余維慶 陳建勇 張麗芬

【摘要】 目的：探討血清中腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）和T淋巴細(xì)胞亞群（CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）的水平變化在慢性阻塞性肺疾?。–OPD）急性加重期和緩解期中的臨床價(jià)值研究。方法：對(duì)75例COPD患者急性期和緩解期血清中的TNF-α、IL-6、IL-1β和CD4+、CD8+水平進(jìn)行檢測(cè)，同時(shí)選擇健康體檢中心的健康老年人30例作為對(duì)照組。分別行肺功能檢測(cè)，對(duì)血清TNF-α、IL-6、IL-1β和CD4+、CD8+與肺功能指標(biāo)（FEV1%pred、FEV1/FVC%）進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果：COPD緩解期患者的FEV1%pred、FEV1/FVC%均較COPD急性期明顯提高，但均比對(duì)照組低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。COPD緩解期患者血清中TNF-α、IL-6和IL-1β的水平均較急性期時(shí)明顯下降，但均比對(duì)照組高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;COPD緩解期患者血清中CD4+、CD4+/CD8+均較急性期時(shí)明顯升高，但均比對(duì)照組低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;COPD緩解期患者血清中CD8+較急性期時(shí)降低，但仍比對(duì)照組高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。COPD患者血清TNF-α、IL-6、IL-1β及CD8+百分比與肺功能指標(biāo)中的FEV1%pred、FEV1/FVC%均呈負(fù)相關(guān)（P<0.05）;CD4+百分比、CD4+/CD8+與肺功能指標(biāo)中的FEV1%pred、FEV1/FVC%均呈正相關(guān)（P<0.05）。結(jié)論：血清TNF-α、IL-6、IL-1β和CD4+、CD8+均參與了COPD的發(fā)生發(fā)展，并與肺功能相關(guān)聯(lián)，為判斷患者病情嚴(yán)重程度、治療效果及預(yù)后提供一定的依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】 慢性阻塞性肺疾病; 細(xì)胞因子; 腫瘤壞死因子-α; 白介素

【Abstract】 Objective：To investigate the serum tumor necrosis factor-α（TNF-α），interleukin-6（IL-6），interleukin-1β（IL-1β）and T lymphocyte subsets（CD4+，CD8+，CD4+/CD8+）levels of clinical value in the acute exacerbation and stable phase of chronic obstructive pulmonary disease（COPD）.Method：The levels of TNF-α，IL-6，IL-1β，CD4+ and CD8+ in serum of 75 patients with COPD were detected in the acute phase and remission phase.30 healthy elderly people in the health check-up center were selected as the control group.Pulmonary function tests（FEV1%pred，F(xiàn)EV1/FVC%）were performed to analyze the correlation between serum TNF-α，IL-6，IL-1β，CD4+，CD8+ and lung function indexes.Result：FEV1%pred，F(xiàn)EV1/FVC% in patients with COPD remission were significantly higher than those in the acute phase of COPD，but lower than those in the control group，with statistically significant differences（P<0.05）.Serum levels of TNF-α，IL-6 and IL-1β?in patients with COPD remission were significantly lower than those in the acute phase，but higher than those in the control group，with statistically significant differences（P<0.05）.CD4+ and CD4+/CD8+ in the serum of patients with COPD remission were significantly higher than those in the acute phase，but lower than those in the control group，with statistically significant differences（P<0.05）.The serum CD8+ in COPD remission patients was lower than that in the acute phase，but still higher than that in the control group，with statistically significant difference（P<0.05）.The percentages of serum TNF-α，IL-6，IL-1β and CD8+ in COPD patients were negatively correlated with FEV1%pred and FEV1/FVC% in lung function indexes（P<0.05）.The percentage of CD4+，CD4+/CD8+ were positively correlated with FEV1%pred and FEV1/FVC% in lung function indexes（P<0.05）.Conclusion：Serum TNF-α，IL-6，IL-1β，CD4+ and CD8+ are involved in the development of COPD and are associated with pulmonary function，which provides a basis for judging the severity，treatment and prognosis of patients.

【Key words】 Chronic obstructive pulmonary disease; Cytokines; Tumor necrosis factor-α; Interleukin

First-authors address：Jiangmen Central Hospital，Jiangmen 529000，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2019.11.003

慢性阻塞性肺疾?。╟hronic obstructive pulmonary disease，COPD）是一種以不完全可逆性呼吸氣道阻塞為特點(diǎn)的疾病，此種氣道阻塞通常是漸進(jìn)性的，且伴隨肺部吸入毒性微?；驓怏w后的不正常反應(yīng)。根據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）的統(tǒng)計(jì)，每年約造成300萬(wàn)人死亡，占全世界人口死亡原因第五位，并預(yù)期在2030年可能進(jìn)一步成為第三大死因[1]。COPD有兩種基本的病理變化，任何一種均有炎癥因子參與，一種會(huì)影響氣道，造成氣道纖維化與窄化;另一種則影響肺部，導(dǎo)致肺氣腫[2]。本研究比較了COPD患者急性加重期與穩(wěn)定期血清中的腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）和白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）的水平以及T淋巴細(xì)胞亞群（CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）檢測(cè)結(jié)果，并進(jìn)行肺功能測(cè)定，以探討血清細(xì)胞因子在COPD病程中的作用及臨床意義，現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2018年1-12月在江門(mén)市中心醫(yī)院呼吸內(nèi)科收治的COPD患者75例，（1）納入標(biāo)準(zhǔn)：①分級(jí)和診斷標(biāo)準(zhǔn)符合COPD的GINA/GOLD 2014年版診療指南[3];②近1個(gè)月內(nèi)無(wú)呼吸道感染史。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：①患有風(fēng)濕免疫性疾病;②肺部手術(shù)史患者;③其他肺部疾病或肺部腫瘤。同時(shí)選擇健康體檢中心的健康老年人（體檢結(jié)果無(wú)異常）30例作為對(duì)照組。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者均知情同意。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 分別于患者COPD急性發(fā)作期和癥狀緩解期2次空腹抽取肘靜脈血6 mL，分為兩份，1份用于測(cè)定T淋巴細(xì)胞亞群，1份于室溫靜置30 min，3 000 r/min離心10 min分離血清，于-20 ℃冰箱封存，在一周內(nèi)完成檢測(cè)。對(duì)照組于健康體檢時(shí)進(jìn)行采集樣本。

1.2.2 TNF-α、IL-6和IL-1β濃度測(cè)定 采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)血清中TNF-α、IL-6和IL-1β的濃度，人TNF-α試劑盒購(gòu)自Rapdbio公司，IL-6和IL-1β試劑盒購(gòu)自北京晶美生物技術(shù)公司，均按照相應(yīng)試劑盒說(shuō)明書(shū)步驟嚴(yán)格操作。

1.2.3 T淋巴細(xì)胞亞群測(cè)定 采用美國(guó)BECTON DICKSON公司FACSCalibur流式細(xì)胞儀檢測(cè)靜脈血T淋巴細(xì)胞亞群，包括CD4+、CD8+，并計(jì)算CD4+/CD8+。試劑盒為購(gòu)自美國(guó)B.D.Pharmingen公司。

1.2.4 肺功能測(cè)定 采用hypAir型肺功能儀（比利時(shí)Medisoft公司）進(jìn)行肺功能檢查。記錄第1秒用力呼氣容積（FEV1）、用力肺活量（FVC）以及兩者的比值（FEV1/FVC%），F(xiàn)EV1占預(yù)計(jì)值百分比（FEV1%pred）

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料用（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用F檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗(yàn)，相關(guān)性采用Pearson分析，以P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組一般資料比較 COPD患者75例，其中男39例，女36例，平均年齡（69.89±7.47）歲，按照不同發(fā)病期分為COPD急性期組（n=41）和COPD緩解期組（n=34），COPD急性期組：男21例，女20例，平均年齡（69.52±7.13）歲;COPD緩解期組：男18例，女16例，平均年齡（70.23±7.92）歲。對(duì)照組30例，其中男16例，女14例，平均年齡（70.11±7.52）歲。三組性別、年齡比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 COPD不同發(fā)病期和對(duì)照組的FEV1%pred、FEV1/FVC%比較 COPD緩解期患者的FEV1%pred、FEV1/FVC%均較COPD急性期明顯提高，但均比對(duì)照組低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表1。

2.3 COPD不同發(fā)病期和對(duì)照組的血清TNF-α、IL-6和IL-1β水平比較 COPD緩解期患者血清中TNF-α、IL-6和IL-1β的水平均較COPD急性期組明顯下降，但均比對(duì)照組高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表2。

2.4 COPD不同發(fā)病期和對(duì)照組的血清T淋巴細(xì)胞亞群水平比較 COPD緩解期患者血清中CD4+、CD4+/CD8+均較COPD急性期組明顯升高，但均比對(duì)照組低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;COPD緩解期患者血清中CD8+較COPD急性期組降低，但仍比對(duì)照組高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表3。

2.5 血清細(xì)胞因子與肺功能指標(biāo)的相關(guān)性分析 COPD患者血清TNF-α、IL-6、IL-1β及CD8+與肺功能指標(biāo)中的FEV1%pred、FEV1/FVC%均呈負(fù)相關(guān)（P<0.05）;CD4+、CD4+/CD8+與肺功能指標(biāo)中的FEV1%pred、FEV1/FVC%均呈正相關(guān)（P<0.05）。見(jiàn)表4。

3 討論

已有越來(lái)越多的證據(jù)顯示COPD是一個(gè)復(fù)雜全身性炎癥性疾病。多數(shù)COPD患者死于心血管疾病或癌癥而非呼吸系統(tǒng)疾病，目前已提出將COPD當(dāng)作慢性系統(tǒng)性炎癥綜合征的一部分的觀念，呼吸道氣流阻塞會(huì)引起心肺功能及氣體交換的障礙，導(dǎo)致全身系統(tǒng)性的反應(yīng)。COPD的炎癥反應(yīng)為嗜中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、CD8+ T淋巴細(xì)胞增加。文獻(xiàn)[4]研究發(fā)現(xiàn)，T淋巴細(xì)胞亞群表達(dá)異常在COPD發(fā)病中起著重要作用。COPD亦會(huì)引起炎癥反應(yīng)及修復(fù)機(jī)制的交互作用，導(dǎo)致炎癥介質(zhì)進(jìn)入血液循環(huán)，最后引起骨骼肌消耗及惡性體質(zhì)等全身系統(tǒng)性的表現(xiàn)。會(huì)引起機(jī)體炎癥反應(yīng)的生物因子包含以下幾類：（1）細(xì)胞因子：如TNF-α、IL-6、IL-8、IL-1β、趨化因子和脂肪因子等[5-6];（2）急性期蛋白質(zhì)：如CRP、纖維蛋白原血清淀粉樣蛋白A和表面活性劑蛋白D等[7]。這些系統(tǒng)性的表現(xiàn)會(huì)進(jìn)而引起并加重其他相關(guān)合并癥的發(fā)生，增加患者住院的機(jī)會(huì)、死亡率及相關(guān)醫(yī)療費(fèi)用的支出，并影響了COPD的治療[8]。