郝欣劉鑫齊娜陳向斌云環(huán)高峰范斐

(1.北京海關(guān)技術(shù)中心，北京 100026；2.上海屹堯儀器科技發(fā)展有限公司，上海 201108)

1 前言

我國是茶葉的故鄉(xiāng)，茶農(nóng)為了提高茶葉的產(chǎn)量，預(yù)防茶樹病蟲害，常常使用農(nóng)藥來解決該問題。有機(jī)磷農(nóng)藥雖然可以預(yù)防和除去茶葉上的害蟲，隨之而來的會造成茶葉中有機(jī)磷農(nóng)藥的殘留[1，2]。有機(jī)磷農(nóng)藥是農(nóng)藥中極為重要的一類化合物。有機(jī)磷農(nóng)藥可因食入、吸入或經(jīng)皮膚吸收而中毒，引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀，嚴(yán)重時可因肺水腫、腦水腫、呼吸麻痹而死亡，重度急性中毒者還會發(fā)生遲發(fā)性猝死[3，4]。

目前，茶葉中有機(jī)磷類農(nóng)藥殘留檢測方法中，大部分是將提取液直接進(jìn)行色譜分析，缺少分析前的樣品凈化處理。眾所周知，茶葉樣品中含有大量色素等雜質(zhì)，不經(jīng)過凈化處理的樣品會使分析儀器的進(jìn)樣口、色譜柱以及檢測器收到污染，影響分析的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性以及儀器的使用壽命。

本實(shí)驗(yàn)采用全自動固相萃取儀對茶葉樣品進(jìn)行分析前的凈化處理。該方法自動化程度高，操作簡單，凈化效果好，有效降低了茶葉本底干擾，適合于茶葉中多種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的日常檢測工作。

2 實(shí)驗(yàn)部分

2.1 樣品

茶葉樣品用粉碎機(jī)粉碎后過2.0mm圓孔篩?；靹颍殖蓛煞葑鳛樵嚇?，分裝入潔凈的盛樣容器內(nèi)，密封并于0～4℃保存。

2.2 儀器

EXTRA全自動固相萃取儀(上海屹堯儀器科技發(fā)展有限公司)；氣相色譜儀，配有FPD檢測器(美國安捷倫公司)。

2.3 試劑

正己烷，丙酮均為色譜純；無水硫酸鈉：650℃灼燒4h；毒死蜱、殺螟硫磷、水胺硫磷、殺撲磷單個標(biāo)準(zhǔn)溶液100 μg/mL；活性炭(3mL/250mg)固相萃取柱；蒸餾水。

2.4 方法建立

準(zhǔn)確稱取粉碎茶葉樣品0.5g(精確至0.001g)于10mL試管中，加入1～1.5mL水，浸泡10min，加入1g無水硫酸鈉，用2×2mL乙酸乙酯提取2次，每次振蕩2min，離心3min，收集上層有機(jī)相，殘?jiān)儆?mL乙酸乙酯/正己烷(V/V，1/1)提取1次，合并上層有機(jī)相于ASPE樣品管中，采用活性炭(3mL/250mg)固相萃取柱(使用活性炭小柱前在小柱填料上端裝入1cm高的無水硫酸鈉)，經(jīng)過EXTRA全自動固相萃取儀富集、凈化。

固相萃取凈化過程：用4mL乙酸乙酯活化小柱后，將提取液全部轉(zhuǎn)移至小柱中，再用4 mL乙酸乙酯和2 mL乙酸乙酯/正己烷(V/V，1/1)洗脫。

全自動固相萃取凈化條件，見表1。

表1 全自動固相萃取方法凈化程序表

續(xù)表1

收集全部流出液，40℃下氮吹濃縮至近干，乙酸乙酯定容至1mL。上述實(shí)驗(yàn)重復(fù)進(jìn)行6次。

氣相色譜條件：

色譜柱：DB-1701 30m × 0.32mm × 0.25μm；柱溫(程序升溫)：100℃ 以10℃/min升溫到190℃，保持5min，5℃/min升到220℃，保持5min，20℃/min升到300℃，保持5min；進(jìn)樣口溫度：270 ℃；檢測器溫度：250℃；分流比：5∶1；進(jìn)樣量：1.0 μL。

2.5 線性關(guān)系

1 mg/L混合標(biāo)準(zhǔn)溶液配制：

分別從濃度為100 mg/L的毒死蜱、殺螟硫磷、水胺硫磷、殺撲磷單個標(biāo)準(zhǔn)儲備液中，各移取0.1 mL于10 mL容量瓶中，丙酮定容至刻度，配制成濃度為1mg/L的4種有機(jī)磷類農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，避光，-18℃下保存。

基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液配制：

用空白樣品基質(zhì)溶液配制成濃度分別為10、20、100、160、200 ng/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，用于標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的繪制。具體結(jié)果見表2。

表2 茶葉基質(zhì)4種有機(jī)磷苯類混標(biāo)校正曲線及相關(guān)系數(shù)表

2.6 加標(biāo)回收率

在茶葉樣品中分別加入40μg/kg、200μg/kg、300μg/kg的4種有機(jī)磷類農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，重復(fù)測定6次，采用基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線定量，平均回收率及RSD見表3。

表3 茶葉中4種有機(jī)磷類化合物回收率和精密度結(jié)果

3 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)采用全自動固相萃取儀對茶葉中4種有機(jī)磷類農(nóng)藥進(jìn)行凈化。建立了使用全自動固相萃取-氣相色譜法檢測茶葉中有機(jī)磷類農(nóng)藥殘留的方法。該方法具有自動化程度高，萃取效率高、精密度好，操作簡單等優(yōu)點(diǎn)，適用于茶葉中有機(jī)磷類農(nóng)藥殘留的日常檢測工作。