王中月，于洪升

（青島大學(xué)附屬醫(yī)院 腫瘤科，山東 青島 266000）

0 引言

結(jié)直腸癌的發(fā)病率位居我國(guó)乃至全球各類惡性腫瘤第三位[1]，死亡率也逐年攀升，嚴(yán)重影響人們的幸福指數(shù)、生命健康。雖然現(xiàn)有的治療手段已取得一定療效，但由于其惡性程度高，侵襲轉(zhuǎn)移性強(qiáng)，復(fù)發(fā)隱匿性高，其預(yù)后欠佳。因此有效的早期篩查、診斷、復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)及盡早干預(yù)治療是CRC防治的關(guān)鍵。目前發(fā)現(xiàn)Septin9 基因與胃癌、卵巢癌、血液系統(tǒng)腫瘤等多種惡性腫瘤相關(guān)。最新研究表明，基于Septin9基因的高度甲基化是結(jié)直腸癌的重要表觀生物遺傳學(xué)標(biāo)志之一，使結(jié)直腸癌診療跨入新的里程碑?，F(xiàn)就Septin9基因的結(jié)構(gòu)與生物學(xué)功能、致瘤機(jī)制及其在結(jié)直腸癌篩查、早期診斷、術(shù)后監(jiān)測(cè)等方面的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 SEPT9基因與結(jié)直腸癌

SEPT9基因在結(jié)直腸癌中具有抑癌作用，隨著對(duì)SEPT9基因的深入研究，發(fā)現(xiàn)SEPT9基因檢測(cè)在結(jié)直腸癌的早期篩選和診斷中具有顯著的優(yōu)越性，在復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)與預(yù)測(cè)療效等方面也表現(xiàn)出巨大的潛力。

1.1 結(jié)直腸癌篩查與診斷

CRC篩查主要有內(nèi)鏡檢查、影像學(xué)檢查、血清腫瘤標(biāo)記物檢測(cè)、糞便潛血試驗(yàn)（FOBT）等，這些手段又各有缺點(diǎn)，F(xiàn)OBT易受到食物、藥物等因素的影響且糞便采集不便，導(dǎo)致假陽(yáng)性率較高；血清腫瘤標(biāo)記物檢測(cè)的敏感性和特異性較低；CT結(jié)腸成像雖然無(wú)創(chuàng)，但有輻射暴露，且其敏感性與病灶大小有關(guān)，對(duì)病灶直徑＜1 cm者的敏感性低；結(jié)直腸鏡屬于侵入性檢查，有很多檢查禁忌證，腸道準(zhǔn)備要求高且易產(chǎn)生腸穿孔、感染等并發(fā)癥，患者依從性差，復(fù)診困難。目前急需一種簡(jiǎn)便、無(wú)創(chuàng)或微創(chuàng)、快速、重復(fù)性好、特異性及敏感性高的監(jiān)測(cè)手段,SEPT9基因檢測(cè)應(yīng)運(yùn)而生，成為結(jié)直腸癌早期篩查、診斷的可靠檢測(cè)技術(shù)。

YAN等[2]的研究顯示，mSEPT9檢測(cè)和FOBT篩查CRC的兩者聯(lián)合診斷靈敏度可達(dá)88.7%，mSEPT9基因檢測(cè)在CRC診斷中具有準(zhǔn)確性高、取樣方便且無(wú)創(chuàng)、檢測(cè)快速等優(yōu)點(diǎn)，與 FOBT聯(lián)合應(yīng)用能提高CRC的診斷效能，可在結(jié)直腸癌早期篩查中作為臨床實(shí)踐的新方案[3]。

最近的一項(xiàng)研究顯示，63%的CRC篩查的受試者拒絕接受結(jié)腸鏡檢查，接受了非侵入性篩查試驗(yàn)，其中83%選擇了SEBT9血液試驗(yàn)。SEPT9檢測(cè)還可應(yīng)用于高風(fēng)險(xiǎn)癥狀群體的機(jī)會(huì)性篩查，表現(xiàn)出比平均風(fēng)險(xiǎn)人群更高的陽(yáng)性率。在平均無(wú)癥狀人群中，據(jù)報(bào)道SEPT9測(cè)定靈敏度較低（SEPT9測(cè)定的為68%，F(xiàn)IT檢測(cè)為79%，F(xiàn)IT-DNA試驗(yàn)為92.3%），特異性較低（SEPT9測(cè)定的為80%，F(xiàn)IT 檢測(cè)為94%，F(xiàn)IT-DNA試驗(yàn)為86.6%）。在無(wú)癥狀人群篩查中，與血液SEPT9測(cè)定相比，F(xiàn)IT和FIT-DNA測(cè)試略勝一籌。Wu等人報(bào)道了首次基于PCR的SEPT9檢測(cè)的機(jī)會(huì)性篩查，顯示靈敏度為76.6%，特異性為95.9%，陽(yáng)性率為25.8%（RESEPT研究）[4]。宋等人[5]最近報(bào)道了另一個(gè)使用Epi proCo- 2.0 CE檢測(cè)的機(jī)會(huì)性篩查研究，并且顯示敏感性為75.1%，特異性為97.1%（2/3算法），并且其中0期，I期，II期，III期和IV期的敏感性分別為52.4%,54.8%,82.9%,78.6%和86.7%，證明了該測(cè)定可用于早期CRC的機(jī)會(huì)性篩選。

SEPT9基因甲基化在腸癌組織和外周血中高表達(dá)，而在正常結(jié)直腸粘膜或者其他病變結(jié)直腸粘膜中少量表達(dá)，且在CRC的癌前病變患者( 如結(jié)直腸瘤與息肉) 中的檢出率也較低。Warren等[6]研究也發(fā)現(xiàn)，在結(jié)直腸腺瘤與息肉組中，Septin9基因甲基化的陽(yáng)性檢出率分別為11.5%和11.2%，與正常對(duì)照組(10%和9.1%)相比，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2 SEPT9基因甲基化與結(jié)直腸癌患者臨床病理特征之間的關(guān)系

Lee等人報(bào)道，結(jié)直腸癌各期的SEPT9基因甲基化的陽(yáng)性檢出率分別為50%，70%，70%，100%，可見SEPT9基因甲基化水平可用來(lái)指導(dǎo)臨床分期，并與腫瘤惡性程度呈正相關(guān)。此外，Lee等人首次報(bào)道：9例血液SEPT9甲基化陽(yáng)性的患者在術(shù)后118天后有8例（88.9%）表現(xiàn)為陰性，而陽(yáng)性的患者有局部復(fù)發(fā)、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移傾向及較低的無(wú)病生存率。另外，他們對(duì)8位CEA和CA199陰性的患者進(jìn)行了血液SEPT9檢測(cè)，其中5位在手術(shù)前SEPT9檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，在手術(shù)后顯示陰性結(jié)果。他們進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，在兩個(gè)化療周期后，血漿SEPT9甲基化水平下降，這與CT影像顯示腫塊縮小的表現(xiàn)是一致的。可見，SEPT9甲基化水平與CRC的發(fā)展密切相關(guān)，并且可以用作監(jiān)測(cè)癌癥進(jìn)展和治療效果的標(biāo)志物。

研究認(rèn)為結(jié)直腸癌患者中外周血甲基化 SEPT 9基因含量會(huì)隨晝夜節(jié)律發(fā)生變化，因此樣本時(shí)間不同，檢測(cè)結(jié)果也有所不同。在正常對(duì)照的血漿樣品中，SEPT9甲基化可以在24小時(shí)內(nèi)的任何時(shí)間點(diǎn)都不被檢測(cè)到。在腺瘤標(biāo)本中，觀察到SEPT 9陽(yáng)性只有在一天的休息時(shí)間（在午夜0∶00）檢測(cè)到。77.7%的結(jié)直腸癌患者的septin甲基化陽(yáng)性率可在6∶00、12∶00和18∶00被檢測(cè)到。與腺瘤相似，I期癌癥病例，SEPT9陽(yáng)性僅在午夜才檢測(cè)到。II-IV期在所有時(shí)間點(diǎn)均顯示SEBT9陽(yáng)性。有趣的是，在使用1/3算法的前提下，大多數(shù)結(jié)直腸癌患者的最高SEPT9甲基化水平是在午夜被發(fā)現(xiàn)（比例占100%），在其他時(shí)間點(diǎn)如 6∶00、12∶00 和 18∶00 占 77.7%。根據(jù) 2/3種算法，所有CRC病例中SEPT 9陽(yáng)性率最高也是出現(xiàn)在午夜占77.7%。其他時(shí)間點(diǎn)的陽(yáng)性率為66.6%。

基于血液的SEPT9基因甲基化測(cè)定，各種算法（1/3,2/3,1/2和1/1 algorithms，1/3算法即3次PCR反應(yīng)中有1次陽(yáng)性，即可判定SEPT9基因甲基化陽(yáng)性；上述算法依次類推）在CRC檢測(cè)或篩選中的敏感性和特異性：1/2算法展示的靈敏度最低（0.59），具有可接受的特異性（0.91）?？梢杂^察到2/3算法提供了最好的整體表現(xiàn)，而1/3算法表現(xiàn)出最佳的靈敏度，SEPT9甲基化、每個(gè)分期的陽(yáng)性檢出率與結(jié)直腸癌的惡性程度有關(guān)，臨床分期越晚，陽(yáng)性檢出率越高，各種算法對(duì)各個(gè)分期的檢出率的影響又有所不同，表現(xiàn)為 1/3＞2/3＞1/1＞1/2[7]。

Tóth等[8]的研究結(jié)果顯示，CRC從I期到IV期，SEPT9 基因甲基化水平逐漸增高，而 SEPT9的 mRNA和蛋白表達(dá)水平降低，對(duì)CRCⅡ期的癌細(xì)胞進(jìn)行逆甲基化處理，導(dǎo)致SEPT9基因的表達(dá)升高，表明SEPT9 基因 DNA 發(fā)生甲基化可導(dǎo)致 SEPT9 mRNA和蛋白表達(dá)降低，這可能會(huì)成為抗腫瘤靶向治療的新熱點(diǎn)。

2 結(jié)論

在結(jié)直腸癌的癌前病變中外周血 SEPT9基因甲基化陽(yáng)性檢出率較低，但在是結(jié)直腸癌早期篩查和診斷方面已占有一席之地，其有可能成為結(jié)直腸癌治療效果、復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的監(jiān)測(cè)指標(biāo),但是需要我們后期開展大量的臨床研究予以驗(yàn)證其在結(jié)直腸治療和監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值。