梁建英 曹志娟

摘要：以培養(yǎng)藥學(xué)學(xué)生綜合能力、創(chuàng)新思維能力及國(guó)際視野為目的，將藥物合成（天然藥物化學(xué)）、藥物分析、藥劑、藥理各門課程整合開設(shè)綜合藥學(xué)實(shí)驗(yàn)，包括從藥物合成或天然產(chǎn)物的提取分離、藥物的質(zhì)量評(píng)價(jià)、劑型設(shè)計(jì)、藥效學(xué)和安全性初步評(píng)價(jià)等。針對(duì)藥物研發(fā)的特點(diǎn)將藥物分析貫穿綜合實(shí)驗(yàn)始終，同時(shí)采用中國(guó)藥典、美國(guó)藥典及英國(guó)藥典方法對(duì)藥物進(jìn)行評(píng)價(jià)，系統(tǒng)地培養(yǎng)學(xué)生的動(dòng)手能力和科研意識(shí)。

關(guān)鍵詞：綜合藥學(xué)實(shí)驗(yàn);藥物分析實(shí)驗(yàn);綜合能力;科研意識(shí)

中圖分類號(hào)：G642.0 ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A ? ? 文章編號(hào)：1674-9324（2019）20-0267-02

藥物分析是我國(guó)藥學(xué)專業(yè)規(guī)定設(shè)置的一門主要專業(yè)課程，是整個(gè)藥學(xué)學(xué)科領(lǐng)域一個(gè)重要的組成部分，是全面保證與控制藥品質(zhì)量的學(xué)科，具有很強(qiáng)的綜合性、實(shí)踐性與應(yīng)用性。實(shí)驗(yàn)教學(xué)是該門課程的重要環(huán)節(jié)，它不僅具有強(qiáng)化學(xué)生理論知識(shí)、培養(yǎng)學(xué)生動(dòng)手能力等傳統(tǒng)功能，也是培養(yǎng)學(xué)生綜合利用知識(shí)能力分析解決實(shí)際問題與創(chuàng)新思維的重要手段。作為藥物分析課程的重要補(bǔ)充，一些高校已經(jīng)增設(shè)了綜合性、設(shè)計(jì)性、研究性的藥物分析實(shí)驗(yàn)，并改進(jìn)了教學(xué)與評(píng)價(jià)方法。[1，2]但是，系統(tǒng)性地從化學(xué)藥物合成或者中藥有效成分提取到制成制劑并進(jìn)行全程質(zhì)量控制的教學(xué)模式卻鮮有報(bào)道。復(fù)旦大學(xué)藥學(xué)院結(jié)合藥物研發(fā)的規(guī)律，將藥物化學(xué)、藥物分析、藥劑、藥理等不同學(xué)科知識(shí)進(jìn)行整合，開設(shè)了綜合藥學(xué)實(shí)驗(yàn)課程。其中的藥物分析部分改變了以往依據(jù)藥典標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行操作的單項(xiàng)驗(yàn)證性試驗(yàn)，而代之以全程化綜合實(shí)驗(yàn)，并與美國(guó)藥典、英國(guó)藥典方法進(jìn)行比較，以培養(yǎng)學(xué)生創(chuàng)新思維、開拓國(guó)際化視野與提升解決實(shí)際問題能力為目的，將實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的驗(yàn)證功能、不同學(xué)科知識(shí)的內(nèi)在聯(lián)系與學(xué)生能力的提升作為一個(gè)整體進(jìn)行考慮與布局。以下以阿司匹林為例，介紹其藥物分析實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。

一、原料的檢驗(yàn)

藥品檢驗(yàn)是藥物分析的重要組成部分，藥品檢驗(yàn)依賴于藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，包括藥物的性狀、鑒別、檢查與含量測(cè)定四部分內(nèi)容，除含量測(cè)定每部分內(nèi)容包括2—8個(gè)小項(xiàng)目。一般來說藥物分析實(shí)驗(yàn)主要用來驗(yàn)證理論課的重點(diǎn)與難點(diǎn)，強(qiáng)化學(xué)生對(duì)理論知識(shí)的理解與記憶。

依據(jù)中國(guó)藥典（2015版）中阿司匹林的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)對(duì)合成的原料進(jìn)行檢驗(yàn)，取代以往市售藥品的檢驗(yàn)，由于原料的合格與否直接關(guān)系到后續(xù)的藥劑、藥理試驗(yàn)，同時(shí)秉承對(duì)自己合成樣品負(fù)責(zé)的態(tài)度，學(xué)生對(duì)待藥品檢驗(yàn)會(huì)更加認(rèn)真，對(duì)檢驗(yàn)方法和檢驗(yàn)結(jié)果印象更加深刻。這樣一方面增強(qiáng)了學(xué)生對(duì)藥品檢驗(yàn)知識(shí)體系的整體把握，又提高了學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣與效果。

除了常規(guī)的性狀、鑒別等內(nèi)容，檢查項(xiàng)下我們重點(diǎn)關(guān)注了其中的特殊雜質(zhì)游離水楊酸。游離水楊酸即藥物合成的原料，同時(shí)藥物在貯存過程中會(huì)水解產(chǎn)生水楊酸。作為特殊雜質(zhì)，其含量的多少與藥物品質(zhì)及使用安全性密切相關(guān)，因此很多國(guó)家藥典中均將游離水楊酸列為檢查項(xiàng)目。盡管限度規(guī)定值均為0.1%，但所采用方法不盡相同，如中國(guó)藥典采用高效液相色譜法（HPLC）[3]，美國(guó)藥典采用硫酸鐵銨的目視比色法[4]。學(xué)生通過兩種不同方法的比對(duì)，會(huì)發(fā)現(xiàn)目視比色法進(jìn)行雜質(zhì)限量檢查更直觀，而HPLC法不僅能進(jìn)行雜質(zhì)限量檢查，還可以進(jìn)行雜質(zhì)的含量測(cè)定。此外，針對(duì)含量測(cè)定項(xiàng)目同樣進(jìn)行了中國(guó)藥典和美國(guó)藥典方法的比較。中國(guó)藥典采用氫氧化鈉在中性乙醇中直接進(jìn)行滴定，美國(guó)藥典則采用先加入定量過量氫氧化鈉滴定液然后硫酸滴定液回滴的水解后剩余滴定法，盡管均為酸堿滴定，但方法原理存在差異，通過試驗(yàn)學(xué)生會(huì)發(fā)現(xiàn)中國(guó)藥典方法無法排除藥物中的游離水楊酸或醋酸等酸性雜質(zhì)的干擾，相比而言美國(guó)藥典方法盡管煩瑣但專屬性更強(qiáng)。將獨(dú)立的鑒別、檢查、含量測(cè)定等實(shí)驗(yàn)內(nèi)容串成一個(gè)整體同時(shí)與國(guó)外藥典方法進(jìn)行對(duì)比實(shí)驗(yàn)，使不同知識(shí)點(diǎn)融會(huì)貫通，這樣學(xué)生對(duì)相關(guān)知識(shí)的理解和掌握更加牢固，思維能力和創(chuàng)新能力也因此得以提高。

如果原料檢驗(yàn)不合格，學(xué)生會(huì)進(jìn)一步對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行純化直至符合中國(guó)藥典標(biāo)準(zhǔn)。這同時(shí)也培養(yǎng)了學(xué)生認(rèn)真負(fù)責(zé)的精神。

二、片劑的檢驗(yàn)

原料經(jīng)過檢驗(yàn)符合藥典標(biāo)準(zhǔn)后進(jìn)行壓片制成片劑。片劑檢驗(yàn)的重點(diǎn)項(xiàng)目為溶出和含量測(cè)定。與中國(guó)藥典常規(guī)HPLC法不同，美國(guó)藥典以庚烷磺酸鈉作為離子對(duì)試劑進(jìn)行色譜分析。離子對(duì)色譜法是把離子對(duì)試劑加入到含水流動(dòng)相中，使被分析組分在流動(dòng)相中與離子對(duì)試劑的反離子生成不帶電荷的中性離子，從而增加待測(cè)藥物與非極性固定相的作用，使分配系數(shù)增加，改善分離效果。通過不同色譜法的比較，可以大大增強(qiáng)學(xué)生對(duì)高效液相色譜法這一現(xiàn)代分析技術(shù)的理解。毫無疑問，對(duì)于片劑各國(guó)藥典關(guān)注的主要是溶出度的測(cè)定。眾所周知，我國(guó)正在開展藥物一致性評(píng)價(jià)。藥物一致性評(píng)價(jià)，是《國(guó)家藥品安全“十二五”規(guī)劃》中的一項(xiàng)藥品質(zhì)量要求，開展仿制藥一致性評(píng)價(jià)，可以使仿制藥在質(zhì)量和療效上與原研藥一致，在臨床上可替代原研藥，這不僅可以節(jié)約醫(yī)療費(fèi)用，同時(shí)也可提升我國(guó)的仿制藥質(zhì)量和制藥行業(yè)的整體發(fā)展水平，保證公眾用藥安全有效。而其中體外溶出度的測(cè)定是評(píng)價(jià)藥品是否一致的最簡(jiǎn)單、最重要的環(huán)節(jié)之一。從藥品檢驗(yàn)的角度上講，溶出度系指藥物從片劑或膠囊等固體制劑在規(guī)定的溶劑中溶出的速度和程度。美國(guó)藥典溶出介質(zhì)選用pH4.5的醋酸鹽緩沖液，轉(zhuǎn)速50rpm，紫外分光光度法檢測(cè)。中國(guó)藥典選用溶出介質(zhì)為稀鹽酸溶液，轉(zhuǎn)速100rpm，高效液相色譜法檢測(cè)。采樣時(shí)間均為30min，溶出限度亦相同均為80%[3，4]。美國(guó)藥典方法溶出介質(zhì)和轉(zhuǎn)速的選擇更加科學(xué)合理，但定量方法過于簡(jiǎn)單，缺乏專屬性;中國(guó)藥典定量方法相對(duì)復(fù)雜，但能同時(shí)測(cè)定水解產(chǎn)物游離水楊酸和阿司匹林，溶出量的測(cè)定也更加準(zhǔn)確，兩套方法各有千秋。通過對(duì)藥物制劑的分析，進(jìn)一步激發(fā)和引導(dǎo)學(xué)生自主學(xué)習(xí)藥物一致性評(píng)價(jià)的相關(guān)知識(shí)，達(dá)到舉一反三的目的。除此以外，通過原料和制劑的各項(xiàng)分析學(xué)生可以對(duì)定量方法驗(yàn)證中的指標(biāo)尤其是準(zhǔn)確度、精密度、專屬性等有更深刻的理解。

綜合藥學(xué)實(shí)驗(yàn)既有多學(xué)科交叉、融合和匯總、又有單一學(xué)科多個(gè)知識(shí)點(diǎn)串聯(lián)。尤其是通過藥物分析將藥學(xué)研究各環(huán)節(jié)有機(jī)銜接，將過去相對(duì)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目聯(lián)系起來，學(xué)生從實(shí)驗(yàn)中充分體會(huì)到藥學(xué)各專業(yè)彼此間就是一個(gè)整體。另外，通過與國(guó)外先進(jìn)方法的比對(duì)及國(guó)家藥品發(fā)展戰(zhàn)略的了解，既提高了學(xué)習(xí)興趣，增強(qiáng)了科研意識(shí)，強(qiáng)化了科學(xué)實(shí)踐能力，同時(shí)對(duì)學(xué)生開拓國(guó)際視野也會(huì)產(chǎn)生非常積極的影響。

參考文獻(xiàn)：

[1]隋會(huì)敏，李莉，王慧玉，楊瑩，梁鑫.基于全程綜合實(shí)驗(yàn)與案例教學(xué)的藥物分析實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革[J].藥學(xué)教育，2018，34（3）：24-27.

[2]姜琳琳，王洋，侯愛君.舉辦藥學(xué)實(shí)驗(yàn)技能競(jìng)賽的經(jīng)驗(yàn)和啟示[J].實(shí)驗(yàn)室研究與探索，2013，32（8）：146-148.

[3]中國(guó)藥典（2015年版）[M].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2015：545.

[4]The United States Pharmacopeia：Official Monographs.USP 40：2873-2874.