李彥飛,馮澤騰,張小軍
(中農(nóng)立華生物科技股份有限公司,北京 100052)
敵草?。╠iuron),化學(xué)名稱為3-(3,4-二氯苯基)-1,1-二甲基脲,其屬于光合系統(tǒng)Ⅱ受體位點(diǎn)的光合作用電子傳遞抑制劑。敵草隆為脲類除草劑,用于非耕作區(qū)防除一年生禾本科雜草和某些闊葉雜草,如旱稗、馬唐、狗尾草、野莧草、莎草、藜等,也能防除稻田眼子菜、四葉萍,牛毛草等[1-5]。丙炔氟草胺(flumioxazin),化學(xué)名稱為N-(7-氟-3,4-二氫-3-氧-(2-丙炔基)-2H-1,4-苯并嗪-6-基)環(huán)己-1-烯-1,2-二羧酰亞胺,其屬于原卟啉原氧化酶抑制劑。在光和氧中,引起敏感作物中原卟啉的大量累積,使細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化作用增強(qiáng),從而導(dǎo)致敏感雜草的細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和細(xì)胞功能不可逆損害。丙炔氟草胺可穩(wěn)定控制棉花、大豆、花生、蘋果、柑橘、葡萄、梨等田間的水萱麻、藜、地膚、刺苞果、粟米草、望江南、野菊、毛木藍(lán)、曼陀羅、牽牛、鼠李、龍葵、黑茄、馬齒莧等雜草,尤其是對(duì)闊葉雜草防效較好,并且對(duì)三嗪類光合作用抑制劑、磺酰脲類、磺酰苯胺和咪唑啉酮類等ALS抑制劑產(chǎn)生抗藥性的雜草具有較好的防治效果[6-10]。目前丙炔氟草胺、丙草胺分析方法均較成熟,但對(duì)于兩者的復(fù)配制劑分析方法尚未見報(bào)道。
本文建立了高效液相色譜法對(duì)25%敵草隆·丙炔氟草胺懸浮劑中2種有效成分進(jìn)行同時(shí)分析,結(jié)果表明該方法具有重現(xiàn)性好,準(zhǔn)確度高,分離效果好等優(yōu)點(diǎn)。
美國(guó)安捷倫Agilent 1220高效液相色譜儀(具備紫外可變波長(zhǎng)檢測(cè)器);TU-1901型普析通用紫外可見分光光度計(jì);色譜柱:Agilent TC-C18色譜柱(250 mm×4.6 mm,5 m)。
乙腈(色譜純),新蒸2次蒸餾水;敵草隆標(biāo)樣(純度≥99%)、丙炔氟草胺標(biāo)樣(純度≥99%),北京勤誠(chéng)亦信科技開發(fā)有限公司提供;25%敵草隆·丙炔氟草胺懸浮劑,中農(nóng)立華生物科技股份有限公司。
流動(dòng)相:乙腈+水(體積比為55∶45),流速0.8 mL/min,柱溫30℃,檢測(cè)波長(zhǎng)230 nm,進(jìn)樣體積5.0 L,在上述色譜操作條件下,敵草隆的保留時(shí)間約為6.2 min,丙炔氟草胺的保留時(shí)間約為7.7 min。敵草隆及丙炔氟草胺標(biāo)樣色譜見圖1。25%敵草隆·丙炔氟草胺懸浮劑樣品的高效液相色譜圖見圖2。
圖1 敵草隆及丙炔氟草胺標(biāo)樣高效液相色譜圖
圖2 25%敵草隆·丙炔氟草胺懸浮劑高效液相色譜圖
1.3.1 標(biāo)樣溶液的配制
稱取敵草隆標(biāo)樣0.05 g(精確至0.000 2 g),丙炔氟草胺標(biāo)樣0.02 g(精確至0.000 2 g),置于100 mL的容量瓶中,用乙腈溶解并稀釋至刻度,搖勻并超聲溶解10 min,用0.45 m濾膜過濾,備用。
1.3.2 試樣溶液的配制
稱取25%敵草隆·丙炔氟草胺懸浮劑試樣0.3 g(精確至0.000 2 g),放置于100 mL容量瓶中,用乙腈溶解并稀釋至刻度,搖勻并超聲溶解10 min,用0.45 m濾膜過濾,備用。
在上述操作條件下,待儀器穩(wěn)定后,連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液,直至相鄰2針敵草隆或丙炔氟草胺標(biāo)樣的峰面積相對(duì)變化小于1.0%后,按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測(cè)定。
將測(cè)得的兩針試樣溶液以及試樣前后兩針標(biāo)樣溶液中的敵草隆或丙炔氟草胺峰面積分別進(jìn)行平均。試樣中敵草隆或丙炔氟草胺的質(zhì)量分?jǐn)?shù)w(%)按下式計(jì)算。
式中:A1為標(biāo)樣溶液中敵草隆或丙炔氟草胺峰面積平均值;A2為試樣溶液中敵草隆或丙炔氟草胺峰面積平均值;m1為標(biāo)樣的質(zhì)量,g;m2為試樣的質(zhì)量,g;P為標(biāo)樣中敵草隆或丙炔氟草胺的質(zhì)量分?jǐn)?shù),%。
以甲醇與水按不同比例為流動(dòng)相時(shí),敵草隆和丙炔氟草胺的出峰時(shí)間晚且峰形較寬。當(dāng)以乙腈與水作為流動(dòng)相時(shí),二者的出峰時(shí)間適中,峰形尖銳無拖尾,且分離效果良好。綜合考慮,最終選定乙腈+水(體積比為55∶45)為流動(dòng)相。
通過使用TU-1901型普析通用紫外可見分光光度計(jì)對(duì)敵草隆和丙炔氟草胺標(biāo)樣溶液在近紫外區(qū)波段范圍內(nèi)進(jìn)行掃描,可得到該標(biāo)樣溶液對(duì)應(yīng)的吸收波長(zhǎng)與響應(yīng)值的紫外光譜圖。當(dāng)檢測(cè)波長(zhǎng)選定為230 nm時(shí),敵草隆與丙炔氟草胺的吸收峰強(qiáng)烈,且基線平穩(wěn),雜質(zhì)吸收較小,主峰和雜質(zhì)峰分離效果較好。因此,最終選定230 nm作為本分析方法的檢測(cè)波長(zhǎng)。
分別稱取5個(gè)不同質(zhì)量的敵草隆、丙炔氟草胺標(biāo)準(zhǔn)品于100 mL的容量瓶中,依據(jù)上述色譜條件配置成一系列不同質(zhì)量濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測(cè)定。以敵草?。ū卜莅罚┻M(jìn)樣質(zhì)量為橫坐標(biāo),以敵草?。ū卜莅罚┓迕娣e為縱坐標(biāo)繪圖,得敵草隆和丙炔氟草胺的線性相關(guān)性曲線,分別見圖3、圖4。
圖3 敵草隆線性關(guān)系圖
圖4 丙炔氟草胺線性關(guān)系圖
敵草隆線性方程為y=2 220.6x+154.39,r2=0.999 3。丙炔氟草胺線性方程為y=4 855x-30.48,r2=0.999 8。該方法在測(cè)定范圍內(nèi)線性相關(guān)性很好。
從同一個(gè)25%敵草隆·丙炔氟草胺懸浮劑中準(zhǔn)確稱取5個(gè)試樣,在上述色譜操作條件下進(jìn)行分析,試驗(yàn)結(jié)果見表1。由表1可知,敵草隆質(zhì)量分?jǐn)?shù)為18.08%,標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.039,變異系數(shù)為0.22%。丙炔氟草胺質(zhì)量分?jǐn)?shù)為7.29%,標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.038,變異系數(shù)為0.52%。該方法的精密度能滿足定量分析要求。
表1 25%敵草隆·丙炔氟草胺懸浮劑精密度測(cè)定
在已知含量的25%敵草隆·丙炔氟草胺懸浮劑中加入一定量的敵草隆、丙炔氟草胺標(biāo)樣,在上述液相色譜操作條件下進(jìn)行測(cè)定,并計(jì)算回收率?;厥章蕼y(cè)定結(jié)果見表2。
表2 25%敵草隆·丙炔氟草胺懸浮劑回收率測(cè)定
本文采用高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定25%敵草隆·丙炔氟草胺懸浮劑中有效成分質(zhì)量分?jǐn)?shù)。本方法準(zhǔn)確度和精密度高,線性關(guān)系良好,簡(jiǎn)便、快速,是25%敵草隆·丙炔氟草胺懸浮劑可行的分析方法。