彭玉鳳，張揚南，黃常洪，陳洪亮，代國知

(郴州市第一人民醫(yī)院檢驗醫(yī)學(xué)中心，湖南郴州 423000)

同型半胱氨酸(homocysteine，HCY)是蛋氨酸循環(huán)的中間產(chǎn)物，它被氧化為同型胱氨酸的同時產(chǎn)生超氧化自由基，對血管內(nèi)皮細(xì)胞造成損傷，促進動脈粥樣硬化、血栓形成等。近年來有研究發(fā)現(xiàn)HCY不僅是心腦血管疾病發(fā)病的重要風(fēng)險因素[1]，還參與腎病代謝綜合癥、神經(jīng)退行性疾病的發(fā)病。此外，它還被認(rèn)為與腫瘤的發(fā)生發(fā)展相關(guān)[2]。HCY通過改變腫瘤患者的凝血、抗凝血和纖溶系統(tǒng)的狀態(tài)，參與腫瘤患者的凝血和抗凝血活動，從而促進腫瘤細(xì)胞的生長和浸潤[3-4]。還有研究[5-7]發(fā)現(xiàn)HCY在小細(xì)胞肺癌、肝癌、乳腺癌、胃腸癌等多種腫瘤中升高。鼻咽癌是常見的頭頸部惡性腫瘤，早期癥狀無特異性易被忽視，且易發(fā)生轉(zhuǎn)移，因而惡性程度高。目前，它主要靠病理活檢確診，缺乏早期診斷的腫瘤標(biāo)志物。黃階勝等[8]研究發(fā)現(xiàn)鼻咽癌患者血清同型半胱氨酸也有不同程度升高。因此，本次研究擬通過檢測鼻咽癌患者和健康體檢人群血清HCY，進一步明確鼻咽癌患者血清HCY水平，分析鼻咽癌患者血清HCY與臨床病理特征的相關(guān)性，為鼻咽癌的早期診斷和預(yù)后判斷等提供參考依據(jù)。

1材料和方法

1.1 研究對象 選取郴州市第一人民醫(yī)院南院2017年3月～2018年3月腫瘤五區(qū)收治的72例初次經(jīng)病理確診未經(jīng)治療且分期明確的鼻咽癌患者作為觀察組，男性48例，女性24例，年齡29～73歲，中位年齡50歲。排除冠心病、腦卒中、糖尿病以及吸煙、喝酒者。同時，選取同期該院體檢中心的81例健康體檢人群作為對照組，男性52例，女性29例，年齡24～69歲，中位年齡47歲，排除高血壓、高血脂、糖尿病及肝腎功能嚴(yán)重異常者。兩組人群年齡、性別均無顯著性差異。

1.2 試劑和儀器 血清HCY檢測試劑購自深圳奧薩醫(yī)療有限公司，檢測儀器為西門子ADVIA2400全自動生化分析儀。

1.3 方法 采集鼻咽癌患者治療前、健康體檢者當(dāng)日空腹靜脈血，均于清晨空腹抽取3.0 ml靜脈血置于分離膠試管中，室溫靜置1 h，經(jīng)3 000 r/min離心10 min，分離血清后，采用循環(huán)酶法上機檢測血清HCY水平。儀器日常維護良好，血清HCY每日室內(nèi)質(zhì)控均在控。嚴(yán)格按試劑說明書要求在西門子ADVIA2400全自動生化分析儀進行參數(shù)設(shè)置和操作。血清HCY正常參考范圍：0～10 μmol/L，如>10 μmol/L為升高。同時，收集所有研究對象的年齡、性別等基本信息；收集觀察組鼻咽癌患者的臨床病例資料，包括腫瘤分化程度、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移情況、臨床分期等。比較兩組人群的血清HCY水平，分析血清HCY水平與鼻咽癌患者臨床病理特征的相關(guān)性。

2結(jié)果

2.1 兩組人群血清HCY水平及HCY異常率的比較 觀察組72例鼻咽癌患者血清HCY水平為14.44±4.24 μmol/L，對照組81例健康體檢人群血清HCY水平為10.96±2.06 μmol/L。72例鼻咽癌患者中HCY升高者有67例，異常率93.05%；81例健康體檢人群有47例，異常率58.02%。鼻咽癌患者血清HCY水平及異常率明顯高于健康體檢人群，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(t=-6.331，P<0.05；t=24.629，P<0.05)。血清HCY在診斷鼻咽癌的敏感度為93.05%(67/72)，特異度為41.98%(34/81)。

2.2 血清HCY水平與鼻咽癌患者臨床病理特征的相關(guān)性分析 血清HCY水平與鼻咽癌患者年齡、性別、腫瘤的分化程度以及臨床分期相關(guān)(P<0.05)，而與鼻咽癌浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移無關(guān)(P>0.05)，見表1。

表1血清HCY水平與鼻咽癌患者臨床病理特征的相關(guān)性分析

臨床特征nHCY(μmol/L)t值P值年齡(歲) 性別 分化程度 浸潤深度 淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移 臨床分期 ≤45>45男女分化癌未分化癌T1+T2T3+T4N0+N1N2+N3M0M1I+IIIII+IV175548241953254732406012205212.14±2.7015.15±4.3915.18±3.1613.13±3.1313.66±4.0316.08±4.2714.47±3.1814.42±4.7414.14±3.5814.68±4.7314.44±4.4314.42±3.2413.75±2.4614.73±4.49-2.673 2.011 -2.303 0.042 0.537 0.238 -2.4090.009 0.048 0.023 0.966 0.593 0.984 0.046

3討 論HCY是人體內(nèi)一種含硫的非必需氨基酸。它可與甲硫氨酸相互轉(zhuǎn)化，在體內(nèi)呈動態(tài)平衡，維持恒定水平。HCY代謝與維生素B12和葉酸緊密相關(guān)[9]。當(dāng)維生素B12和葉酸含量不足時，HCY合成甲硫氨酸受阻，在血液循環(huán)中蓄積，造成高同型半胱氨酸血癥[10]。蓄積的HCY對細(xì)胞、神經(jīng)及基因產(chǎn)生毒性，代謝過程中產(chǎn)生的氧化物和過氧化物損傷血管內(nèi)皮，增強血小板聚集、黏附，影響調(diào)節(jié)基因的表達(dá)，導(dǎo)致上皮細(xì)胞出現(xiàn)增殖性改變；同時HCY生成的硫內(nèi)酯也可使細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)增殖性改變，從而促進腫瘤細(xì)胞的增殖[11-12]。本次研究顯示鼻咽癌患者血清HCY水平明顯高于健康體檢人群，表明鼻咽癌患者體內(nèi)可能存在著甲硫氨酸循環(huán)障礙，鼻咽癌發(fā)生可能與HCY水平升高有關(guān)。我們推測HCY可能通過以下機制參與鼻咽癌的發(fā)生發(fā)展。一方面，HCY影響機體DNA甲基化進程，誘導(dǎo)高甲基化的發(fā)生，影響DNA合成與修復(fù)，促進鼻咽癌腫瘤發(fā)生[13]；另一方面，腫瘤細(xì)胞大量增殖，體內(nèi)需要更多的葉酸和維生素B12參與核酸合成，從而造成葉酸和維生素B12相對缺乏，甲硫氨酸循環(huán)速度減慢，血清HCY在體內(nèi)蓄積，進一步促進鼻咽癌腫瘤的發(fā)展。

國內(nèi)有研究[14]報道血清同型半胱氨酸聯(lián)合其他檢測指標(biāo)對鼻咽癌診斷具有臨床意義。本次研究表明血清HCY在鼻咽癌患者中升高，敏感度可達(dá)93.05%，HCY可作為鼻咽癌輔助診斷的腫瘤標(biāo)志物；但其特異性差為41.98%，對鼻咽癌診斷的實際臨床意義可能有限。

本次實驗發(fā)現(xiàn)血清HCY與鼻咽癌患者年齡、性別相關(guān)，這可能是與人體血清HCY的基礎(chǔ)水平相關(guān)，正常人群中HCY水平受年齡、性別等多種因素影響[15]。在胃癌、結(jié)腸癌[16-17]等其他腫瘤的研究中，發(fā)現(xiàn)HCY與腫瘤的臨床分期相關(guān)，HCY可用于消化道腫瘤的診斷及預(yù)后判斷[18]。本實驗也表明血清HCY水平與鼻咽癌腫瘤分化程度、臨床分期相關(guān)。鼻咽癌患者腫瘤分化程度越低、臨床分期越晚，血清HCY水平也相對越高，提示血清HCY水平可能與鼻咽癌的惡性程度以及腫瘤細(xì)胞的數(shù)量相關(guān)，可用于鼻咽癌療效監(jiān)測及預(yù)后判斷。因此，血清HCY有望成為鼻咽癌腫瘤進展的一個標(biāo)志物。

綜上所述，血清HCY水平與鼻咽癌腫瘤的分化程度以及臨床分期相關(guān)，提示HCY可作為鼻咽癌腫瘤進展的標(biāo)志物，用于鼻咽癌的療效監(jiān)測和預(yù)后判斷。同時，HCY參與鼻咽癌發(fā)病的具體機制暫不明確，進一步檢測鼻咽癌患者體內(nèi)甲硫氨酸的水平，可為其在鼻咽癌中的具體應(yīng)用價值提供更可靠的依據(jù)。