張力泉 張建華 查玉平 夏劍萍

(1. 當(dāng)陽(yáng)市王店林業(yè)管理站 宜昌 444100；2.當(dāng)陽(yáng)市森防站 宜昌 444100； 3.湖北省林業(yè)科學(xué)研究院 武漢 430075)

白僵菌是一種真菌高效生物殺蟲劑，廣泛應(yīng)用于農(nóng)林害蟲的生物防治，具有安全環(huán)保、專一性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)[1]。有研究表明，白僵菌在10～30 ℃時(shí)均能生長(zhǎng)，5 ℃和35 ℃時(shí)則基本上停止生長(zhǎng)[2]。白僵菌工業(yè)化生產(chǎn)中，白僵菌粉劑的儲(chǔ)存是其中關(guān)鍵之一。目前生產(chǎn)中，白僵菌粉劑儲(chǔ)存溫度一般采取0～4 ℃。本研究擬對(duì)冷庫(kù)不同儲(chǔ)存溫度儲(chǔ)存一定時(shí)長(zhǎng)的白僵菌粉劑的活性影響進(jìn)行試驗(yàn)研究，為進(jìn)一步找到合適的大量白僵菌粉劑存儲(chǔ)溫度提供依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 供試菌種

S16、D16、J16三種白僵菌菌株培養(yǎng)提純的白僵菌高孢粉，來(lái)源于當(dāng)陽(yáng)市興林白僵菌研發(fā)中心。

1.2 方法

儲(chǔ)存白僵菌高孢粉：分別將同一批次的同等質(zhì)量、體積的白僵菌高孢粉塑料袋封存，置于0,1,2,3,4 ℃冷庫(kù)中、常溫地下室儲(chǔ)存4個(gè)月。

儲(chǔ)存溫度對(duì)白僵菌孢子活性影響的測(cè)定：

(1)儲(chǔ)存溫度對(duì)白僵菌生長(zhǎng)影響的測(cè)定：將0,1,2,3,4 ℃冷庫(kù)中、常溫地下室儲(chǔ)存4個(gè)月的白僵菌高孢粉取出復(fù)蘇，每組接種5個(gè)培養(yǎng)皿，26 ℃、PDA培養(yǎng)基中培養(yǎng)7 d。菌株生長(zhǎng)的觀察：菌株在培養(yǎng)1周后，在超凈工作臺(tái)上用解剖鏡觀察其生長(zhǎng)情況。

(2)儲(chǔ)存溫度對(duì)白僵菌活孢率影響的測(cè)定：將0,1,2,3,4 ℃冷庫(kù)中、常溫地下室儲(chǔ)存4個(gè)月的白僵菌高孢粉取出復(fù)蘇，用真菌液體培養(yǎng)基培養(yǎng)24 h后檢測(cè)活孢率。以上兩組試驗(yàn)，每處理設(shè)2個(gè)重復(fù)，以同批次剛產(chǎn)出白僵菌高孢粉活孢率做空白對(duì)照。

統(tǒng)計(jì)分析：測(cè)定各組白僵菌的菌落在培養(yǎng)皿上的直徑、活孢率取平均值。用新復(fù)極差法(SSR)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同儲(chǔ)存溫度對(duì)白僵菌生長(zhǎng)的影響

表1 不同儲(chǔ)存溫度對(duì)白僵菌生長(zhǎng)的影響

由表1可以看出，生長(zhǎng)率(mm/周)統(tǒng)計(jì)結(jié)果：白僵菌在剛生產(chǎn)出來(lái)0m儲(chǔ)存(空白組)，生長(zhǎng)最佳；在0～4 ℃之間，白僵菌均能夠生長(zhǎng)，但以0 ℃和1 ℃低溫儲(chǔ)存條件下，生長(zhǎng)情況相對(duì)較好；其中以地下室常溫(25 ℃)儲(chǔ)存效果最差；此外，不同菌種在同一儲(chǔ)存溫度值下的生長(zhǎng)速度盡管有差異，但基本上差異不大。

2.2 不同儲(chǔ)存溫度對(duì)白僵菌活孢率的影響

表2 不同儲(chǔ)存溫度對(duì)白僵菌孢子活孢率的影響

由表2可見，白僵菌(空白組)在剛生產(chǎn)出來(lái)的活孢率最高；在0～4 ℃之間，白僵菌活孢率高低依次是0,1,4,2,3℃；但是地下室常溫組(25℃)活孢率顯著降低。

3 討論

本研究結(jié)果表明：在0～4 ℃的冷庫(kù)條件下，白僵菌孢子處于干燥、低溫停止生長(zhǎng)的環(huán)境條件，孢子處于休眠狀態(tài)，活性保持完好，置于地下室常溫(25 ℃)，仍處于白僵菌孢子生長(zhǎng)所適條件，白僵菌孢子繼續(xù)萌發(fā)生長(zhǎng)，但因缺少營(yíng)養(yǎng)、其他微生物競(jìng)爭(zhēng)生長(zhǎng)，白僵菌孢子逐漸失去活性甚至衰亡。由此可見，白僵菌如果需要儲(chǔ)存一段時(shí)間，以0～1 ℃儲(chǔ)存效果較好，不適合暴露于地下室常溫(25 ℃)。白僵菌比較適合的儲(chǔ)存溫度為0～1 ℃,而且環(huán)境必須干燥清潔，綜上將白僵菌高孢粉封存后儲(chǔ)存于0～1 ℃冷庫(kù)最為適宜。上述結(jié)論對(duì)進(jìn)一步開展大量存儲(chǔ)白僵菌高孢粉提供了參考依據(jù)。

白僵菌作為我國(guó)新型高效、綠色生物殺蟲劑，具有廣泛的市場(chǎng)前景。多年來(lái)實(shí)踐表明，白僵菌防治松毛蟲、玉米螟等農(nóng)林害蟲具有很好的防效[3-4]。但受限于白僵菌生長(zhǎng)條件，白僵菌高孢粉生產(chǎn)具有很強(qiáng)的季節(jié)性，因此將白僵菌儲(chǔ)存一定時(shí)間，并有效保持其生物防蟲的活性是白僵菌項(xiàng)目研究一個(gè)重要領(lǐng)域。