，控溫儀器的穩(wěn)定性對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響位列第二[2]。

2.2.1 電子天平的穩(wěn)定性影響

在稱量0.168 6 g 碘酸鉀基準(zhǔn)試藥時(shí)，用到十萬分之一電子天平，必須保證電子天平的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性。 因此，電子天平應(yīng)經(jīng)檢定合格后使用，且每次開機(jī)需要預(yù)熱30 min。

2.2.2 紫外可見分光光度計(jì)的穩(wěn)定性影響

儀器應(yīng)經(jīng)420 nm 波長校準(zhǔn)后，開啟預(yù)熱1 h 以上使用最好，可以保證讀數(shù)的穩(wěn)定性；使用的10 mm石英比色皿，吸光度差值最好在0.001 以內(nèi)。

2.2.3 超級(jí)恒溫水浴鍋溫控穩(wěn)定性影響

恒溫水浴箱水溫的波動(dòng)，會(huì)影響最終結(jié)果。推薦使用超級(jí)恒溫水浴箱，溫度設(shè)定為（30±0.1）℃。

2.2.4 消解儀溫控穩(wěn)定性影響

樣品消解是否徹底直接影響測定結(jié)果。 普通消解儀采用底部加熱，儀器上方溫度逸散程度不同，導(dǎo)致不同孔位間存在溫度差異。若無更好的消解設(shè)備，可預(yù)先將室內(nèi)環(huán)境溫度調(diào)節(jié)好，同時(shí)用溫度計(jì)測定好每一個(gè)孔位的溫度，實(shí)驗(yàn)中選取溫控穩(wěn)定的孔位進(jìn)行消解。

2.3 耗材及試劑要求

2.3.1 實(shí)驗(yàn)用消解管的要求

消解管的高度、直徑和玻璃厚度都應(yīng)統(tǒng)一。消解管的最低高度應(yīng)該高于10 cm，避免在高溫消解的情況下，過硫酸銨分解產(chǎn)生氣體噴出消解管[3]。

2.3.2 亞砷酸配制過程中值得注意的問題

（1）本實(shí)驗(yàn)需要使用劇毒的三氧化二砷配制亞砷酸溶液用于砷鈰反應(yīng)，實(shí)驗(yàn)人員在操作過程中必須做好相應(yīng)的防護(hù)工作，健全使用劇毒品的安全意識(shí)，戴好防護(hù)口罩、手套，有條件的實(shí)驗(yàn)室可以選擇一次性防護(hù)服；

（2）一次性配制相對適量的亞砷酸溶液于棕色試劑瓶，保存于專用的4℃冰箱中，雙人雙鎖鎖好備用；

（3）砷是危害較大的環(huán)境毒物，檢測尿碘后含砷廢液的排放存在潛在的環(huán)境污染問題，需特別注意。

2.4 檢測方法要求

尿碘檢測采用WS/T 107.1—2016《尿中碘的測定第1 部分：砷鈰催化分光光度法》[4]方法，相比2006 版的方法修改了配制亞砷酸溶液中砷的用量，每1000mL亞砷酸使用三氧化二砷從10.0 g 改為了2.5 g，同時(shí)增加了測定尿碘濃度300～1 200 μg/L 的方法步驟。

該方法抗尿組分干擾特異性好、靈敏度高、線形范圍和準(zhǔn)確度好，是檢測尿碘的優(yōu)良方法。 但是，該方法與儀器分析方法相比，仍有以下不足之處：人員精力消耗較大、檢測時(shí)間較長、結(jié)果穩(wěn)定性較低、結(jié)果重現(xiàn)性較差等。

2.5 環(huán)境條件要求

嚴(yán)格控制比色時(shí)間、環(huán)境或儀器溫度和環(huán)境干擾物，是本實(shí)驗(yàn)的又一關(guān)鍵點(diǎn)。 其中，環(huán)境溫度和檢測環(huán)境中干擾物，都是影響實(shí)驗(yàn)成敗的外在條件。

2.5.1 環(huán)境溫度對實(shí)驗(yàn)的影響

尿碘檢測工作量多，持續(xù)時(shí)間長，環(huán)境溫度對標(biāo)準(zhǔn)試劑和樣品都有影響。建議尿碘實(shí)驗(yàn)室配有空調(diào)，以保證環(huán)境溫度的穩(wěn)定。

2.5.2 環(huán)境中干擾物對實(shí)驗(yàn)的影響

尿碘實(shí)驗(yàn)室應(yīng)遠(yuǎn)離鹽碘實(shí)驗(yàn)室， 一些含碘較高的碘鹽、含碘試藥試劑等，都不應(yīng)存放在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)；并且，在尿碘實(shí)驗(yàn)室初次投入使用前，應(yīng)使用5%的硫代硫酸鈉溶液擦拭實(shí)驗(yàn)臺(tái)、椅子及儀器表面等，消除氧化物質(zhì)干擾。 當(dāng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)不成線性或者普遍偏高時(shí)，也應(yīng)進(jìn)行該處理。

2.6 結(jié)果的測算

尿碘的檢測結(jié)果是吸光度的對數(shù)與濃度成負(fù)相關(guān)的關(guān)系。 因此，相關(guān)系數(shù)應(yīng)為負(fù)數(shù)，且絕對值應(yīng)大于0.999。

尿樣成份相對復(fù)雜，測定結(jié)果穩(wěn)定，重現(xiàn)性較差，檢測人員需在接收樣品后短時(shí)間內(nèi)完成測定。

3 結(jié)語

上述實(shí)驗(yàn)介紹分析了尿碘檢測環(huán)節(jié)的一些過程及注意事項(xiàng)，希望能為從事該項(xiàng)工作的檢測人員提供參考依據(jù)。