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      PI3K、ERK、IGF-1R和ER蛋白 在宮頸癌細(xì)胞株中的表達(dá)特征分析

      2019-02-09 20:52:59衛(wèi)
      關(guān)鍵詞:印跡細(xì)胞株免疫組化

      張 衛(wèi)

      (無(wú)錫市人民醫(yī)院 婦科,江蘇 無(wú)錫 214023)

      宮頸癌是一種高發(fā)性惡性腫瘤疾病,給患者的生命健康造成嚴(yán)重的威脅[1],本文為了探究PI3K、ERK、IGF-1R和ER蛋白在宮頸癌細(xì)胞株中的表達(dá)特征與宮頸癌之間的關(guān)系進(jìn)行了研究,先報(bào)道如下:

      1 資料與方法

      1.1 一般資料

      選取我院于2017年1月~2019年1月收集的正常宮頸組織、CIN以及宮頸癌組織標(biāo)本各30例,同時(shí)體外培養(yǎng)C33a、HaCaT、以及SiHa三種特定宮頸癌細(xì)胞株作為本次的研究對(duì)象。正常宮頸患者年齡為25~65歲,平均年齡為(42.13±1.24)歲,CIN患者年齡為25~64歲,平均年齡為(41.14±1.48)歲,宮頸癌患者年齡為25~66歲,平均年齡為(42.24±1.36)歲,三組患者年齡之間無(wú)差異性。選取標(biāo)本均被進(jìn)行任何放化療治療,本次研究經(jīng)過(guò)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

      1.2 方法

      1.2.1 儀器和試劑

      宮頸癌細(xì)胞株C33a(HPV—)、HaCaT(永生性人類角質(zhì)細(xì)胞)、以及SiHa(HPV+)均購(gòu)自權(quán)威性細(xì)胞庫(kù),PI3K、ERK、IGF-1R 和 ER抗體均購(gòu)自美國(guó)SANTA公司。試驗(yàn)所用培養(yǎng)基、以及青霉素合成劑等均購(gòu)自專業(yè)性生物公司。孵化箱、蛋白質(zhì)印跡用電泳儀、生物安全柜均購(gòu)自美國(guó)[2]。

      1.2.2 檢測(cè)方法

      采用免疫組化SP法檢測(cè)正常宮頸組織、CIN以及宮頸癌組織標(biāo)本中的PI3K、ERK、IGF-1R和ER蛋白陽(yáng)性率,采用蛋白免疫印跡技術(shù)檢測(cè)C33a、HaCaT、以及SiHa三種特定宮頸癌細(xì)胞株中蛋白表達(dá)水平,分析其表達(dá)特性,探究其與宮頸癌之間的相關(guān)性[3]。

      1.3 評(píng)價(jià)指標(biāo)

      對(duì)免疫組化SP法和蛋白免疫印跡技術(shù)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行觀察和統(tǒng)計(jì),比較正常宮頸組織、CIN以及宮頸癌組織標(biāo)本中蛋白陽(yáng)性率以及其在不同宮頸癌細(xì)胞株中的表達(dá)水平。

      1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

      采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)本次研究的研究結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和分析,運(yùn)用t檢驗(yàn)方法,并采用x2進(jìn)行檢驗(yàn)。當(dāng)P<0.05時(shí),表示兩組數(shù)據(jù)之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

      2 結(jié) 果

      2.1 不同組織中的陽(yáng)性表達(dá)率

      對(duì)免疫組化SP法檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析后,得出:正常宮頸組織中的陽(yáng)性檢出率為16.67%(5/30)、CIN陽(yáng)性檢出率為33.33%(10/30)以及宮頸癌組織標(biāo)本為73.3%(22/30),其中各組之間P<0.05,差異性顯著。表明PI3K、ERK、IGF-1R和ER在宮頸癌組織中的含量高于正常組織,其與宮頸癌的發(fā)生呈正相關(guān)。

      2.2 不同宮頸癌細(xì)胞株中的表達(dá)水平

      對(duì)蛋白免疫印跡技術(shù)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析后,得出:在SiHa細(xì)胞中的表達(dá)水平明顯高于C33a和HaCa中的水平,其中P<0.05;ER蛋白在C33a中的表達(dá)水平高于SiHa細(xì)胞中的水平,其中P<0.05,差異性顯著。

      3 討 論

      本文通過(guò)分析蛋白在宮頸癌細(xì)胞株中的表達(dá)特征,進(jìn)行了本次研究,研究發(fā)現(xiàn):PI3K、ERK、IGF-1R蛋白在正常宮頸組織、CIN以及宮頸癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為16.67%、33.33%和73.3%(P<0.05);PI3K、ERK、IGF-1R蛋白在SiHa細(xì)胞中的表達(dá)水平明顯高于C33a和HaCa中的水平,ER蛋白在C33a中的表達(dá)水平高于SiHa細(xì)胞中的水平(P<0.05)。

      綜上所述,PI3K、ERK、IGF-1R和ER蛋白表達(dá)水平在三類細(xì)胞中的表達(dá)水平存在差異性,宮頸癌的發(fā)生是共同作用的結(jié)果。

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