1.GUO P,WANG Z,WANG Q,LIU H W,ZHANG Y S,XU H Y,ZHAO P.Fibroinase and its physiological inhibitors involved in the regulation of silk gland development in the silkworm,Bombyx mori.Insect Biochemistry and Molecular Biology.DOI:10.1016/j.ibmb.2019.01.003(2019)
[題 目]纖維蛋白酶及其參與家蠶絲腺發(fā)育調(diào)控生理抑制功能研究
[摘 要]纖維蛋白酶是一種早期在家蠶絲腺中鑒定出的組織蛋白酶L-半胱氨酸蛋白酶,在家蠶化蛹前期絲腺經(jīng)歷細(xì)胞凋亡和重塑時表現(xiàn)出高降解活性。西南大學(xué)趙萍研究小組在體外重組表達(dá)了纖維蛋白酶原并將其激活。結(jié)果表明纖維蛋白酶在pH 4.0、42℃條件下顯示出最佳水解活性。該研究小組還發(fā)現(xiàn)了一種生理抑制劑——家蠶半胱氨酸蛋白酶抑制劑(BCPI),BCPI對纖維蛋白酶具有強(qiáng)烈的抑制作用,抑制反應(yīng)是由非共價復(fù)合物的形成引起的。這與之前報道的絲氨酸蛋白酶抑制蛋白18(Serpin18)抑制纖維蛋白酶的方式不同。表達(dá)譜和免疫定位分析表明,纖維蛋白酶通過降解絲蛋白和參與絲腺特定位置的凋亡/重塑來調(diào)控絲腺發(fā)育。此外,纖維蛋白酶及其抑制劑BCPI和Serpin18的時期表達(dá)譜的比較分析表明,這些抑制劑通過調(diào)節(jié)從5齡到早期上蔟階段的纖維蛋白酶的活性來參與絲腺發(fā)育。這些發(fā)現(xiàn)提高了研究學(xué)者對絲腺發(fā)育中蛋白酶的調(diào)節(jié)機(jī)制及其抑制劑的認(rèn)識。
(張碧麗 整理)
2.MATSUMOTO Y,SEKIMIZU K.Silkworm asanexperimentalanimaltoresearchforfungalinfections.Microbiol Immunol.DOI:10.1111/1348-0421(2019)
[題 目]以家蠶作為實驗動物的真菌感染研究
[摘 要]以家蠶作為實驗動物具有飼養(yǎng)成本低以及所觸及的道德問題小等優(yōu)點。目前已經(jīng)建立了具有致病細(xì)菌的家蠶感染模型,通過大規(guī)模體內(nèi)篩選可用于鑒定編碼毒力因子的基因。這篇綜述介紹了家蠶感染模型研究的最新進(jìn)展,以闡明真菌感染的機(jī)制。已經(jīng)建立的酵母型真菌家蠶感染模型有白色念珠菌(Candida albicans)、熱帶假絲酵母(Candida tropicalis)、光滑念珠菌(Candida glabrata)和新型隱球菌(Cryptococcus neoformans);絲狀真菌家蠶感染模型有煙曲霉(Aspergillus fumigatus)、須癬毛癬菌(Arthroderma vanbreuseghemii)、苯黑末節(jié)皮真菌(Arthroderma benhamiae)、犬小孢子菌(Microsporum canis)、紅色毛癬菌(Trichophyton rubrum)和米根霉(Rhizopus oryzae)。研究者概述了使用家蠶感染模型的好處以及識別微生物(如真菌)致病性基因的策略。
(張碧麗 整理)
3.JIANG T,CHEN Y,TAN Z,LI J,QIAN P,TANG S,SHEN X.Expression analysis and functional identification of several genes related to diapause inBombyx mori.Dev Growth Differ.DOI:10.1111/dgd.12589.(2019)
[題 目]家蠶滯育相關(guān)基因的表達(dá)分析及功能鑒定
[摘 要]滯育是昆蟲用于適應(yīng)環(huán)境條件極端變化的重要特征。二化性家蠶的胚胎滯育是由母代在胚胎階段經(jīng)歷的環(huán)境條件決定的。如果它們在25℃以及自然光照條件下孵育,它們的后代將會是滯育的。如果它們在17℃以及全黑暗條件下孵育,它們的后代將是非滯育的。滯育的分子機(jī)制尚不清楚。在研究中,江蘇大學(xué)的蔣濤等人分析了與碳水化合物代謝相關(guān)的兩個下調(diào)表達(dá)基因(BGIBMGA003835,BGIBMGA012335)和兩個的上調(diào)表達(dá)基因(BGIBMG012996,BGIBMG002426),通過qRT-PCR驗證了上述4個基因在幼蟲5齡第1 d至蛹第6 d的卵巢和頭部表達(dá)差異。與公布的數(shù)據(jù)一致,這些基因在幼蟲期的表達(dá)量低于蛹期。他們進(jìn)一步分析了這4個基因在不同濃度的滯育激素(DH)處理的BmN細(xì)胞中的表達(dá)量。說明了這些基因的表達(dá)量受DH影響。在將產(chǎn)非滯育卵的雌性蛹中,敲低所選基因使子代卵從注定非滯育轉(zhuǎn)向注定滯育,正如滯育卵的出現(xiàn)。他們的研究為家蠶滯育的分子機(jī)制提供了深入的見解。
(劉露露 整理)
4.HSIEH H Y,GU S H.Expression of calcineurin in relation to the embryonic diapause process in the silkworm,Bombyx mori.Comp Biochem Physiol A MolIntegr Physiol.DOI:10.1016/j.cbpa.2018.10.013.(2019)
[題 目]家蠶胚胎滯育過程相關(guān)的鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶的表達(dá)
[摘 要]鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶(CN)是一個受Ca2+/鈣調(diào)蛋白激活的絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶,其對于調(diào)節(jié)細(xì)胞功能和發(fā)育的Ca2+信號轉(zhuǎn)導(dǎo)有至關(guān)重要的作用。在研究中,作者調(diào)查了家蠶胚胎滯育過程中CN的表達(dá)量變化。免疫印跡分析顯示,家蠶卵中含有59 kDa的催化亞基A(CNA)、19 kDa的調(diào)節(jié)亞基B(CNB)和27 kDa的鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶調(diào)節(jié)蛋白;他們發(fā)現(xiàn)CNA,CNB和鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶調(diào)節(jié)蛋白在滯育過程中的滯育卵和發(fā)育卵中經(jīng)歷了不同的變化。在發(fā)育卵中,CNA和鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶調(diào)節(jié)蛋白的蛋白質(zhì)水平在第一階段很高,然后隨著胚胎發(fā)育逐漸減少。然而,CNB蛋白水平則顯示出逆時間變化,檢測到該蛋白在發(fā)育卵的后期胚胎期水平增加。在滯育卵中,CNA和鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶調(diào)節(jié)蛋白的蛋白質(zhì)水平在產(chǎn)卵后的前8 d保持相對較高的水平,但CNB水平保持在較低水平。CN的酶活檢測結(jié)果表明,在產(chǎn)卵后的前8 d,它在滯育卵中保持低水平。然而,在發(fā)育卵中,CN的酶活在前幾天急劇增加,在胚胎發(fā)育中期達(dá)到高峰,然后在孵化前5 d或6 d大大降低。在滯育和HCl處理的卵中CNB的mRNA表達(dá)水平隨著時間變化也顯示出差異。這些結(jié)果表明,CAN、CNB和鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶調(diào)節(jié)蛋白的蛋白質(zhì)水平、CNB的轉(zhuǎn)錄水平以及滯育卵和發(fā)育卵之間的CN酶活性受到差異調(diào)節(jié),并且這些調(diào)節(jié)的變化可能與家蠶的胚胎滯育過程有關(guān)。
(劉露露 整理)
5.SONG J,JIANG G,ZHANG J,GUO J,LI Z,HAO K,LIU L,CHENG Z,TONG X,DAI F.Metformin prolongs lifespan through remodeling the energy distribution strategy in silkworm,Bombyx mori.Aging(AlbanyNY).DOI:10.18632/aging.101746(2019)
[題 目]二甲雙胍通過改變能量分配策略來延長家蠶的壽命
[摘 要]二甲雙胍是一種臨床上用于治療Ⅱ型糖尿病的降糖藥。除此之外,研究人員也正在研究開發(fā)二甲雙胍是否可以作為潛在的老年保護(hù)劑。西南大學(xué)的SONG等人調(diào)查了二甲雙胍對于壽命的影響和相關(guān)的分子途徑。發(fā)現(xiàn)二甲雙胍延長了雄蠶的壽命但沒有使其體重減輕,這表明二甲雙胍可以通過重塑動物能量分配的策略來延長壽命。與這一想法一致的是,二甲雙胍正是通過減少蠶絲的產(chǎn)量,從而減少了用于該過程的能量,進(jìn)而延長壽命。二甲雙胍還增加了空腹耐受性和抗氧化劑谷胱甘肽的水平,并且還激活了家蠶中單磷酸腺苷-活化蛋白激酶-p53-叉頭盒O類信號通路。這些結(jié)果表明,該途徑中的活性可能通過增加抗逆性和抗氧化能力,同時降低產(chǎn)絲的能量輸出從而有助于二甲雙胍誘導(dǎo)的家蠶延長壽命。結(jié)果還表明,家蠶是一種潛在的動物模型,可以用于評估具有潛在臨床效用的小分子的影響。
(白艷敏 整理)
6.LUAN Y,ZUO W,LI C,GAO R,ZHANG H,TONG X,HAN M,HU H,LU C,DAI F.Identification of genes that control silk yield by RNA sequencing analysis of silkworm(Bombyx mori)strains of variable ailk yield.Int J MolSci.DOI:10.3390/ijms 19123718(2018)
[題 目]RNA測序分析鑒定不同產(chǎn)絲量的家蠶其產(chǎn)絲量的控制基因
[摘 要]絲綢是一種具有很高經(jīng)濟(jì)價值的重要天然纖維,因此對家蠶的遺傳研究是一個重要的研究領(lǐng)域。轉(zhuǎn)錄組分析可為絲綢產(chǎn)量性狀的遺傳研究提供指導(dǎo)。西南大學(xué)的LUAN Y等人使用不同產(chǎn)絲量的多個家蠶品系進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組比較。在多個品系中共鑒定出22個常見的差異表達(dá)基因(DEG),主要參與代謝途徑。其中,通過定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)驗證了7個重要的常見DEGs,結(jié)果與RNA測序產(chǎn)生的結(jié)果一致。關(guān)聯(lián)分析表明,BGIBMGA003330和BGIBMGA005780與繭殼重量顯著相關(guān)并且分別編碼尿苷核苷酶和小熱休克蛋白。對這些基因進(jìn)行功能注釋發(fā)現(xiàn),這些基因在蠶絲腺發(fā)育或絲蛋白合成中起作用。另外,LUAN Y等人把野桑蠶與家蠶一起進(jìn)行了主成分分析(PCA),分析結(jié)果表明,現(xiàn)代育種對蠶絲產(chǎn)量性狀的選擇效果強(qiáng)于野蠶馴化,意味著家蠶育種誘導(dǎo)了與蠶絲產(chǎn)量相關(guān)基因的聚集。
(白艷敏 整理)
7.ZHANG R N,LI C T,REN F F,YE M Q,DENG X J,YI H Y,CAO Y,YANG W Y.Functional characterization of short-type peptidoglycan recognition proteins(PGRPs)from silkwormBombyx moriin innate immunity.Dev Comp Immunol.DOI:10.1016/j.dci.2019.01.015(2019)
[題 目]家蠶先天免疫中短型肽聚糖識別蛋白(PGRPs)的功能研究
[摘 要]肽聚糖識別蛋白(PGRPs)是昆蟲中一類重要的模式識別受體成員之一,該類受體可特異性識別細(xì)菌細(xì)胞壁中的肽聚糖(PGN),參與免疫調(diào)節(jié)和細(xì)菌清除。已有研究報道表明,在黑腹果蠅中,PGRPs具有調(diào)節(jié)先天性免疫應(yīng)答的作用,但是對于鱗翅目昆蟲中PGRPs的功能還知之甚少。華南農(nóng)業(yè)大學(xué)的ZHANGRN等通過對5個短(S)型家蠶PGRPs(BmPGRPs)進(jìn)行克隆和表達(dá),鑒定它們在先天性免疫中的功能。將革蘭氏陽性菌巨大芽孢桿菌或革蘭氏陰性菌大腸桿菌注射至家蠶幼蟲中,S型BmPGRP呈現(xiàn)急速的顯著性上調(diào)表達(dá)。試驗結(jié)果表明,被鑒定的5個BmPGRPs對大腸桿菌和巨大芽孢桿菌具有顯著的凝集活性,且對內(nèi)消旋的二氨基庚二酸肽聚糖(DAP-PGN)具有更為顯著的酰胺酶活性。此外,僅在BmPGRP-S5存在的情況下,家蠶幼蟲中的血細(xì)胞才對兩種細(xì)菌表現(xiàn)出顯著的吞噬作用。
(樓靜候 整理)
8.LI Y,MA S,SUN L,ZHANG T,CHANG J S,LU W,CHEN X X,LIU Y,WANG X G,SHI R,ZHAO P,XIA Q Y.Programmable single and multiplex base-editing inBombyx moriusing RNA-guided cytidine deaminases.G3:Genes,Genomes,Genetics.DOI:10.1534/g3.118.200134(2018)
[題 目]使用RNA介導(dǎo)的胞嘧啶核苷脫氨酶對家蠶進(jìn)行程序化的單堿基或多堿基編輯
[摘 要]使用常規(guī)的基因編輯工具(ZFN、TALEN和CRISPR/Cas9)對基因組進(jìn)行編輯依賴于雙鏈斷裂的過程。近來,一系列不需要DNA雙鏈斷裂就能將胞嘧啶(C)轉(zhuǎn)化為胸腺嘧啶(T)的新工具得到發(fā)展,并迅速應(yīng)用于多種生物當(dāng)中。西南大學(xué)家蠶基因組生物學(xué)國家重點實驗室的LI等展示了在無脊椎動物家蠶中,CRISPR/Cas9相關(guān)的單堿基編輯器(BE3)能夠以較高的頻率將C轉(zhuǎn)化為T。研究者將BE3作為敲除工具,通過堿基編輯誘導(dǎo)的無義突變對外源性和內(nèi)源性基因進(jìn)行滅活,效率高達(dá)66.2%。此外,家蠶基因組水平分析顯示,96.5%的基因有一個或多個可被BE3編輯滅活的靶向位點,每個基因中存在該位點數(shù)量的中值為11。BE3的編輯窗口多達(dá)13個堿基(從gRNA的C1到C13)。特別的是,當(dāng)共轉(zhuǎn)染32個gRNA時,單個DNA分子中多達(dá)14個堿基被同時取代,且發(fā)生插入缺失的頻率僅為0.6%。概括而言,數(shù)據(jù)首次表明,RNA介導(dǎo)的胞嘧啶核苷脫氨酶能夠在無脊椎動物模型中進(jìn)行程序化的單堿基和多堿基編輯。
(樓靜候 整理)