黑水虻不同的投喂策略對(duì)鸚鵡魚生長及腸道消化酶指標(biāo)的影響

李景龍 劉廣東 尚東維

摘要：以鸚鵡魚為研究對(duì)象，探究黑水虻不同投喂策略對(duì)鸚鵡魚生長及腸道消化酶的影響。共設(shè)6個(gè)處理組，分別為持續(xù)投喂配合飼料（S組）;3 次飼料，1 次黑水虻（S3H1組）;2 次飼料，2 次黑水虻（S2H2組）;3 次黑水虻，1 次飼料（S1H3組）;持續(xù)投喂黑水虻（H組）;1天黑水虻，1天飼料（SH組）。每組2個(gè)平行，每天飽食投喂4次，周期60 d。結(jié)果表明，各組之間成活率無顯著差異（P>0.05）。隨黑水虻投喂比例增加，增質(zhì)量率、特定增長率呈下降趨勢，H組增質(zhì)量率、特定增長率最低，顯著低于其他組（P<0.05），其他各組之間無顯著差異（P>0.05）。隨黑水虻投喂比例增加，餌料系數(shù)逐漸升高，飼料效率逐漸降低，各組之間均有顯著差異（P<0.05）。鸚鵡魚中腸、后腸H組蛋白酶活性顯著低于其他組（P<0.05），S3H1組活性最高，且顯著高于H組（P<0.05）。前腸、中腸、后腸中S3H1組淀粉酶活性均顯著高于H組（P<0.05）。中腸、后腸各組間脂肪酶活性差異不顯著（P>0.05）。以上研究結(jié)果得出H組鸚鵡魚生長最差，S3H1組消化酶活性最高，黑水虻最適合投喂比例在25%～50%之間。

關(guān)鍵詞：黑水虻;投喂策略;鸚鵡魚;生長;消化酶

中圖分類號(hào)： S963.21+9 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號(hào)：1002-1302（2019）01-0171-03

黑水虻（Hermetia illucens L.）屬雙翅目昆蟲，別稱亮斑扁角水虻，原產(chǎn)于美洲，現(xiàn)已分布在世界各地，是腐食性的水虻科昆蟲，食物范圍廣闊，可以以動(dòng)物糞便、餐廚垃圾、動(dòng)物腐爛尸體等有機(jī)質(zhì)為食物，也可以米糠、麥麩等為食物[1-2]。黑水虻是一種完全變態(tài)昆蟲，整個(gè)生活史包括卵、幼蟲、蛹、成蟲4個(gè)時(shí)期，黑水虻幼蟲呈暗白色，可生長到20 mm長、6 mm寬。黑水虻體內(nèi)含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，粗蛋白含量為42%，脂肪含量達(dá)到35%，粗灰分為16%，粗纖維含量約占7%，氨基酸含量均衡，與魚粉接近[3]，能夠用于魚類的養(yǎng)殖。胡俊茹等研究表明，在豆粕用量為35%的基礎(chǔ)飼料中，黑水虻幼蟲培養(yǎng)基可替代豆粕用量的16%而不影響羅非魚生長[4]。Bondari等用黑水虻幼蟲單獨(dú)、黑水虻幼蟲和不同含量蛋白的商品飼料混合飼養(yǎng)斑點(diǎn)叉尾鮰和羅非魚，結(jié)果也證明了黑水虻幼蟲能夠用于飼養(yǎng)魚類[5]。

鸚鵡魚系雄性紅魔鬼魚和雌性紫紅火口魚雜交培育成的淡水觀賞魚，體副寬厚，呈橢圓形，壽命4～5年，體長可達(dá) 20 cm[6]，鸚鵡魚喜歡清澈水質(zhì)，適宜溫度26～31 ℃，水質(zhì)要求pH值6.5左右、溶氧8 mg/L。鸚鵡魚食性較雜，人工飼料，豐年蝦、黃粉蟲、黑水虻都可作為餌料。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 試驗(yàn)魚 試驗(yàn)魚取自天津嘉禾田源觀賞魚養(yǎng)殖公司，2016年7月9日隨機(jī)挑選規(guī)格整齊，體質(zhì)健壯的實(shí)驗(yàn)魚，移入實(shí)驗(yàn)地點(diǎn)（該廠打包車間）暫養(yǎng)、馴化，進(jìn)行粗鹽浸泡消毒處理，待其適應(yīng)環(huán)境后，測量體長并稱量體質(zhì)量。鸚鵡魚個(gè)體平均體長為（8.0±0.7） cm，平均體質(zhì)量為（21.6±0.5） g。

1.1.2 基礎(chǔ)餌料 鸚鵡魚的配合飼料購自天津天祥飼料有限公司，配合飼料置于陰涼處存放。黑水虻幼蟲由天津嘉禾田源觀賞魚養(yǎng)殖公司繁育。

1.2 試驗(yàn)魚分組、飼養(yǎng)管理與樣品的提取

待鸚鵡魚完全適應(yīng)后，取2 400尾實(shí)驗(yàn)魚隨機(jī)分至12個(gè)2.0 m×2.0 m×0.8 m的池中飼養(yǎng)，分為6個(gè)組，分別為持續(xù)投喂配合飼料（S組）;3次飼料，1次黑水虻（S3H1組）;2次飼料，2次黑水虻（S2H2組）;3次黑水虻，1次飼料（S1H3組）;持續(xù)投喂黑水虻（H組）;1天黑水虻，1天飼料（SH組）。每組2個(gè)平行。試驗(yàn)魚飽食投喂，每天投喂4次（08：00、11：00、13：00、17：00），每次持續(xù)30 min，30 min后撈出殘餌，每日記錄投飼量、水溫，每天換水1/3～1/2，發(fā)現(xiàn)死魚及時(shí)撈出測量體長和體質(zhì)量，試驗(yàn)期水溫29～31 ℃，pH值為7.2～7.5，溶氧>5 mg/L，氨氮控制在0.5 mg/L以下。周期60 d，測量鸚鵡魚的體質(zhì)量并取樣。

采樣前，饑餓24 h，全池稱質(zhì)量，每池取5條魚單獨(dú)稱質(zhì)量，對(duì)內(nèi)臟、肝臟稱重，取前腸、中腸、后腸。每池取10尾魚靜脈采血，4 ℃靜置12 h后離心（4 500 r/min，4 ℃，10 min），取上清液（即血清），血清和腸道置于-80 ℃保存，以分析血清生化指標(biāo)和組織各項(xiàng)指標(biāo)。

1.3 生長指標(biāo)

增質(zhì)量率（WGR）=100%×（終末體質(zhì)量+死亡體質(zhì)量-初始體質(zhì)量）/初始體質(zhì)量;

餌料系數(shù)（FCR）=攝食量/（終末體質(zhì)量+死亡體質(zhì)量-初始體質(zhì)量）;

特定生長率（SGR）=100% ×（ln終末體質(zhì)量-ln初始體質(zhì)量）/飼養(yǎng)天數(shù);

存活率（SR）=100%×終末體質(zhì)量/初始體質(zhì)量;

肝體指數(shù)（HIS）=肝胰臟質(zhì)量（g）/魚體質(zhì)量（g）×100%;

臟體指數(shù)（viscerosomatic index，VSI，%）=內(nèi)臟質(zhì)量/全魚質(zhì)量×100%;

飼料效率（feed efficiency，F(xiàn)E，%）=體增質(zhì)量/飼料消耗干質(zhì)量×100%。

1.4 樣品的測定

本試驗(yàn)共測定蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶3個(gè)消化酶指標(biāo)。試驗(yàn)中蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶中蛋白含量，均采用江蘇南京建成生物工程技術(shù)研究所提供的試劑盒進(jìn)行測定。

1.5 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析

所得數(shù)據(jù)用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”（x±s） 表示，用Excel 2003及SPSS 18.0進(jìn)行分析處理。利用SPSS 18.0軟件進(jìn)行單因素方差分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 黑水虻不同投喂策略對(duì)鸚鵡魚生長性能和飼料利用效率的影響

由表1可知，H組成活率最高，各組之間成活率無顯著差異（P>0.05）。隨著黑水虻投喂比例增加，增質(zhì)量率、特定增長率、末質(zhì)量呈下降趨勢，H組增質(zhì)量率、特定增長率、末質(zhì)量最低，顯著低于其他組（P<0.05），S、S3H1、S2H2、S1H3、SH組之間無顯著差異（P>0.05）。各組之間臟體指數(shù)和肝體指數(shù)差異不顯著（P>0.05）。隨黑水虻投喂比例增加，餌料系數(shù)逐漸升高，飼料效率逐漸降低，各組之間差異均顯著（P<0.05）。

2.2 黑水虻不同投喂策略對(duì)鸚鵡魚腸道蛋白酶活性的影響

由表2可知，前腸中SH、S1H3、H組蛋白酶活性顯著低于其他3組（P<0.05），S組活性最高且顯著高于S3H1、S2H2組（P<0.05），SH、S1H3、H組差異不顯著（P>0.05）。中腸中S3H1組蛋白酶活性最高且顯著高于其他組（P<0.05），H組顯著低于其他組（P<0.05），S2H2、SH組差異不顯著（P>0.05），S、SH組差異不顯著（P>0.05）。后腸中H組蛋白酶活性顯著低于其他組（P<0.05），S3H1、SH、S、S2H2組顯著高于S1H3組（P<0.05），S3H1、SH、S、S2H2組之間差異不顯著（P>0.05）。

2.3 黑水虻不同投喂策略對(duì)鸚鵡魚腸道淀粉酶活性的影響

由表3可知，前腸中S、S3H1組淀粉酶活性顯著高于SH、S2H2、S1H3、H組（P<0.05），S、S3H1組差異不顯著（P>0.05），SH、S2H2、S1H3、H組差異不顯著（P>0.05）。中腸中H、S1H3組淀粉酶活性顯著低于其他組（P<0.05），S、S3H1、SH組顯著高于S2H2組（P<0.05），S、S3H1組差異不顯著（P>0.05）。后腸中S2H2、H、S1H3組淀粉酶活性顯著低于S3H1、SH組（P<0.05），S3H1顯著高于SH組（P<0.05），S2H2、H、S1H3組差異不顯著（P>0.05）。

2.4 黑水虻不同投喂策略對(duì)鸚鵡魚腸道脂肪酶活性的影響

由表4可知，前腸中H組脂肪酶活性最低，顯著低于其他組（P<0.05），SH、S3H1、S1H3、S2H2、S組之間差異不顯著（P>0.05）。中腸、后腸中各組之間脂肪酶活性差異不顯著（P>0.05）。

3 討論

3.1 黑水虻不同投喂策略對(duì)鸚鵡魚生長指標(biāo)的影響

本研究各組之間成活率無顯著差異（P>0.05），H組顯著降低鸚鵡魚末質(zhì)量、增質(zhì)量率和特定增長率（P<0.05），限制鸚鵡魚生長，S、S3H1、S2H2、S1H3、SH組之間無顯著差異（P>0.05），因此黑水虻不可完全代替基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)鸚鵡魚。H組餌料系數(shù)最高，顯著高于其他組（P<0.05），隨黑水虻投喂量增加，餌料系數(shù)逐漸增大，各組之間差異顯著（P<0.05）。黑水虻幼蟲在大菱鲆飼料中的應(yīng)用試驗(yàn)顯示，隨著黑水虻幼蟲替代魚粉比例的上升，試驗(yàn)魚的末質(zhì)量以及特定生長率出現(xiàn)了顯著降低的情況[7]，與試驗(yàn)結(jié)論相符。胡俊茹等利用黑水虻幼蟲替代魚粉飼喂黃顙魚的試驗(yàn)顯示，30%以上的替代比例限制了黃顙魚的生長，且30%替代組的血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶顯著低于對(duì)照組，從而得到黑水虻幼蟲在黃顙魚飼料中替代魚粉的適宜比例為30%的結(jié)論[8]。結(jié)果表明，黑水虻只能部分代替飼料。

臟器系數(shù)又稱臟體比，即某臟器的質(zhì)量與動(dòng)物總體質(zhì)量的比值，是試驗(yàn)動(dòng)物主要生物學(xué)特性之一，是判斷試驗(yàn)動(dòng)物機(jī)體功能狀態(tài)和健康狀況是否正常的主要指標(biāo)之一[9]。臟器系數(shù)在正常狀態(tài)下一般都會(huì)保持恒定。臟體指數(shù)隨黑水虻代替飼料比例增加先增大再減小，在S1H3組達(dá)到最大值，但各組間無顯著差異（P>0.05）。各組間肝體指數(shù)也差異不顯著（P>0.05）。

3.2 黑水虻不同投喂策略對(duì)鸚鵡魚消化酶活性的影響

魚類攝食會(huì)引起消化酶活性的變化，在人工養(yǎng)殖條件下，投喂不同營養(yǎng)成分飼料會(huì)影響魚類消化酶的分泌[10]。黑水虻體內(nèi)含粗蛋白42%，脂肪含量達(dá)到35%，粗灰分為16%，粗纖維含量約占7%，氨基酸含量均衡，與魚粉接近[3]。

鸚鵡魚前腸中S2H2組蛋白酶活性顯著高于H組（P<0.05），S3H1組顯著高于S2H2組（P<0.05），中腸、后腸中H組蛋白酶活性最低，顯著低于其他組（P<0.05），S3H1組活性最高，且顯著高于H組（P<0.05）。魚類蛋白酶活性與餌料中蛋白質(zhì)含量密切相關(guān)[11]，并進(jìn)而影響魚類攝食和生長[12]，一般魚類蛋白酶活性的增加與其生長正相關(guān)[10]，而H組的增質(zhì)量率也顯著低于S3H1組（P<0.05），符合此結(jié)論。

前腸S、S3H1組淀粉酶活性顯著高于H組（P<0.05），中腸S2H2組顯著高于H組（P<0.05），S3H1組顯著高于S2H2組（P<0.05），后腸中SH組顯著高于H組（P<0.05），S3H1組顯著高于SH組（P<0.05）。一般來說，魚類淀粉酶活性與其所攝食餌料的淀粉含量呈現(xiàn)正相關(guān)[11，13]，本試驗(yàn)中各組之間淀粉酶活性隨黑水虻代替飼料比例增加而減小，因?yàn)榕浜巷暳现械牡矸酆恳嘤诤谒?，與試驗(yàn)結(jié)果一致。

前腸H組脂肪酶顯著低于其他組，S、S3H1、S2H2、S1H3、SH組之間無顯著差異（P>0.05），中腸、后腸脂肪酶活性各組之間無顯著差異（P>0.05）。魚類體內(nèi)的脂肪酶活性與飼料中的脂肪含量沒有明顯的相關(guān)性，而有些魚呈正相關(guān)，有些魚呈負(fù)相關(guān)。逯尚尉等用配合飼料、魚肉、混合餌料分別投喂點(diǎn)帶石斑魚，研究表明各組之間脂肪酶活性差異不顯著（P>0.05）[11]。

4 結(jié)論

本研究H組鸚鵡魚生長最差，S3H1組消化酶活性最高。黑水虻可以部分代替飼料飼養(yǎng)鸚鵡魚，黑水虻最適合投喂比例在25%～50%之間。

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