李娜

[摘要] 目的 探究GeneXpert Mtb/RIF檢測技術(shù)對利福平耐藥結(jié)核病的診斷效果。方法 便利擇取2017年1月—2019年1月期間該院收治的42例耐藥結(jié)核病患者為研究對象，開展利福平藥敏實驗，比較GeneXpert Mtb/RIF檢測與傳統(tǒng)藥敏實驗檢測結(jié)果。結(jié)果 GeneXpert Mtb/RIF檢測對耐藥結(jié)核病診斷陽性率95.24%，涂片鏡檢的診斷陽性率78.57%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=5.126，P<0.05）;GeneXpert Mtb/RIF檢測與金標準檢查結(jié)果差異無統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=2.048，P>0.05）。GeneXpert Mtb/RIF診斷敏感度95.24%，特異度93.46%，涂片鏡檢診斷敏感度78.57%，特異度75.21%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=5.126、6.324，P<0.05）。GeneXpert Mtb/RIF檢測利福平耐藥敏感度為92.86%，特異度89.29%，與傳統(tǒng)藥敏實驗相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=0.055、0.460，P>0.05）。 結(jié)論 GeneXpert Mtb/RIF檢測對耐藥結(jié)核病診斷效果與金標準具有良好一致性，其檢測敏感度和特異度較高，對利福平耐藥結(jié)核病具有良好的診斷效果，因此其可用于臨床推廣。

[關(guān)鍵詞] GeneXpert Mtb/RIF檢測;耐藥結(jié)核病;診斷價值

[中圖分類號] R825.2? ? ? ? ? [文獻標識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1674-0742（2019）11（b）-0181-03

[Abstract] Objective To investigate the diagnostic effect of GeneXpert Mtb/RIF detection technology on rifampicin-resistant tuberculosis. Methods 42 patients with drug-resistant TB who were admitted to the hospital from January 2017 to January 2019 were convenienty selected into the study. The rifampicin susceptibility test was performed to compare the results of GeneXpert Mtb/RIF test with traditional susceptibility test. Results The positive rate of GeneXpert Mtb/RIF detection for drug-resistant tuberculosis was 95.24%， and the positive rate of smear microscopy was 78.57%. The difference was statistically significant （χ2=5.126， P<0.05）. There was no significant difference in the results of GeneXpert Mtb/RIF test and gold standard examination（χ2=2.048， P>0.05）. The diagnostic sensitivity of GeneXpert Mtb/RIF was 95.24%， the specificity was 93.46%， the sensitivity of smear microscopy was 78.57%， and the specificity was 75.21%. The difference was statistically significant （χ2=5.126， 6.324， P<0.05）. GeneXpert Mtb/RIF showed rifampicin resistance sensitivity of 92.86% and specificity of 89.29%. There was no significant difference compared with traditional susceptibility test （χ2=0.055，0.460， P>0.05）. Conclusion The GeneXpert Mtb/RIF test has a good consistency with the gold standard for the diagnosis of drug-resistant tuberculosis. Its detection sensitivity and specificity are high. It has a good diagnostic effect on rifampicin-resistant tuberculosis， so it can be used for clinical promotion.

[Key words] GeneXpert Mtb/RIF detection; Drug-resistant tuberculosis; Diagnostic value

結(jié)核病是臨床常見慢性傳染病，對人類的健康具有嚴重危害。近年來耐藥結(jié)核病的發(fā)病率不斷提升，對我國結(jié)核病防控工作產(chǎn)生了新的挑戰(zhàn)。耐藥結(jié)核病相比于普通結(jié)核病具有治療耗時久、難度大且效果差等特點，是我國結(jié)核病防控部門關(guān)注的重點對象[1]。及早發(fā)現(xiàn)患者病情對其后續(xù)治療效果及預(yù)后具有積極影響，目前針對該疾病的診斷方式較多，包括涂片檢查、痰液培養(yǎng)和GeneXpert Mtb/RIF技術(shù)等。為探究GeneXpert Mtb/RIF對耐藥結(jié)核病的診斷效果，該次便利擇取2017年1月—2019年1月期間該院收治的42例耐藥結(jié)核病患者開展研究，報道如下。

1? 資料與方法

1.1? 一般資料

便利擇取該院收治的42例耐藥結(jié)核病患者，均行羅氏固體培養(yǎng)基檢查確診為陽性，其中包括男性患者30例，女性患者12例;年齡22～76歲，平均（53.8±3.6）歲。該次研究已經(jīng)過該院倫理委員會批準，所有入組患者對研究內(nèi)容、方法、目的等知情，并自愿簽署了同意書。同時研究已經(jīng)排除合并惡性腫瘤患者、其他傳染性疾病患者、臨床資料不全患者。

1.2? 方法

菌型篩查：在陽性培育管內(nèi)使用吸管序曲100 μL待檢樣本，并將其滴到檢測板上已有的樣本下方，靜置15 min后對檢測板上的情況進行觀察，其中檢測線、質(zhì)控線均有紫紅色條帶時確定為陽性，即結(jié)核分枝桿菌;若見檢測線無則紅色條帶，質(zhì)控線處有紫紅色條帶，則確定為陰性，即非結(jié)核分枝桿菌。

后分別為該組患者行涂片鏡檢和GeneXpert Mtb/RIF檢測，①涂片鏡檢：按照衛(wèi)生部門發(fā)布的相關(guān)標準進行痰液標本涂片檢測，以抗酸染色檢查報告為依據(jù)做出如下結(jié)果判定：陰性（-）為連續(xù)對300個視野進行觀察無抗酸桿菌，300視野內(nèi)可報告1～8條抗酸桿菌;陽性（+）為100個視野內(nèi)可見3～9條抗酸桿菌;陽性（++）為10個視野內(nèi)可見1～9條抗酸桿菌;陽性（+++）為1個視野內(nèi)可見1～9條抗酸桿菌;陽性（++++）為1個視野內(nèi)可見至少10條抗酸桿菌。②GeneXpert Mtb/RIF檢測：按照檢測設(shè)備說明書加入試劑后進行渦旋振蕩處理，靜置15 min后轉(zhuǎn)移至樣本反應(yīng)盒再放置樣本倉，常規(guī)提出DNA、進行PCR擴增等，通過專業(yè)軟件對結(jié)果進行判讀。

質(zhì)量保證：以我國結(jié)核病防治規(guī)劃中固定的痰液涂片鏡檢測標準進行操作，按照防治規(guī)劃治療保證手冊中相關(guān)要求，對痰液涂片盲法復(fù)檢以及實驗室內(nèi)質(zhì)量控制進行干預(yù)。每年各個季度上級實驗室對本實驗室進行督導(dǎo)，開展現(xiàn)場評估，同時考核實驗室內(nèi)盲法抽片的復(fù)查質(zhì)量。eneXpert Mtb/RIF檢測已經(jīng)經(jīng)過我國疾控中心開展的實驗室殘幣測試獲取了良好的結(jié)果成績。

1.3? 觀察指標

以羅氏固體培養(yǎng)基檢測結(jié)果為金標準比較兩種方法的診斷準確率、敏感度和特異度。

1.4? 統(tǒng)計方法

應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行分析數(shù)據(jù)， 計量資料用（x±s）表示，組間比較行t檢驗，計數(shù)資料用[n（%）]表示，組間比較行χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2? 結(jié)果

2.1? 3種診斷方法陽性率比較

GeneXpert Mtb/RIF檢測對耐藥結(jié)核病診斷陽性率95.24%，涂片鏡檢的診斷陽性率78.57%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=5.126，P<0.05）;GeneXpert Mtb/RIF檢測與金標準檢查結(jié)果差異無統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=2.048，P>0.05）。見表1。

2.2? 涂片鏡檢和GeneXpert Mtb/RIF診斷方法敏感度及特異度比較

GeneXpert Mtb/RIF診斷敏感度95.24%，特異度93.46%，涂片鏡檢診斷敏感度78.57%，特異度75.21%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=5.126，P<0.05）。見表2 。

2.3? GeneXpert Mtb/RIF與傳統(tǒng)藥敏實驗檢測結(jié)構(gòu)比較

42例患者傳統(tǒng)藥敏實驗檢測結(jié)果顯示，對利福平耐藥患者14例，耐藥率33.33%;對利福平敏感患者28例，敏感率65.12%;GeneXpert Mtb/RIF檢測結(jié)果顯示，對利福平耐藥患者13例，耐藥率30.95%;對利福平敏感患者25例，敏感率59.52%，將傳統(tǒng)藥敏實驗結(jié)果設(shè)定為金標準，GeneXpert Mtb/RIF對利福平耐藥結(jié)核病的檢測敏感度為92.86%，特異度89.29%，與傳統(tǒng)藥敏實驗檢測結(jié)果差異無統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=0.055、0.460，P>0.05）。

3? 討論

結(jié)核病時慢性傳染性疾病之一，屬于可對人類健康造成嚴重危害的一類疾病。據(jù)相關(guān)數(shù)據(jù)調(diào)查結(jié)果顯示，我國臨床耐藥性結(jié)核病在近年來的發(fā)病率不斷提升，對我國結(jié)核病防控工作產(chǎn)生了新的不良影響。我國涂陽肺結(jié)核患者耐藥率高達40%，其中耐多藥患者約占10%，該類結(jié)核病治療難度大，是我國近些年傳染病防控部門關(guān)注的重點問題[2]。

耐藥結(jié)核病會對患者的健康及生活質(zhì)量造成嚴重的負面影響，且具有治療難度、治愈率低的特點，因此及時發(fā)現(xiàn)疾病并及早開展針對性治療可有效提升患者的臨床療效。目前臨床中以羅氏固體培養(yǎng)基為診斷該疾病的金標準，雖然其診斷效果確切，但是其檢測需要2～5周的時間才能獲得陽性檢測報告，陰性檢測報告則需要8周以上，耗時太久[3]。而痰涂片鏡檢敏感度差，且易受標本質(zhì)量、檢查者技術(shù)水平和責(zé)任心的影響，同時檢出率與痰液樣本的形狀具有一定相關(guān)性，痰液樣本過度濃稠或帶有血液時，檢測結(jié)果與唾液痰相比具有更高陽性率，加之其操作技術(shù)受限較多，誤差性較大，具有較高的誤診率，不利于患者的治療[4-5]。近年來隨著我國醫(yī)療水平和檢驗技術(shù)的不斷發(fā)展，GeneXpert Mtb/RIF檢測在臨床中的應(yīng)用逐漸增多，該種檢測技術(shù)目前已經(jīng)在多個國家和地區(qū)的臨床中獲得良好的應(yīng)用效果，其診斷效果也已經(jīng)經(jīng)過了大量研究的證實[6]。GeneXpert Mtb/RIF檢測敏感度和特異度均較高，現(xiàn)已成為WHO推薦的對結(jié)核病以及耐藥結(jié)核病進行檢測的主要方法。該次研究結(jié)果顯示GeneXpert Mtb/RIF檢測與金標準具相近，且GeneXpert Mtb/RIF診斷敏感度95.24%，特異度93.46%均顯著高于涂片鏡檢的診斷敏感度78.57%，特異度75.21%，藥敏實驗結(jié)果顯示GeneXpert Mtb/RIF檢測與傳統(tǒng)藥敏實驗結(jié)果差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;黃建斌等人[7]的研究結(jié)果顯示，GeneXpert Mtb/RIF檢測敏感度48.05%，高于涂片檢測的22.08%，特異度93.33%與涂片檢測100.00%差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），藥敏實驗中GeneXpert Mtb/RIF檢測耐藥度為100.00%與傳統(tǒng)藥敏結(jié)果一致，且特異度為96.55%與傳統(tǒng)藥敏結(jié)果100.00%差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），與該次研究結(jié)果具有一致性，可見其對耐藥性結(jié)核病診斷效果理想。

GeneXpert Mtb/RIF檢測屬于一體化全自動半巢式PCR檢測系統(tǒng)，對樣品準備、提取DNA和擴增等步驟進行了整合，除樣本預(yù)處理環(huán)節(jié)外，其余檢測步驟均在反應(yīng)盒內(nèi)發(fā)生，檢測全過程僅需2 h，大大縮短了金標準檢測時間，且不受外界環(huán)境和因素的影響，誤差小。GeneXpert Mtb/RIF檢測設(shè)計了質(zhì)量控制點一共2個，包括探針信號和樣本質(zhì)量控制兩種，樣本質(zhì)量控制對DNA提取步驟的準確性、樣本檢測過程對實時定量PCR產(chǎn)生的干擾性進行監(jiān)測，而探針信號控制可對探針熒光信號干擾PCR反應(yīng)情況進行檢測，以此保證檢測結(jié)果準確性和穩(wěn)定性[8]。同時該種檢測方式與涂片鏡檢和藥敏培養(yǎng)檢測法相比，對實驗室生物的安全性要求比較低，可在各種級別實驗室進行檢測操作。

綜上所述，針對耐藥結(jié)核病實施GeneXpert Mtb/RIF檢測可有效縮短檢測時間，提升檢測效果，有利于幫助臨床醫(yī)生及時了解患者的病情，為患者臨床治療方案的制定提供了有效的依據(jù)，因此其可用于臨床推廣。

[參考文獻]

[1]? 劉揚，葛曉飛，陳宇飛.Gene Xpert MTB/RIF技術(shù)在肺結(jié)核診斷及利福平耐藥檢測中的意義分析[J].中國醫(yī)藥指南，2018，16（33）：107-108.

[2]? 王勝啟，馬艷艷，李愛華，等.GeneXpert MTB/RIF檢測出入境人員結(jié)核病及利福平耐藥結(jié)核病的研究[J].中國國境衛(wèi)生檢疫雜志，2016，39（1）：21-23.

[3]? 王霄，文強，岳健博，等.GeneXpert Mtb/RIF、抗酸染色及培養(yǎng)在淺表淋巴結(jié)結(jié)核診斷中的比較研究[J].遵義醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2016，39（3）：275-278.

[4]? 鐘永輝，張錫林.GeneXpert MTB/RIF技術(shù)在肺結(jié)核診斷及利福平耐藥檢測中的意義研究[J].臨床醫(yī)學(xué)工程，2016， 23（6）：785-786.

[5]? 林永通，麥世康.GeneXpert Mtb/RIF檢測技術(shù)在結(jié)核病診斷中的應(yīng)用評價[J].中國熱帶醫(yī)學(xué)，2018，18（1）：93-95.

[6]? 高榮，陳晉.GeneXpert Mtb/RIF檢測技術(shù)在臨床耐藥結(jié)核病診斷中的應(yīng)用價值[J].同濟大學(xué)學(xué)報：醫(yī)學(xué)版，2017，38（2）：106-109.

[7]? 黃建斌，楊玲，梁曉莉.GeneXpert Mtb/RIF檢測技術(shù)在結(jié)核病診斷中的應(yīng)用探討[J].醫(yī)學(xué)動物防制，2017，33（0）：465-467.

[8]? 高陽，宋其生，周潔，等.GeneXpert MTB/RIF在新發(fā)活動性肺結(jié)核診斷及對利福平耐藥快速檢測中的應(yīng)用價值[J].結(jié)核病與肺部健康雜志，2018，7（1）：29-32.

（收稿日期：2019-08-17）