廣東

（本試卷共90分，測試時間40分鐘）

一、選擇題（本大題共6小題，每小題6分，共36分。在每個小題給出的四個選項中，只有一個符合題目要求）

1.放射自顯影技術(shù)是一種用于檢測放射性核素位點廣泛應(yīng)用的技術(shù)，科學(xué)家將細胞與帶有放射性標(biāo)記的氨基酸一起溫育，追蹤胰腺消化酶合成并釋放到胞外空間的生物學(xué)過程。下列關(guān)于該過程的敘述，正確的是 （ ）

A.培養(yǎng)液中添加標(biāo)記的氨基酸通過胞吞的方式被攝入到胰腺細胞內(nèi)

B.出現(xiàn)放射性的細胞器依次為核糖體→內(nèi)質(zhì)網(wǎng)→高爾基體→線粒體

C.帶有放射性標(biāo)記的囊泡可由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體出芽生成

D.胰腺細胞多次分泌消化酶，細胞膜面積和細胞體積逐漸增大

2.關(guān)于圖1生物模型的敘述，A、B、C代表物質(zhì)、結(jié)構(gòu)或細胞的狀態(tài)，①②代表過程，正確的是 （ ）

圖1

A.若①②表示有氧呼吸的第一、二階段，則A可代表葡萄糖，B代表丙酮酸和O2

B.將藥物通過靜脈注射到A時，若B代表組織液，則C只能代表淋巴或血漿

C.在遺傳信息表達時，若A代表基因，則①需要的酶為DNA聚合酶和解旋酶，②需要的原料為氨基酸

D.如果該模型用于描述質(zhì)壁分離與復(fù)原實驗，①過程滴加一定濃度的蔗糖溶液，細胞C的滲透壓降低

3.圖2是某生態(tài)系統(tǒng)中部分食物鏈上的能量流動關(guān)系圖，下列敘述錯誤的是 （ ）

圖2

A.石南固定太陽能a的數(shù)值大于b、d之和

B.d包括石南枯枝敗葉以及雪兔糞便中有機物的能量

C.雪兔未同化的能量不會影響能量在流動中逐漸損耗

D.猞猁的捕食作用在一定程度上促進雪兔種群的發(fā)展

4.小腸上皮細胞頂部的細胞膜上分布著Na+-葡萄糖協(xié)同運輸?shù)鞍?，?dāng)Na+順濃度梯度進入細胞時，葡萄糖與Na+相伴隨逆濃度進入細胞，葡萄糖與Na+分開后再運到細胞外液中，下列敘述正確的是 （ ）

圖3

A.ATP直接為小腸上皮細胞吸收葡萄糖供能

B.A表示葡萄糖載體，允許氨基酸分子通過

C.Na+-K+泵排出Na+到細胞外液時消耗ATP

D.阻斷細胞呼吸，不會影響細胞吸收葡萄糖

5.下列關(guān)于生物變異和進化的敘述，正確的是（ ）

A.遺傳物質(zhì)的結(jié)構(gòu)和數(shù)量一旦發(fā)生改變，會引起生物性狀改變

B.突變和基因重組是不定向的，可為生物進化提供原材料

C.生殖隔離阻止種群的基因交流，導(dǎo)致生物進化形成新物種

D.自然界中許多植物由于受到秋水仙素的影響而形成多倍體

6.正常人的血紅蛋白由兩對珠蛋白（α鏈和β鏈）組成，地中海貧血癥是基因缺陷致使血紅蛋白中的一種或一種以上珠蛋白缺陷或合成不足所致的貧血癥，下列敘述正確的是 （ ）

A.地中海貧血癥的根本原因是患者血紅蛋白的結(jié)構(gòu)存在缺陷，攜帶氧氣能力弱

B.致病基因主要分布在患者的造血干細胞內(nèi)，影響造血干細胞正常增殖分化

C.β珠蛋白基因約有100種以上的致病突變，說明基因突變具有高頻性的特點

D.地中海貧血癥的發(fā)生說明基因通過控制蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)直接控制生物的性狀

二、非選擇題（共54 分。第7 ～ 10 題為必答題，第11～12 題為選答題）

7.（9分）科學(xué)工作者在某自然保護區(qū)內(nèi)放養(yǎng)兩種哺乳動物，并連續(xù)4年調(diào)查其數(shù)量變化，統(tǒng)計其λ值（λ值表示當(dāng)年種群數(shù)量與上一年種群數(shù)量的比值）。回答下列問題：

圖4

（1）甲種群在調(diào)查時間內(nèi)呈_____型增長，在第 3～4 年期間，種群增加的個體數(shù)_______（填“大于”“等于”或“小于”）第2～3年。自然狀態(tài)下，隨著時間的推移，甲種群在數(shù)量增長的過程中，λ 值將逐漸_______。

（2）乙種群在第____________年時種群的密度最大。從種群的數(shù)量特征分析，第3～4年期間，種群的年齡組成為_____，直接決定其種群數(shù)量變化的因素是__________________。

（3）甲、乙的種間關(guān)系可能是_____________。

8.（11分）圖5是高等植物光合作用過程的簡圖，回答下列問題：

圖5

（1）反應(yīng) A 和 B 的具體場所分別是____________。C 代表的物質(zhì)是____________，D 代表物質(zhì)是______________。

（2）在A的膜上含有許多蛋白質(zhì)，能夠捕獲光能的葉綠素和其他輔助色素，例如_____________，都結(jié)合在這些蛋白質(zhì)上，形成鑲嵌在膜上的色素-蛋白質(zhì)復(fù)合體。

（3）除了A過程提供的物質(zhì)外，CO2合成糖類還需的物質(zhì)有____________________。

（4）科學(xué)家提取植物的葉綠體，研究光合作用A反應(yīng)階段的物質(zhì)變化，進行以下實驗，請補充完整實驗的內(nèi)容：___________________________________________

注：2，6-二氯酚靛酚是一種有機染料，處于氧化態(tài)時為藍色，還原態(tài)時為無色。

①_________________________________________________________；

②___________________________________________________________。

9.（8分）美國科學(xué)家詹姆森·艾利森和日本免疫學(xué)家本庶佑發(fā)現(xiàn)癌細胞表面的配體與活化T細胞表面的蛋白結(jié)合（如PDL-1和PD-1），能使T細胞的殺傷功能受到抑制，他們開創(chuàng)了癌癥的“免疫療法”獲得了諾貝爾生理學(xué)獎，圖6是免疫療法的簡圖，回答下列問題：

圖6

（1）有的細胞受到致癌因子的作用，細胞中的遺傳物質(zhì)發(fā)生多次突變而發(fā)展為癌細胞，癌細胞主要具有___________________________等特征。（答出一點即可）

（2）T細胞與APC細胞、癌細胞之間的識別，體現(xiàn)了細胞膜具有_____________的功能。

（3）據(jù)圖6 分析，癌細胞的清除依賴于______________免疫，“免疫療法”的思路是注射藥物_____________與 T 細胞表面的PD-1結(jié)合，解除其殺傷功能的限制，從而使活化的T 細胞增殖分化為_____________，并緊密接觸誘導(dǎo)癌細胞凋亡。

（4）針對 PDL-1 的特異性抗體______________（填“能”或“不能”）作為“免疫療法”的藥物。正常細胞也能夠表達PDL-1，采用“免疫療法”也會引起一些副作用，即T 細胞過度激活損傷正常細胞出現(xiàn)______________________反應(yīng)。

10.（11分）玳瑁貓的毛色含有黑、橙、白三種顏色，控制黑色（B）和橙色（b）基因位于X染色體上，Y染色體上沒有相應(yīng)的等位基因。常染色體上的S基因偶爾表達后會阻止細胞譜系中色素的形成，出現(xiàn)白色。雌貓細胞中的兩條X染色體在發(fā)育過程中有一條會隨機失活，形成巴氏小體。回答下列問題：

（1）在雌貓皮膚的某一區(qū)域的細胞中，如果帶有______染色體失活，則該區(qū)域出現(xiàn)橙色斑塊，該三色玳瑁貓的基因型為_____________________。

（2）黑色雌貓的基因型為__________。

（3）科學(xué)家用一只三色貓（A）作為核供體，用一只黑貓（B）作為代孕母親，克隆出一只小貓（C），但C的花色只有黑色和白色兩種毛色?？寺∝垼–）的毛色沒有橙色斑，對這種現(xiàn)象的解釋是_______________________________________________________________________。

（4）絕大多數(shù)玳瑁貓都是雌性，偶爾也見少數(shù)的玳瑁雄貓，但是生殖能力較低。根據(jù)上述分析，玳瑁雄貓的性染色體組成以及基因型為___________________，這種變異類型屬于___________________________。

11.【生物技術(shù)實踐】（15分）

研究發(fā)現(xiàn)，長期飲酒能使大鼠小腸黏膜需氧菌總數(shù)增加，這些菌類過度生長可增加對外源性乙醇的氧化，導(dǎo)致大量有害的乙酸鹽和乙醛在腸道內(nèi)積累，從而導(dǎo)致機體一系列疾病的發(fā)生。某研究小組從小鼠腸道中篩選出降解乙醛的菌株，并開展研究，回答下列問題：

（1）為了篩選出能夠高效降解乙醛的菌株，在培養(yǎng)基中需要添加蛋白胨、酵母提取物、NaCl等物質(zhì)后，還需要添加___________。

（2）采集小鼠小腸內(nèi)容物，在_________環(huán)境中接種到培養(yǎng)液中，并采用搖床培養(yǎng)的目的是_________________________________。

（3）通過__________法將上述菌液接種到__________培養(yǎng)基上，進一步純化培養(yǎng)。

（4）研究小組收集到菌株TXZ-3，并研究乙醛濃度對TXZ-3的生長及乙醛降解能力的影響。

步驟1：將菌株TXZ-3以2.2%的接種量接種到不同乙醛濃度的 50 mL 基礎(chǔ)鹽液體培養(yǎng)基中，置于 160 r/min 搖床，37℃培養(yǎng) 24 h。

步驟2：培養(yǎng)結(jié)束，以初始菌液濃度為對照，取 1 mL培養(yǎng)后的菌液測吸光值OD600（某種溶液在600 nm波長處的吸光值，吸光值高表示乙醛分解菌的耐受力好），并以此測定各組培養(yǎng)液的____________。

步驟3：分析、繪制實驗結(jié)果曲線圖（如圖7）。

圖7

分析：當(dāng)乙醛的濃度較低或較高時，乙醛的降解率相對較低的原因是____________________________________________________________________________________。

12.【現(xiàn)代生物科技專題】（15分）

回答下列問題：

（1）基因工程的核心步驟是_____________________________。通常轉(zhuǎn)基因利用病毒感染的方法將基因?qū)雱游锛毎鐚锊《?SV40 的基因組進行改造，將________________________導(dǎo)入到病毒基因組的致病區(qū)，再用病毒感染胚胎細胞。動物病毒屬于基因工程的________________________（填工具名稱）。

（2）病毒基因組內(nèi)具有強大的________________元件，能夠保證外源基因的高效表達。如果要獲得全部細胞均為轉(zhuǎn)基因的動物，則應(yīng)該在受精卵的第一次卵裂_________（填“前”或“后”）將外源DNA整合到胚胎細胞中。

（3）科學(xué)家利用轉(zhuǎn)基因CHO-K1細胞生產(chǎn)用于治療腦栓塞、肺栓塞等血栓病的組織型纖溶酶原激活劑。在培養(yǎng)該細胞時，需要提供的營養(yǎng)物質(zhì)有________________________________________________。（答出兩點即可）

（4）非洲爪蟾卵母細胞可用于表達多種動植物蛋白?？茖W(xué)家在研究離子通道、載體和受體等蛋白分子的結(jié)構(gòu)和功能時，將這些蛋白基因?qū)氲椒侵拮嘎涯讣毎麅?nèi)，這些蛋白基因所表達的蛋白質(zhì)可以被爪蟾卵母細胞正確_______，并分泌到______________上。

【參考答案】

1.C【解析】培養(yǎng)液中添加標(biāo)記的氨基酸可被吸收到胰腺細胞內(nèi)，但是氨基酸不屬于生物大分子，其進入胰腺細胞內(nèi)的方式不是胞吞，A錯誤；實驗中出現(xiàn)放射性的細胞器依次為核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體，形成囊泡后最終經(jīng)細胞膜分泌到細胞外，B錯誤；帶有放射性標(biāo)記的囊泡可由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體出芽生成，C正確；胰腺細胞分泌消化酶后，細胞膜面積和細胞體積會暫時性增大，但是細胞膜可以形成囊泡被回收到細胞內(nèi)，維持內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體面積的穩(wěn)定，不會出現(xiàn)多次分泌消化酶后細胞膜面積和細胞體積逐漸增大的現(xiàn)象，D錯誤。

2.D【解析】若①②表示有氧呼吸的第一、二階段，則A可代表葡萄糖，葡萄糖轉(zhuǎn)化為丙酮酸后，丙酮酸與水結(jié)合生成CO2，即B代表丙酮酸和水，A錯誤；將藥物通過靜脈注射到A時，若B代表組織液，則C可以代表淋巴、血漿或細胞內(nèi)液，B錯誤；在遺傳信息表達時，若A代表基因，則B代表mRNA，C代表蛋白質(zhì)，①過程需要的酶為RNA聚合酶，②過程需要的原料為氨基酸，C錯誤；如果該模型用于描述質(zhì)壁分離與復(fù)原實驗，①過程滴加蔗糖溶液，②過程滴加清水，細胞C吸水后，滲透壓降低，D正確。

3.C【解析】石南固定太陽能a除了呼吸消耗，流入消費者和分解者外，還有一部分未被利用，所以a的數(shù)值大于b、d之和，A正確；d表示石南流入分解者的能量，則d包括石南枯枝敗葉以及雪兔糞便中有機物的能量，B正確；雪兔未同化的部分能量會流入分解者，造成能量在流動時逐級遞減，C錯誤；猞猁會捕食老弱病殘的雪兔，在一定程度上能促進雪兔種群的發(fā)展，D正確。

4.C【解析】由圖3可以看出，葡萄糖分子雖然逆濃度梯度被吸收到小腸上皮細胞，但是葡萄糖分子是伴隨Na+順濃度梯度進入細胞的，該過程不消耗ATP，A錯誤；A是細胞膜上運輸葡萄糖的載體，載體具有特異性，不允許氨基酸分子通過，B錯誤；Na+-K+泵排出Na+到細胞外液時，以逆濃度梯度進行，因此需要消耗ATP，C正確；阻斷細胞呼吸，ATP的生成減少，Na+不能正常被排出細胞外，影響小腸上皮細胞吸收Na+，也將影響葡萄糖的吸收，D錯誤。

5.B【解析】如果顯性純合子的某個基因突變?yōu)殡[性基因，或者基因發(fā)生同義突變，這些遺傳物質(zhì)的結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，不一定引起生物性狀改變，A錯誤；突變和基因重組是不定向的，可為生物進化提供原材料，B正確；新物種的形成出現(xiàn)生殖隔離，不是生殖隔離導(dǎo)致新物種的形成，生殖隔離可以阻止種群的基因交流，C錯誤；自然界中許多植物由于受到低溫的影響而形成多倍體，D錯誤。

6.D【解析】地中海貧血癥的根本原因是基因突變，使基因出現(xiàn)缺陷，A錯誤；致病基因分布在患者的全部體細胞內(nèi)，B錯誤；β珠蛋白基因約有100種以上的致病突變，說明基因突變具有不定向性的特點，C錯誤；血紅蛋白中的一種或一種以上珠蛋白缺陷或合成不足會導(dǎo)致地中海貧血癥，血紅蛋白的結(jié)構(gòu)直接由基因決定，該實例說明基因通過控制蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)直接控制生物的性狀，D正確。

7.（9分，除標(biāo)注外每空1分）

（1）“J” 大于 （2分） 減小

（2）3 衰退型 出生率小于死亡率

（3）捕食和競爭 （2分）

【解析】（1）由于甲的λ值為1.5，保持不變，所以甲種群在調(diào)查時間內(nèi)呈“J”型增長。假設(shè)甲的初始種群為100只，則第1年的數(shù)量為100×1.5=150，第2年的數(shù)量為150×1.5=225，第3年的數(shù)量為225×1.5=337.5，第4年的數(shù)量為337.5×1.5=506.25，所以在第3～4年期間，種群增加的個體數(shù)大于第2～3年。自然狀態(tài)下，甲的種群增長將呈“S”型曲線增長，因此隨著時間的推移，λ值將逐漸減小。（2）在0～3年期間，乙種群的λ值大于1，說明其種群數(shù)量不斷增長，到第3年時，λ值等于1，此時種群數(shù)量最大，種群密度也最大。第3～4年期間，乙種群的λ值小于1，說明其種群數(shù)量減少，此時的種群年齡組成為衰退型。由于這兩種動物在自然保護區(qū)內(nèi)，從種群的數(shù)量特征分析，主要是出生率小于死亡率這一因素直接決定其種群數(shù)量的變化。（3）甲、乙均為哺乳動物，到第3年后，甲的數(shù)量增多，乙的數(shù)量減少，所以甲、乙的種間關(guān)系可能是捕食和競爭。

8.（11分，除標(biāo)注外每空2分）

（1）葉綠體類囊體薄膜（或基粒）、葉綠體基質(zhì)

ADP+Pi （1分） NADPH （1分）

（2）類胡蘿卜素（或胡蘿卜素、葉黃素） （1分）

（3）C5、酶

（4）黑暗、無CO2藍色，檢測不到O2

【解析】（1）反應(yīng)A表示光反應(yīng)，具體反應(yīng)場所是葉綠體類囊體薄膜（或基粒），反應(yīng)B表示暗反應(yīng)，具體反應(yīng)場所是葉綠體基質(zhì)；C為合成ATP的原料，所以是ADP+Pi，D由NADP+與H+合成，故D表示NADPH。（2）光合色素除了葉綠素外，還有其他輔助色素，如類胡蘿卜素（胡蘿卜素、葉黃素）。（3）暗反應(yīng)過程中，CO2首先與C5結(jié)合生成C3，C3在ATP和NADPH的作用下被還原成糖類，這些反應(yīng)都需要酶的參與，所以除了A過程提供的物質(zhì)外，CO2合成糖類還需的物質(zhì)有C5、酶。（4）上述研究為光反應(yīng)的過程，表格中的兩組實驗形成對照，對照實驗的條件必須是黑暗、無CO2。在黑暗中，葉綠體不能產(chǎn)生O2和NADPH，所以2，6 -二氯酚靛酚不會被還原，反應(yīng)結(jié)果呈藍色，檢測不到O2。

9.（8分，除標(biāo)注外每空1分）

（1）在適宜條件下能夠無限增殖（或形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生顯著的變化或細胞表面發(fā)生變化）（答案合理即給分）

（2分）

（2）能進行細胞間的信息交流

（3）細胞 anti-PD-1 效應(yīng)T細胞

（4）能 自身免疫

【解析】（1）有的細胞受到致癌因子的作用，細胞中的遺傳物質(zhì)發(fā)生多次突變而發(fā)展為癌細胞，癌細胞主要具有在適宜條件下能夠無限增殖、形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生顯著的變化、細胞表面發(fā)生變化等特征。（2）T細胞與APC細胞、癌細胞之間的識別，體現(xiàn)了細胞膜具有能進行細胞間的信息交流的功能。（3）根據(jù)圖6所示，癌細胞的殺傷依賴于T細胞，故癌細胞的清除依賴于細胞免疫。由題干知，癌細胞表面的配體與活化T細胞表面的蛋白結(jié)合（如PDL-1和PD-1），會使T細胞的殺傷功能受到抑制。由圖6可以看出，免疫療法的思路是注射藥物anti-PD-1與T細胞表面的PD-1結(jié)合，解除其殺傷功能的限制。緊密接觸誘導(dǎo)癌細胞凋亡的細胞是效應(yīng)T細胞。（4）由于癌細胞表面的配體與活化T細胞表面的蛋白結(jié)合（如PDL-1和PD-1），使T細胞的殺傷功能受到抑制，只要藥物能夠阻斷PDL-1和PD-1的結(jié)合，均可作為“免疫療法”的藥物。PDL-1的特異性抗體能與PDL-1結(jié)合，可以作為“免疫療法”的藥物。采用“免疫療法”時，T細胞會被激活，正常細胞與癌細胞一樣表面含有PDL-1，都會被T細胞視為殺傷的對象，引發(fā)機體正常細胞受損的反應(yīng)，稱為自身免疫反應(yīng)。

10.（11分，除標(biāo)注外每空2分）

（1）B基因的X SSXBXb或SsXBXb

（2）ssXBXB

（3）A供體的單個細胞核中，帶有控制橙色毛色（或b）基因的X染色體失活，失活的X染色體不能恢復(fù)其活性，在貓的發(fā)育過程中，不能控制橙色毛色的合成 （3分）

（4） XBXbY （1分） 染色體數(shù)目變異 （1分）

【解析】（1）控制黑色（B）和橙色（b）基因位于X染色體上，雌貓細胞內(nèi)的兩條X染色體會隨機失活，當(dāng)毛色為橙色時，原因是帶有B基因的X染色體失活。根據(jù)“常染色體上的S基因偶爾表達后會阻止細胞譜系中色素的形成，出現(xiàn)白色”可知，三色玳瑁貓的基因型為SSXBXb或SsXBXb。（2）黑色雌貓的毛色沒有出現(xiàn)白色或橙色，則沒有S基因或Xb基因，所以其基因型為ssXBXB。（3）用一只三色貓（A）作為核供體，其基因型為SSXBXb或SsXBXb，克隆出一只小貓（C），但C的花色只有黑色和白色兩種毛色，沒有橙色斑，原因是A供體的單個細胞核中，帶有控制橙色毛色（或b）基因的X染色體失活，失活的X染色體不能恢復(fù)其活性，在貓的發(fā)育過程中，不能控制橙色毛色的合成。（4）玳瑁貓自然狀態(tài)下都是雌貓，即SSXBXb或SsXBXb，正常多色雄貓一般只能是黑白色（S_XBY）、橙白色（S_XbY）。偶爾出現(xiàn)少數(shù)的玳瑁雄貓是由變異造成的，則雄貓的性染色體組成為XBXbY，玳瑁雄貓具有三條性染色體，這種變異類型屬于染色體數(shù)目變異。

11.（15分，除標(biāo)注外每空2分）

（1）一定濃度的乙醛溶液

（2）無菌 （1分） 使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率，富集篩選目標(biāo)菌種，也為菌體提供氧氣 （3分）

（3）平板劃線（或稀釋涂布平板） 固體 （1分）

（4）乙醛降解率 乙醛作為 TXZ-3的唯一碳源，當(dāng)乙醛的濃度很低時，菌體的生長受到抑制；當(dāng)乙醛濃度較高時，可能是由于乙醛本身具有毒性，濃度過高時引起了部分菌體中毒死亡，菌體生長緩慢，從而影響乙醛的降解率 （4分）

【解析】（1）為了篩選出能夠高效降解乙醛的菌株，在培養(yǎng)基中需要添加一定濃度的乙醛溶液作為唯一的碳源。（2）接種微生物時必須在無菌條件下，采用搖床培養(yǎng)的目的是使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率，富集篩選目標(biāo)菌種，也為菌體提供氧氣。（3）純化培養(yǎng)目標(biāo)菌種需要采用固體培養(yǎng)基，接種方法有平板劃線法或稀釋涂布平板法。（4）由實驗結(jié)果曲線圖（圖7）可以看出，實驗檢測的指標(biāo)有吸光值和乙醛降解率。當(dāng)乙醛的濃度較低或較高時，乙醛的降解率相對較低的原因是乙醛作為 TXZ-3的唯一碳源，當(dāng)乙醛的濃度很低時，菌體的生長受到抑制；當(dāng)乙醛濃度較高時，可能是由于乙醛本身具有毒性，濃度過高時引起了部分菌體中毒死亡，菌體生長緩慢，從而影響乙醛的降解率。

12.（15分，除標(biāo)注外每空2分）

（1）基因表達載體的構(gòu)建 目的基因 載體（1分）

（2）啟動子和終止子 前

（3）糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽和微量元素等

（4）修飾加工 細胞膜

【解析】（1）基因工程的核心步驟是基因表達載體的構(gòu)建。質(zhì)粒、動植物病毒是基因工程常用的（運）載體。以動物病毒作為載體，構(gòu)建基因表達載體時，要將目的基因?qū)氩《净蚪M的致病區(qū)，再用病毒感染胚胎細胞。（2）外源基因在受體細胞高效表達時，需要啟動子和終止子的調(diào)控。如果要獲得全部細胞均為轉(zhuǎn)基因的動物，則應(yīng)該在受精卵第一次卵裂前將外源DNA整合到胚胎細胞中。如果在卵裂后將外源DNA整合到胚胎細胞中，則有一部分細胞沒有導(dǎo)入目的基因，這些細胞以后增殖的子細胞不含有目的基因。（3）培養(yǎng)該細胞時，需要提供的營養(yǎng)物質(zhì)有糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽和微量元素等。（4）離子通道、載體和受體等蛋白分子位于細胞膜上，非洲爪蟾卵母細胞在表達其他的蛋白質(zhì)時，可以對這些蛋白質(zhì)進行合成及正確修飾加工，并分泌到細胞膜上。