崔珊珊，畢凱媛，吳 杰，尚宏麗

(錦州醫(yī)科大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院，遼寧省肉類加工與質(zhì)量安全控制工程技術(shù)研究中心，遼寧錦州121001)

樹(shù)莓，又名山拋?zhàn)印⒏才枳雍屯斜P等，為薔薇科懸鉤子屬灌木型植物，以東北分布較多。樹(shù)莓含有豐富的鞣花酸、黃酮和水楊酸等多種生物活性成分，具有極高的開(kāi)發(fā)和利用價(jià)值。鞣花酸是一種多酚二內(nèi)酯，它是沒(méi)食子酸的二聚衍生物，廣泛分布于各種植物組織和果實(shí)中，呈游離形式或縮合形式。研究者從草莓、石榴、葡萄、樹(shù)莓和板栗發(fā)現(xiàn)不同含量的鞣花酸，其中樹(shù)莓中鞣花酸的含量在水果中堪稱“之最”［1－5］。樹(shù)莓是最早一批被研究人員發(fā)現(xiàn)其含有天然鞣花酸的植物之一［6］。鞣花酸具有抗菌［7］、抗氧化［8－9］、抗炎［10］、鎮(zhèn)痛［11］等多種特性，在腫瘤方面也具有很高的應(yīng)用價(jià)值［12－13］，堪稱“癌癥的天敵”。在國(guó)外，鞣花酸已被許多研究機(jī)構(gòu)開(kāi)發(fā)，廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、化妝品等各個(gè)領(lǐng)域。而且在國(guó)際市場(chǎng)上鞣花酸的保健品比一般的保健品價(jià)位要高出很多，但國(guó)內(nèi)對(duì)它的開(kāi)發(fā)還處于研發(fā)階段［10］。

鞣花酸等多酚類化合物的提取方法，多集中于溶劑浸提法和超聲波輔助提取，研究者利用超聲波輔助溶劑浸提法［14］、乙酸乙酯萃取法［15］、酸水解法［16］、分離沉淀法［17］提取植物中鞣花酸等多酚類化合物。這些傳統(tǒng)的方法提取多酚由于提取時(shí)間長(zhǎng)，很容易使多酚化合物降解，影響其抗氧化活性。微波輔助提取技術(shù)，具有提取時(shí)間短暫，提取得率高等優(yōu)點(diǎn)［18］，適合多酚及黃酮類化合物的提取。目前，關(guān)于微波輔助溶劑提取樹(shù)莓鞣花酸實(shí)驗(yàn)還鮮見(jiàn)報(bào)道。

本實(shí)驗(yàn)以樹(shù)莓為原料，利用微波輔助溶劑提取樹(shù)莓鞣花酸，利用高效液相色譜(HPLC)測(cè)定提取量，通過(guò)響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化微波輔助提取樹(shù)莓鞣花酸工藝，與傳統(tǒng)鹽酸水解法對(duì)比其體外抗氧化活性研究，為進(jìn)一步深入研究樹(shù)莓鞣花酸生物活性功能以及相關(guān)功能性食品開(kāi)發(fā)提供一定的基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

紅樹(shù)莓(Rubus idaeus L.cv.Fertod Zamatos) 錦州七里河樹(shù)莓種植基地，置于－80℃冰箱中凍存?zhèn)溆?鞣花酸標(biāo)準(zhǔn)品(純度大于或等于98%) 武漢培安生物科技有限公司;甲醇(色譜純) 上海安譜實(shí)驗(yàn)科技股份有限公司;磷酸(HPLC級(jí))、鄰苯三酚、無(wú)水乙醇、鹽酸、硫酸亞鐵、EDTA、30%過(guò)氧化氫(均為AR) 天津科密歐化學(xué)試劑有限公司;實(shí)驗(yàn)用水 自制實(shí)驗(yàn)室蒸餾水和去離子水;鄰菲羅啉、DPPH(均為AR) 天津永大化工試劑有限公司;PBS緩沖液 北京索萊寶科技有限公司;Tris－HCl緩沖液 上海爾武實(shí)業(yè)有限公司。

Agilent1200液相色譜系統(tǒng)G1315D型DAD檢測(cè)器 安捷倫有限公司;COWB微波萃取設(shè)備 江陰辰歐微波能系統(tǒng)設(shè)備有限公司;FD－1A－50真空冷凍干燥機(jī) 上海豫明儀器有限公司;800Y高速多功能粉碎機(jī)(70～300目) 永康市鉑歐五金制品有限公司;DM0412E低速離心機(jī) 江蘇蘇博生物醫(yī)學(xué)股份有限公司;JM－BL電子分析天平 慈溪紅鉆衡器設(shè)備有限公司;數(shù)字恒溫水浴鍋(HH－6，常州市萬(wàn)豐儀器制造有限公司);RE－5250旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器 鞏義市英峪高科儀器廠;722紫外可見(jiàn)分光光度計(jì) 佛山市涵宇駿儀器有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 樣品前處理 紅樹(shù)莓鮮果在低溫冷凍冰箱中經(jīng)過(guò)預(yù)冷處理后，放入真空冷凍干燥機(jī)干燥48 h，之后用粉碎機(jī)粉碎，粉碎后過(guò)80目篩，在－20℃下保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 微波輔助溶劑提取法提取樹(shù)莓中鞣花酸工藝單因素試驗(yàn) 精確稱量0.5 g樹(shù)莓凍干粉置于25 mL錐形瓶中，按照一定的液料比(mL/g)加入一定濃度的乙醇溶液在一定提取溫度下，利用一定的微波功率提取一定的時(shí)間后快速冷卻，4500 r/min條件下25℃條件下離心20 min，殘?jiān)貜?fù)提取2次，與上清液合并。樹(shù)莓鞣花酸粗提物用二甲亞砜(DMSO)定容在25 mL。樣品用0.45μm微孔濾膜過(guò)濾。用于HPLC檢測(cè)分析濾液中鞣花酸。所有提取及檢測(cè)均平行三次［19］。

1.2.2.1 乙醇濃度對(duì)鞣花酸含量的影響 試驗(yàn)測(cè)定方法同1.2.2，只改變單因素項(xiàng)，其余固定不變。提取時(shí)間選擇2 min，提取溫度60℃，液料比20∶1，微波功率 400 W，乙醇濃度選用 10%、30%、50%、70%、90%。

1.2.2.2 提取時(shí)間對(duì)鞣花酸含量的影響 乙醇濃度選擇50%，控制其他反應(yīng)條件同1.2.2.1，提取時(shí)間選用 1、2、3、4 min。

1.2.2.3 提取溫度對(duì)鞣花酸含量的影響 乙醇濃度選擇50%，控制其他反應(yīng)條件同1.2.2.1，提取溫度選用 40、50、60、70、80 ℃。

1.2.2.4 液料比對(duì)鞣花酸含量的影響 乙醇濃度選擇50%，控制其他反應(yīng)條件同1.2.2.1，液料比選用10∶1、20∶1、30∶1、40∶1。

1.2.2.5 微波功率對(duì)鞣花酸含量的影響 乙醇濃度選擇50%，控制其他反應(yīng)條件同1.2.2.1，微波功率選用 200、300、400、500、600 W。

1.2.3 響應(yīng)面試驗(yàn) 在單因素試驗(yàn)結(jié)果的基礎(chǔ)之上，采用Box－Behnken設(shè)計(jì)響應(yīng)曲面試驗(yàn)方案，以樹(shù)莓鞣花酸提取量作為響應(yīng)值，對(duì)乙醇濃度、提取時(shí)間、提取溫度、料液比和微波功率五因素進(jìn)行響應(yīng)面法優(yōu)化。各因素及水平編碼見(jiàn)表1。

表1 因素及水平編碼Tabel 1 Factors and levels code

1.2.4 鞣花酸的HPLC測(cè)定 液相色譜條件:色譜柱為Zorbax Eclipse plus C18柱(150 mm×4.6 mm，5μm)。流動(dòng)相:冰乙酸(A)－甲醇(B)，梯度洗脫程序:0～4 min B由 20%升到 45%，維持 6 min，10～15 min B由 45%升到 70%，15～20 min B升至100%，維持1 min;柱溫30℃，運(yùn)行60 min，進(jìn)樣體積10μL，在280 nm下檢測(cè)。

鞣花酸標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:精確配制成6 mg/mL鞣花酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，精確吸取 0.5、1.0、2.5、3.5、5.0、6.5 mL置于10 mL容量瓶中，分別配制成30、60、150、210、300 和390 mg/100 g標(biāo)準(zhǔn)溶液，用DMSO 定容至刻度并搖勻，取標(biāo)準(zhǔn)溶液各10μL進(jìn)樣，測(cè)定峰面積，以標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度(mg/100 g)為橫坐標(biāo)，以標(biāo)準(zhǔn)樣品的峰面積為縱坐標(biāo)，繪制出鞣花酸標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.2.5 兩種提取方法所得鞣花酸含量的比較 采用傳統(tǒng)鹽酸水解提取方法［20］，方法略微修改，精確稱取0.5 g樹(shù)莓凍干粉置于50 mL帶蓋錐形瓶中，加入10 mL 1 mol/L鹽酸混勻，60℃水浴1 h后過(guò)濾收集濾液;濾渣重復(fù)上述步驟提取1次，合并濾液得鞣花酸粗品提取液;濾液在85℃下真空旋轉(zhuǎn)干燥烘干水分，測(cè)定鞣花酸含量，與本研究利用響應(yīng)面優(yōu)化出最佳提取出的鞣花酸含量進(jìn)行比較。

1.2.6 兩種提取方法得到的鞣花酸中羥自由基清除能力的測(cè)定 將樹(shù)莓鞣花酸提取物用蒸餾水配成濃度分別為 0.25、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 mg/mL 的樣品溶液。損傷管:取1.0 mL的75 mmol/L鄰二氮菲無(wú)水乙醇溶液加入2.0 mL p H7.4的PBS緩沖液和0.5 mL蒸餾水，充分混勻后加入1.0 mL的75 mmol/L硫酸亞鐵，混勻后再加入1.5 mL 0.01%(v/v)的雙氧水，37℃水浴60 min。未損傷管:以蒸餾水代替雙氧水［21］。樣品管:以樣品溶液代替蒸餾水。在508 nm處測(cè)定吸光值A(chǔ)。清除率按下式計(jì)算:

式中:Aa:樣品吸光度;Ab:損傷管吸光度;Ad:未損傷管吸光度;R:清除率(%)。

1.2.7 兩種提取方法得到的鞣花酸中DPPH自由基清除能力的測(cè)定 取1.2.6所配制的不同質(zhì)量濃度的樣品溶液1 mL，加入3 mL DPPH無(wú)水乙醇溶液(0.04 g/L)，混勻后在室溫下反應(yīng)30 min，在517 nm下測(cè)定吸光度 Ai?？瞻捉M以無(wú)水乙醇溶液代替DPPH溶液，對(duì)照組以蒸餾水代替樣品溶液［22］。清除率按下式計(jì)算:

式中:A0:對(duì)照組吸光度;Ai:樣品組吸光度;Aj:空白組吸光度;I:清除率(%)。

1.3 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)處理采用SPSS 21.0軟件進(jìn)行方差分析(ANOVA)，p＜0.05差異性顯著。并采用 Design－Expert 7.0.0進(jìn)行響應(yīng)面分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 鞣花酸標(biāo)準(zhǔn)曲線

依據(jù)將不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液，分別進(jìn)樣后，所得色譜峰的位置如圖1所示。標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度(mg/100 g)是橫坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)樣品的峰面積是縱坐標(biāo)。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算線性回歸方程。y=32772x－26328，R2=0.9999，線性范圍為 30～400 mg/100 g，保留時(shí)間為34.266 min。

圖1 鞣花酸標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖Fig.1 Chromatogram of ellagic acid standard

2.2 單因素實(shí)驗(yàn)

2.2.1 乙醇濃度對(duì)樹(shù)莓鞣花酸提取量的影響 由圖2可知，在乙醇濃度10%～50%時(shí)，樹(shù)莓鞣花酸提取量隨著乙醇濃度的增大逐漸增大，在乙醇濃度達(dá)到50%時(shí)，樹(shù)莓鞣花酸提取量達(dá)到峰值78.93 mg/100 g，隨著乙醇濃度增多，多酚提取量顯著下降(p＜0.05)，可能是因?yàn)樯倭亏坊ㄋ嵛龀?，過(guò)濾、離心時(shí)沉淀下來(lái)，造成鞣花酸含量減少一小部分［23］，所以選擇50%的乙醇濃度為宜。

圖2 乙醇濃度對(duì)樹(shù)莓鞣花酸提取量的影響Fig.2 Effect of ethanol concentration on the content of ellagic acid in raspberry

2.2.2 提取時(shí)間對(duì)樹(shù)莓鞣花酸提取量的影響 由圖3可以看出，提取時(shí)間在1～2 min時(shí)，提取時(shí)間為2 min時(shí)所得到的樹(shù)莓鞣花酸提取量高于提取時(shí)間為1 min時(shí)所得到的樹(shù)莓鞣花酸提取量;當(dāng)提取時(shí)間達(dá)到2 min時(shí)，樹(shù)莓鞣花酸提取量達(dá)到峰值為82.33 mg/100 g，隨著提取時(shí)間的延長(zhǎng)，多酚提取量顯著下降(p＜0.05)，可能因?yàn)橐掖季哂袚]發(fā)性，隨著提取時(shí)間的延長(zhǎng)乙醇的有效濃度降低，致使鞣花酸提取量降低，所以選擇2 min進(jìn)行后續(xù)研究。

圖3 提取時(shí)間對(duì)樹(shù)莓鞣花酸提取量的影響Fig.3 Effect of extraction time on the content of ellagic acid in raspberry

2.2.3 提取溫度對(duì)鞣花酸提取量的影響 從圖4可以看出，在40～60℃時(shí)，樹(shù)莓鞣花酸提取量隨著提取溫度的升高而增加。當(dāng)提取溫度升高到60℃時(shí)，樹(shù)莓鞣花酸提取量達(dá)到峰值80.60 mg/100 g，隨著提取溫度的繼續(xù)升高，樹(shù)莓鞣花酸提取量顯著下降(p＜0.05)，可能是由于溫度的過(guò)度增加對(duì)鞣花酸的結(jié)構(gòu)造成一定破壞［24］，所以選擇提取溫度為60℃。

圖4 提取溫度對(duì)樹(shù)莓鞣花酸提取量的影響Fig.4 Effect of extraction temperature on the content of ellagic acid in raspberry

2.2.4 液料比對(duì)鞣花酸提取量的影響 從圖5可以看出，液料比為20∶1時(shí)所測(cè)得到的樹(shù)莓鞣花酸提取量高于液料比為10∶1時(shí)所測(cè)，這是因?yàn)橐毫媳鹊臄U(kuò)大可以增大溶劑與物料的接觸面積，能使更多的鞣花酸溶解出來(lái);當(dāng)液料比達(dá)到20∶1時(shí)，樹(shù)莓鞣花酸提取量達(dá)到峰值81.70 mg/100 g，隨著液料比的繼續(xù)升高，樹(shù)莓鞣花酸提取量顯著下降(p＜0.05)，說(shuō)明鞣花酸溶解達(dá)到平衡，增加溶劑體積不能使鞣花酸繼續(xù)溶解甚至減少，所以選擇液料比20∶1進(jìn)行后續(xù)研究。

圖5 液料比對(duì)樹(shù)莓鞣花酸提取量的影響Fig.5 Effect of liquid to material ratio on the content of ellagic acid in raspberry

2.2.5 微波功率對(duì)鞣花酸提取量的影響 從圖6可以看出，當(dāng)微波功率在200～400 W時(shí)，樹(shù)莓鞣花酸提取量隨著微波功率的增大而增多，此時(shí)微波破壞樹(shù)莓細(xì)胞壁的效果與微波功率成正比。當(dāng)微波功率達(dá)到400 W時(shí)，樹(shù)莓鞣花酸提取量達(dá)到峰值82.50 mg/100 g隨著微波功率的繼續(xù)增大，樹(shù)莓鞣花酸提取量顯著下降(p＜0.05)，可能是因?yàn)槲⒉üβ蔬^(guò)大會(huì)降解和破壞鞣花酸［25］，所以選擇微波功率為400 W適宜。

圖6 微波功率對(duì)樹(shù)莓鞣花酸提取量的影響Fig.6 Effect of microwave power on the content of ellagic acid in raspberry

2.3 響應(yīng)面優(yōu)化試驗(yàn)結(jié)果

2.3.1 樹(shù)莓鞣花酸提取工藝響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)方案與結(jié)果 利用Design－Expert軟件對(duì)表2數(shù)據(jù)進(jìn)行多元回歸擬合。得到鞣花酸提取量二次多項(xiàng)回歸模型為:

Y=84.00－1.64A+0.27B+0.16C－1.14D+1.79E+2.09AB+0.3AC－2.00AD－0.010AE+0.25BC+0.73BD－0.84BE－1.15CD－1.00CE+1.49DE－4.79A2－5.16B2－11.80C2－5.55D2－8.49E2

表2 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果Table 2 Response surface experiment design and results

續(xù)表

從表3的方差分析，模型方程p＜0.0001，說(shuō)明以響應(yīng)值(鞣花酸提取量)建立的回歸模型極顯著。相關(guān)系數(shù)R2=0.9505，修正系數(shù)R2adj=0.9092，表明模型的實(shí)測(cè)值與預(yù)測(cè)值吻合良好，失擬項(xiàng)p＞0.05，失擬不顯著，表明不可忽略的因素對(duì)試驗(yàn)結(jié)果沒(méi)太大影響。提取時(shí)間和微波功率對(duì)鞣花酸含量的線性影響極顯著(p＜0.01)，液料比對(duì)鞣花酸提取量的線性影響顯著(p＜0.05)。二次項(xiàng)中提取時(shí)間、提取溫度、乙醇濃度、液料比和微波功率對(duì)鞣花酸提取量的曲面效應(yīng)極顯著(p＜0.01)。在相互作用中，提取時(shí)間和提取溫度顯著(p＜0.05)，提取時(shí)間和液料比顯著(p＜0.05)。該方程與試驗(yàn)結(jié)果吻合較好，可用于鞣花酸提取試驗(yàn)的分析和預(yù)測(cè)。由F檢驗(yàn)可知，影響Y的主要因素依次為微波功率＞提取時(shí)間＞液料比＞提取溫度＞乙醇濃度。

表3 擬合二次多項(xiàng)式模型的方差分析Table 3 Analysis of variance for the quadratic polynomial model

2.3.2 因素的交互作用分析 利用Design－Expert 7.0.0軟件對(duì)二次回歸模型進(jìn)行規(guī)范的分析，所得到的響應(yīng)面及等高線圖可以很好地反映兩個(gè)因素的協(xié)同作用對(duì)鞣花酸提取量的影響。

從圖7、圖8可以清楚的了解到各因素交互作用的響應(yīng)面分析結(jié)果，從中可以直觀的看出提取時(shí)間和提取溫度的相互作用對(duì)鞣花酸提取影響顯著，表現(xiàn)在其等高線圖為橢圓形;同時(shí)提取時(shí)間和液料比的相互作用對(duì)鞣花酸的提取影響也顯著。

圖7 提取時(shí)間和提取溫度相互作用對(duì)樹(shù)莓鞣花酸提取量的響應(yīng)面與等高線圖Fig.7 Response surface and contour map manifesting the interactive results of extraction time and temperature on the extraction amount of raspberry ellagic acid

圖8 提取時(shí)間和液料比相互作用對(duì)樹(shù)莓鞣花酸提取量的響應(yīng)面與等高線圖Fig.8 Response surface and contour map manifesting the interactive results of extraction time and liquid to material ratio on the extraction amount of raspberry ellagic acid

2.3.3 驗(yàn)證試驗(yàn) 根據(jù)響應(yīng)面分析軟件得出最佳工藝條件為:提取時(shí)間1.84 min，提取溫度59.81℃，乙醇濃度50%、液料比19.38∶1、微波功率410.08 W，此條件下，鞣花酸提取量為84.26 mg/100 g。為了便于實(shí)驗(yàn)操作，提取條件設(shè)為:提取時(shí)間1.8 min，提取溫度60℃，乙醇濃度50%，液料比19∶1，微波功率411 W，在此條件下進(jìn)行3組平行實(shí)驗(yàn)，鞣花酸提取量為(82.75±1.05)mg/100 g，由于鞣花酸的天然活性，因此具有重要的保健價(jià)值。相差百分率為1.80%，實(shí)際結(jié)果與理論預(yù)測(cè)吻合度很高，因此本實(shí)驗(yàn)得到的最優(yōu)條件準(zhǔn)確可靠有參考應(yīng)用價(jià)值。目前關(guān)于鞣花酸的測(cè)定方法有紫外分光光度法［26］、高效毛細(xì)管電泳法［27］、返滴定法等，本實(shí)驗(yàn)采用的高效液相色譜法(HPLC)具有許多特點(diǎn)，如簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確［28－30］。李曉平［31］、張成濤等［32］用高效液相色譜法得到的樹(shù)莓鞣花酸的提取量分別為223 mg/kg和43.5 mg/g，與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果存在差異，可能是因?yàn)榉N植環(huán)境、品種、種植氣候等的不同造成的。

2.4 不同提取方法鞣花酸提取量與抗氧化活性比較

微波輔助溶劑提取樹(shù)莓鞣花酸量顯著高于傳統(tǒng)鹽酸水解提取所得提取量(p＜0.05)，微波輔助溶劑提取樹(shù)莓鞣花酸量為(82.75±1.05)mg/100 g，提高了20.42%(圖9)。自由基與人體許多疾病的發(fā)生有關(guān)，當(dāng)體內(nèi)自由基過(guò)多時(shí)，自由基清除劑就顯得非常重要，因而進(jìn)一步比較其總還原能力、DPPH自由基和羥自由基的清除能力結(jié)果見(jiàn)圖10所示。微波輔助溶劑所提取到的樹(shù)莓鞣花酸對(duì)羥自由基、DPPH自由基的清除能力顯著高于傳統(tǒng)鹽酸水解(p＜0.05)。這可能與兩種不同提取方法所得到酚類成分有關(guān)，多酚單體之間抗氧化相互作用與混合物中多酚的結(jié)構(gòu)類型、數(shù)量和比例有關(guān)［33］，因此表現(xiàn)出的抗氧化性能不同。同時(shí)微波提取的時(shí)間相對(duì)傳統(tǒng)方法提取時(shí)間短暫，與傳統(tǒng)鹽酸水解提取法［20］和超聲輔助提取法［14］相比，鞣花酸提取量高、提取溶劑用量少，更好地保護(hù)了樹(shù)莓鞣花酸的抗氧化活性，為進(jìn)一步深入樹(shù)莓鞣花酸生物活性功能以及相關(guān)功能性食品開(kāi)發(fā)提供了一定研究基礎(chǔ)。

圖9 不同提取方法提取的樹(shù)莓鞣花酸提取量比較Fig.9 Comparison of extraction amount of ellagic acid extracted by different extraction methods

圖10 不同提取方法提取的紅樹(shù)莓鞣花酸清除羥自由基和DPPH自由基能力比較Fig.10 Comparison of scavenging activities of hydroxyl radicals and DPPH radicals extracted from ellagic acid extracted by different extraction methods

3 結(jié)論

本研究利用微波輔助提取樹(shù)莓鞣花酸，通過(guò)響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)鞣花酸的提取條件進(jìn)行優(yōu)化，影響樹(shù)莓鞣花酸的主要因素依次為微波功率＞提取時(shí)間＞液料比＞提取溫度＞乙醇濃度。得出最佳提取工藝條件為:提取時(shí)間1.8 min，提取溫度60℃，乙醇濃度50%，液料比19∶1，微波功率411 W，得到鞣花酸提取量為(82.75±1.05)mg/100 g，高于傳統(tǒng)鹽酸水解法在最佳提取條件下所測(cè)樹(shù)莓鞣花酸提取量，相差百分率為1.80%，實(shí)際結(jié)果與理論預(yù)測(cè)高度吻合，因此本實(shí)驗(yàn)得到的最優(yōu)條件準(zhǔn)確可靠有參考應(yīng)用價(jià)值。通過(guò)微波輔助溶劑提取法較傳統(tǒng)鹽酸水解提取法樹(shù)莓鞣花酸抗氧化活性對(duì)比發(fā)現(xiàn)，微波輔助溶劑法所得鞣花酸對(duì)羥自由基清除能力、清除DPPH自由基能力都顯著高于傳統(tǒng)鹽酸水解法所得鞣花酸對(duì)羥自由基清除能力、清除DPPH自由基能力，說(shuō)明微波輔助溶劑提取法，不但提取時(shí)間短暫，提取溶劑用量少，而且更好地保護(hù)了樹(shù)莓鞣花酸的抗氧化活性，可為樹(shù)莓鞣花酸工業(yè)生產(chǎn)提供一定參考。