朱萌 孫武剛 南則仲

[摘要] 目的 探討組織MerTK和原發(fā)性胃癌患者臨床病理特點及生存狀況的相關(guān)性。 方法 回顧性分析2012年1月～2018年4月期間我院收治的84例原發(fā)性胃癌患者的臨床資料，依據(jù)患者預(yù)后分為預(yù)后良好組（n=61）和預(yù)后不良組（n=23，包括復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移和死亡）。所有患者均經(jīng)免疫組織化學(xué)法對MerTK的表達情況進行檢測，其中26例患者為MerTK蛋白高表達，58例為MerTK蛋白低表達。比較MerTK不同表達患者的生存狀況，并單因素和多因素Cox分析原發(fā)性胃癌患者死亡的相關(guān)因素。 結(jié)果 預(yù)后不良組患者的高齡[（63.38±8.04）歲/（56.11±7.43）歲]、腫瘤直徑≥5 cm（56.52%/32.79%）、彌漫型（82.61%/29.51%）、浸潤深度為T3（69.58%/45.92%）、腫瘤TNM高分期[Ⅲ期（52.19%/31.14%）、Ⅳ期（34.78%/4.91%）]、存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（86.96%/4.91%）、淋巴結(jié)高分期[N1期（34.78%/29.50）、N2期（34.78%/14.75%）、MerTK高表達（82.61%/11.48%）、N3期（17.39%/3.27%）]發(fā)生率高于預(yù)后良好組（P<0.05）。MerTK表達、腫瘤浸潤深度為T3、腫瘤TNM高分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移為原發(fā)性胃癌患者死亡的危險因素（P<0.05）。MerTK蛋白高表達組患者的復(fù)發(fā)率、轉(zhuǎn)移率和死亡率均高于低表達組患者（P<0.05）。 結(jié)論 MerTK蛋白高表達患者多表現(xiàn)出高齡、腫瘤直徑≥5 cm、彌漫型、浸潤深度為T3、腫瘤TNM高分期、存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、淋巴結(jié)高分期，可將其作為不良預(yù)后的判斷標(biāo)記物。

[關(guān)鍵詞] 原發(fā)性胃癌;組織MerTK;病理特點;生存

[中圖分類號] R737.9? ? ? ? ? [文獻標(biāo)識碼] B? ? ? ? ? [文章編號] 1673-9701（2019）09-0131-04

[Abstract] Objective To investigate the correlation between tissue MerTK and clinical pathological features， survival status in patients with primary gastric cancer. Methods The clinical data of 84 patients with primary gastric cancer admitted in our hospital from January 2012 to April 2018 were retrospectively analyzed. According to the prognosis， the patients were divided into good prognosis group（n=61） and poor prognosis group（n=23， including recurrence， metastasis and death）. The expression of MerTK was detected by immunohistochemistry in all patients. Among them， 26 patients had high expression of MerTK protein and 58 patients had low expression of MerTK protein. The survival status of patients with different expression of MerTK was compared. The related factors of death in patients with primary gastric cancer were analyzed by univariate and multivariate Cox. Results The incidences of advanced age（63.38±8.04） years old/（56.11±7.43） years old），tumor diameter ≥5 cm （56.52%/32.79%）， diffuse type （82.61%/29.51%）， and invasive depth of T3（69.58%/45.92%）， tumor TNM high stage[Ⅲ stage（52.19%/31.14%）， stage Ⅳ （34.78%/4.91%）]， lymph node metastasis （86.96%/4.91%）， high lymph node stage [N1 stage （34.78%/29.50）， N2（34.78%/14.75%）]， MerTK high expression （82.61%/11.48%）， N3 （17.39%/3.27%）] were higher than those of the good prognosis group（P<0.05）. MerTK expression， tumor infiltration depth of T3， tumor TNM high stage and lymph node metastasis were risk factors for death in patients with primarygastric cancer（P<0.05）. The recurrence rate， metastasis rate and mortality of patients with high expression of MerTK protein were higher than those of low expression group（P<0.05）. Conclusion Most of patients with high expression of MerTK protein show advanced age，tumor diameter≥5 cm， diffuse type，invasive depth T3， tumor TNM high stage，lymph node metastasis，high lymph node stage. It can be used as a marker for poor prognosis.

[Key words] Primary gastric cancer; Tissue MerTK; Pathological characteristics; Survival

原癌基因（Protooncogene，Mer）亞家族包括Axl、Tyro3、Mer三個成員，受體酪氨酸激酶分子均包括胞內(nèi)區(qū)、胞外區(qū)、跨膜區(qū)三部分[1]。胞內(nèi)區(qū)是酪氨酸激酶的催化區(qū)域，具有自身磷酸化特點[2]。胞外區(qū)是結(jié)合配體的結(jié)構(gòu)區(qū)域。原癌基因酪氨酸激酶（Proto-oncogene tyrosine kinase，MerTK）MerTK是酪氨酸激酶亞家族的酪氨酸激酶受體，在胃癌、非小細胞癌、結(jié)直腸癌內(nèi)均呈現(xiàn)高表達[3]。臨床中已有研究指出[4-5]，MerTK對胃癌細胞的生長具有促進作用，且能夠抑制細胞凋亡。考慮其高表達與患者預(yù)后可能存在相關(guān)性，本研究對組織MerTK和原發(fā)性胃癌患者臨床病理特點及生存狀況的相關(guān)性進行了探究，以期能為后期臨床診斷和預(yù)后判斷提供參考，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2012年1月～2018年4月期間我院收治的84例原發(fā)性胃癌患者的臨床資料。依據(jù)患者預(yù)后分為預(yù)后良好組（n=61）和預(yù)后不良組（n=23，包括復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移和死亡）。所有患者均經(jīng)免疫組織化學(xué)法對MerTK的表達情況進行了檢測，其中26例患者為MerTK蛋白高表達，58例為MerTK蛋白低表達。其中男53例，女31例。年齡18～87歲，平均（58.51±7.20）歲。平均BMI為（23.04±3.57）kg/m2。平均腫瘤最大直徑為（3.91±1.72）cm。納入標(biāo)準：①于我院順利完成胃癌根治術(shù)治療的原發(fā)性胃癌患者;②年齡≥18周歲的患者;③腫瘤未侵犯鄰近器官或出現(xiàn)遠處轉(zhuǎn)移的患者;④順利完成所有術(shù)后輔助治療的患者;⑤臨床資料和隨訪資料完整的患者。排除標(biāo)準：①姑息性手術(shù)患者;②術(shù)前化療患者;③隨訪過程中因其他原因死亡的患者;④中途失訪或未完成治療的患者。

1.2 方法

術(shù)后即開始對患者進行隨訪，隨訪方式包括門診、電話、短信、微信等，隨訪截止至2018年4月4日?；仡櫺苑治龌颊叩呐R床資料，包括MerTK蛋白表達情況、性別、年齡、腫瘤部位、腫瘤直徑、腫瘤組織學(xué)類型、腫瘤Lauren分型、腫瘤浸潤深度、腫瘤分化程度、腫瘤TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、淋巴結(jié)分期，術(shù)后復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移和死亡狀況。對原發(fā)性胃癌患者死亡的相關(guān)因素進行多因素Cox分析。MerTK蛋白表達情況采用免疫組織化學(xué)法檢測，使用廣譜二抗試劑盒（北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司）、兔抗人MerTK抗體（生產(chǎn)廠家：ABCAM公司）、DAB顯色試劑盒（北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司）。陽性：細胞核和細胞漿出現(xiàn)棕黃色顆粒，依據(jù)染色細胞百分率和染色程度進行評定。著色細胞百分率≥51%為3分，26%～50%為2分，6%～25%為1分，≤5%為0分;著色深為3分，著色適中為2分，著色淡為1分，基本不著色為0分。計算最終得分=染色細胞百分率得分×染色程度得分，最終得分>6分為強陽性（+++），4～6分為中等陽性（++），2～3分為弱陽性（+），0～1分為陰性（-）。其中表達為陰性（-）和弱陽性（+）為低表達，其余為高表達。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS20.0軟件包進行統(tǒng)計學(xué)分析，計數(shù)資料采用χ2檢驗，計量資料采用t檢驗，原發(fā)性胃癌患者死亡的相關(guān)因素進行多因素Cox分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 臨床病理特點比較

預(yù)后良好組與預(yù)后不良組患者的臨床病理特點比較，結(jié)果：兩組患者的年齡、腫瘤直徑、腫瘤Lauren分型、腫瘤浸潤深度、腫瘤TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、MerTK表達、淋巴結(jié)分期比較，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）;預(yù)后不良組患者的高齡[（63.38±8.04）歲/（56.11±7.43）歲]、腫瘤直徑≥5cm（56.52%/32.79%）、彌漫型（82.61%/29.51%）、浸潤深度為T3（69.58%/45.92%）、腫瘤TNM高分期[Ⅲ期（52.19%/31.14%）、Ⅳ期（34.78%/4.91%）]、存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（86.96%/4.91%）、淋巴結(jié)高分期[N1期（34.78%/29.50）、N2期（34.78%/14.75%）、MerTK高表達（82.61%/11.48%）、N3期（17.39%/3.27%）]發(fā)生率高于預(yù)后良好組。見表1。

2.2 原發(fā)性胃癌患者預(yù)后的多因素Cox模型分析

MerTK表達、腫瘤浸潤深度為T3、腫瘤TNM高分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移為原發(fā)性胃癌患者死亡的危險因素（P<0.05）。見表2。

2.3 生存狀況比較

MerTK蛋白高表達組與低表達組患者截止2018年4月4日生存狀況比較，結(jié)果：兩組患者的復(fù)發(fā)率、轉(zhuǎn)移率和死亡率比較，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）;MerTK蛋白高表達組患者的復(fù)發(fā)率、轉(zhuǎn)移率和死亡率均高于低表達組患者。見表3。

3 討論

胃癌起源于胃黏膜上皮，是我國惡性腫瘤發(fā)病率第一的疾病，其發(fā)病呈現(xiàn)明顯的地域性差異，東部沿海地區(qū)和西北地區(qū)人群胃癌的發(fā)病率高于南方地區(qū)，多發(fā)于50歲以上男性[6]。近年來由于生活節(jié)奏的加快、飲食結(jié)構(gòu)的變化等因素，胃癌的發(fā)病展現(xiàn)出年輕化趨勢[7]。多數(shù)患者早期無明顯癥狀，或存在噯氣、上腹不適等非特異性癥狀，診斷率較低，因此多數(shù)患者經(jīng)確診時已為中晚期[8]。臨床給予患者胃癌根治手術(shù)治療雖能獲得短期療效，但術(shù)后復(fù)發(fā)率、轉(zhuǎn)移率和死亡率仍較高，因此對于胃癌患者生存狀況的預(yù)測也成為臨床中的研究重點[9]。MerTK蛋白是跨膜的受體酪氨酸激酶，在人體全身多數(shù)組織中均有表達，且與多項生理功能的進行有關(guān)[10-11]，已有研究指出[12-13]，MerTK在多種腫瘤患者體內(nèi)呈現(xiàn)異常表達，因而本研究中采用免疫組化法對MerTK在原發(fā)性胃癌患者組織中的表達情況進行了檢測，以期能為后期臨床診斷、治療和預(yù)后預(yù)測提供參考。

MerTK受體酪氨酸激酶家族成員的分子均存在細胞黏附分子相關(guān)的胞外配體結(jié)合域，兩個纖維連接蛋白Ⅲ與兩個免疫球蛋白樣的結(jié)構(gòu)域之間以重復(fù)序列相互連接，胞內(nèi)區(qū)域主要包括酪氨酸激酶結(jié)構(gòu)域和跨膜區(qū)[14-15]。特異性MerTK抑制性抗體能夠選擇性地域MerTK胞外域相結(jié)合，進而阻滯MerTK與其他配體的結(jié)合過程，發(fā)揮特異性阻滯MerTK活化的作用。酪氨酸激酶是一組催化酪氨酸殘基磷酸化的酶，可將三磷酸腺苷ATP上一個磷原子轉(zhuǎn)移至酪氨酸殘基上進而促進底物蛋白活化，底物蛋白活化參與細胞的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)進入細胞核，造成某些基因表達水平異常[16-18]。本文研究結(jié)果顯示，MerTK蛋白高表達組患者的高齡、腫瘤直徑≥5cm、彌漫型、浸潤深度為T3、腫瘤TNM高分期、存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、淋巴結(jié)高分期發(fā)生率高于低表達組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。且多因素Cox分析結(jié)果顯示，MerTK表達、腫瘤浸潤深度為T3、腫瘤TNM高分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移為原發(fā)性胃癌患者死亡的危險因素（P<0.05）。這說明MerTK蛋白高表達患者與原發(fā)性胃癌死亡患者存在相似的臨床病理特點，這提示我們MerTK高表達患者可能存在不良預(yù)后。因此本研究進一步比較MerTK高表達患者與低表達患者術(shù)后復(fù)發(fā)率、轉(zhuǎn)移率和死亡率，結(jié)果顯示MerTK蛋白高表達組患者的復(fù)發(fā)率、轉(zhuǎn)移率和死亡率均高于低表達組患者，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。這是由于MerTK蛋白高表達能夠抑制細胞凋亡，促進癌細胞生長，且能夠誘導(dǎo)腫瘤細胞對埃羅替尼等產(chǎn)生抗藥性，因此MerTK高表達組患者的預(yù)后情況較差[19]。Crittenden等[20]在研究中指出，接受放療的患者腫瘤組織中巨噬細胞MerTK表達上調(diào)，這提示我們MerTK可作為一個高特異性放療靶點，臨床中也可將其作為判斷胃癌患者預(yù)后的分子標(biāo)記物。

綜上所述，MerTK蛋白高表達患者多表現(xiàn)出高齡、腫瘤直徑≥5 cm、彌漫型、浸潤深度為T3、腫瘤TNM高分期、存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、淋巴結(jié)高分期，可將其作為不良預(yù)后的判斷標(biāo)記物。

[參考文獻]

[1] 王曉鋒，謝藍，曾平，等.新型Mer酪氨酸激酶抑制劑核心骨架的虛擬篩選[J].國際藥學(xué)研究雜志，2015，11（3）：365-369.

[2] 張兵.Mer受體酪氨酸激酶調(diào)控脂磷壁酸誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)及在金葡菌吞噬中的作用研究[D].安徽醫(yī)科大學(xué)，2016.

[3] Bernsmeier，Christine Pop，Oltin T，et al.Patients with acute-on-chronic liver failure have increased numbers of regulatory immune cells expressing the receptor tyrosine kinase MERTK[J].Gastroenterology，2015，148（3）：603-615.

[4] 鄭義輝，歐陽小容，陳廣源，等.可溶性Mer受體酪氨酸激酶在系統(tǒng)性紅斑狼瘡中的臨床意義[J].牡丹江醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2015，36（4）：31-33.

[5] 唐紅梅，賈長虹，李巍偉，等.Axl和Mer受體調(diào)控小鼠紅細胞分化[J].基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床，2015，35（12）：1628-1632.

[6] 胡洪亮.益氣健脾抗癌湯聯(lián)合化療治療胃癌41例[J].環(huán)球中醫(yī)藥，2016，9（8）：996-998.

[7] 孟燕，曹鳳軍，陳萍，等.補中益氣湯加減聯(lián)合化療治療胃癌術(shù)后50例[J].環(huán)球中醫(yī)藥，2015，8（8）：995-997.

[8] 郗洪慶，李佶陽，李少卿，等.胃癌根治術(shù)后殘胃癌與胃癌復(fù)發(fā)的臨床病理學(xué)特征比較及預(yù)后分析[J].中華胃腸外科雜志，2018，21（5）：507-513.

[9] 黃倩倩，陳晶.胃癌復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移的研究進展[J].胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志，2017，26（3）：241-244.

[10] 高亮.受體酪氨酸激酶Axl在自身抗體誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎發(fā)病中免疫抑制作用的研究[D].蘇州大學(xué)，2016.

[11] 李珊珊，朱華群，栗占國，等.可溶性Mer受體酪氨酸激酶在系統(tǒng)性紅斑狼瘡中的臨床意義[J].中華風(fēng)濕病學(xué)雜志，2014，18（6）：385-389.

[12] 孫昱昭，張若霜，谷峰，等.視網(wǎng)膜色素上皮細胞吞噬功能與MERTK-Ras-肌球蛋白通路關(guān)系的研究[J].國際眼科雜志，2016，17（1）：28-33.

[13] 盧萍.Mer信號通路與腫瘤關(guān)系研究進展[J].中華實用診斷與治療雜志，2016，30（6）：540-542.

[14] 陳昌浩，孫岳軍.受體酪氨酸激酶EphB6在胃癌中的表達及其臨床意義[J].臨床腫瘤學(xué)雜志，2017，22（12）：1111-1115.

[15] 何瓊，朱賢.酪氨酸激酶抑制劑在胃癌的基礎(chǔ)研究進展[J].醫(yī)學(xué)綜述，2016，22（13）：2554-2557.

[16] 鄭江華，王瑪川，陳競，等.轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶2和Mer受體酪氨酸激酶基因共沉默在小鼠動脈粥樣硬化斑塊失穩(wěn)中的作用[J].中華實驗外科雜志，2014，31（4）：709-712.

[17] 宋哲，白曉楓，劉雅剛，等.尾型同源盒轉(zhuǎn)錄因子通過酪氨酸激酶/信號傳導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子信號通路抑制胃癌細胞的遷移及侵襲[J].中華實驗外科雜志，2017，34（11）：1912-1914.

[18] 陳秋莉，徐元宏，李濤，等.TAM受體信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路與腫瘤發(fā)生發(fā)展關(guān)系研究進展[J].中國免疫學(xué)雜志，2016， 32（12）：1874-1877.

[19] Law Ah-Lai，Parinot Celia，Chatagnon Jonathan，et al.Cleavage of Mer tyrosine kinase （MerTK） from the cell surface contributes to the regulation of retinal Pphagocytosis[J].The Journal of Biological Chemistry，2015，290（8）：4941-4952.

[20] Crittenden MR，Baired J，F(xiàn)riedman D，et al. Merk on tumor macrophages is a therapeutic target to prevent tumor recurrence following radiation therapy[J]. Oncotarget，2016， 7（48）：78653-78666.

（收稿日期：2018-12-24）