李志剛

摘要? ? 儀器的檢出限是衡量速測儀檢測靈敏度的重要指標(biāo)，使用分光光度計(jì)型農(nóng)殘速測儀對蔬菜中的有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥總量進(jìn)行快速檢測已在基層得到廣泛應(yīng)用。本試驗(yàn)通過提取溶液加標(biāo)上機(jī)測量酶抑制率，進(jìn)行AYFS-NC0212快速檢測儀對氨基甲酸酯類農(nóng)藥檢出限的研究。結(jié)果表明，該儀器對氨基甲酸酯類農(nóng)藥具有較高的檢測靈敏度，符合《蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測》（GB/T 5009.199—2003）的相關(guān)要求，在氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留檢測中能發(fā)揮有效的監(jiān)控作用。

關(guān)鍵詞? ? AYFS-NC0212農(nóng)殘速測儀;氨基甲酸酯類農(nóng)藥;檢出限

中圖分類號(hào)? ? S481+.8? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼? ? A

文章編號(hào)? ?1007-5739（2019）15-0115-02

Study? on? Detection? Limit? of? Carbamate? Pesticides? in? AYFS-NC0212? Pesticide? Rapid? Tester

LI Zhi-gang

（Haicang Street Comprehensive Service Center，Haicang District，Xiamen，F(xiàn)ujian，Xiamen Fujian 361026）

Abstract? ? The detection limit of the instrument is an important indicator to measure the sensitivity of the rapid tester.The rapid detection of the total amount of organophosphorus and carbamate pesticides in vegetables using spectrophotometer-type pesticide residue tester has been widely used in grassroots. In this experiment，the enzyme inhibition rate was measured with extracting solution plus the standard in the machine，and the detection limit of carbamate pesticides by AYFS-NC0212 rapid detector was carried out.The test results showed that the instrument could effectively monitor the detection of carbamate pesticide residues，for its high sensitivity to the detection of carbamate pesticides，and met the relevant requirements of "Rapid Detection of Organophosphorus and Carbamate Pesticide Residues in Vegetables"（GB/T 5009.199—2003）.

Key words? ? AYFS-NC0212 pesticide rapid tester;carbamate pesticide;detection limit

民以食為天，食以安為先。農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全問題直接影響農(nóng)產(chǎn)品的市場競爭力和消費(fèi)者的身體健康。農(nóng)藥殘留檢測和控制是保證農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全的一個(gè)重要途徑。蔬菜農(nóng)藥殘留速測時(shí)間短，可快速篩查樣品，及時(shí)得到檢測結(jié)果，且檢測費(fèi)用低。有效開展蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測工作，對加強(qiáng)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全管理、提升屬地農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全水平具有重要意義。

有機(jī)磷、氨基甲酸酯類農(nóng)藥是目前廣泛使用的農(nóng)藥，基層廣泛推廣使用分光光度計(jì)型農(nóng)殘速測儀對蔬菜中的有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥總量進(jìn)行快速檢測。該方法操作簡便易行、前期投入少、成本低、準(zhǔn)確度較高，已成為農(nóng)殘儀器分析法的有效補(bǔ)充。儀器檢出限是衡量速測儀靈敏度性能的重要指標(biāo)，目前AYFS-NC0212農(nóng)殘速測儀在廈門地區(qū)使用較多。AYFS-NC0212農(nóng)殘速測儀檢測氨基甲酸酯類方法是根據(jù)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥的毒殺作用機(jī)理，利用有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥具有抑制昆蟲中樞和周圍神經(jīng)系統(tǒng)中的乙酰膽堿酶活性，造成神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)乙酰膽堿的積累，影響正常傳導(dǎo)，使昆蟲中毒致死的原理來檢測此類農(nóng)藥在蔬菜中的綜合殘留量。在一定條件下，有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對膽堿酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率與農(nóng)藥的濃度成正相關(guān)。在正常情況下，酶催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物（乙酰膽堿）水解，其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用分光光度計(jì)在412 nm處測定吸光度隨時(shí)間的變化值，計(jì)算出抑制率，通過抑制率可以判斷出樣品中是否有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的存在[1]。

根據(jù)《蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測》（GB/T 5009.199—2003），采用酶抑制率法（分光光度法），逐一用已知準(zhǔn)確濃度的單一農(nóng)藥上機(jī)測定酶抑制率，從而測出儀器最低檢出限。為進(jìn)一步了解并掌握該速測儀的靈敏度性能指標(biāo)，本試驗(yàn)通過空白提取液加標(biāo)的方法來測定該速測儀對部分氨基甲酸酯類農(nóng)藥的檢出限。

1? ? 材料與方法

1.1? ? 儀器和試劑

1.1.1? ? 儀器。AYFS-NC0212農(nóng)殘速測儀（廈門奧亞儀器有限公司）。

1.1.2? ? 試劑（廈門奧亞儀器有限公司）。①緩沖液。將緩沖液倒入燒杯，溶于500 mL蒸餾水或純凈水中，溶解、混勻備用，常溫保存。②底物。取1瓶底物，加入12.5 mL蒸餾水或純凈水，振搖1 min，溶解、混勻，放入4 ℃冰箱保存?zhèn)溆?。③顯色劑。取1瓶顯色劑加入12.5 mL緩沖液，振搖1 min，溶解、混勻，放入4 ℃冰箱保存?zhèn)溆?。④乙酰膽堿酯酶試劑。無需配制，需放入4 ℃冰箱保存?zhèn)溆茫? min的吸光度變化ΔA0值應(yīng)控制在0.3以上。

1.1.3? ? 農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品。滅多威、克百威、3-羥基克百威、涕滅威、涕滅威砜、涕滅威亞砜，濃度均為1 000 mg/L，由農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測所生產(chǎn)。

1.2? ? 試驗(yàn)方法

1.2.1? ? 儀器開機(jī)準(zhǔn)備。接通儀器電源，打開主機(jī)進(jìn)行自檢后，在儀器“選擇檢測項(xiàng)目”主界面，選擇“有機(jī)磷及氨基甲酸酯”項(xiàng)目，按“確認(rèn)”鍵，進(jìn)入“有機(jī)磷及氨基甲酸酯”項(xiàng)目界面，參照儀器使用說明書完成該檢測項(xiàng)目的參數(shù)設(shè)置，將反應(yīng)時(shí)間設(shè)置為3 min。預(yù)熱3～5 min后，觀察儀器的各通道透光率是否均達(dá)到100%，如有未達(dá)到100%需按“校準(zhǔn)”鍵，根據(jù)實(shí)際情況再選擇“校準(zhǔn)所有通道”或“選擇需要校準(zhǔn)的通道”進(jìn)行儀器校準(zhǔn)，使各通道的透光度均達(dá)到100%，校準(zhǔn)后返回到“有機(jī)磷及氨基甲酸酯”界面[2-3]。

1.2.2? ? 對照測量。在10 mm比色皿中，加入2.5 mL緩沖液（空白對照），再加入0.1 mL酶、0.1 mL顯色劑，搖勻后于37 ℃水浴鍋下靜置15 min后加底物0.1 mL，快速搖勻，搖勻后馬上放入第1個(gè)比色池內(nèi)，將比色皿光面對準(zhǔn)紫外光光源，蓋上蓋子，按“樣品”選擇“對照測量”進(jìn)行空白對照分析，觀察反應(yīng)3 min的吸光度變化值ΔA0。

空白對照溶液測量時(shí)吸光度變化值ΔA0在0.3以上，如果小于0.3可能是酶的活性不夠，應(yīng)更換酶液后再進(jìn)行對照測量[4]。測量時(shí)如有更換酶液、重新設(shè)置測量時(shí)間、關(guān)機(jī)后重新開機(jī)等情況，都必須進(jìn)行對照測量。

1.2.3? ? 加標(biāo)樣品測量。完成對照測量后即可開始進(jìn)行添加農(nóng)藥樣品測量，樣品測量添加試劑操作方法同對照測量一致，儀器測量操作需選擇“樣品測量”進(jìn)行，測量結(jié)束時(shí)儀器會(huì)顯示酶抑制率結(jié)果，按“確認(rèn)”打印測量結(jié)果。即先將6種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品用緩沖液稀釋到0.01mg/L，依次吸取各添加農(nóng)藥樣品按對照測量的方法操作進(jìn)行測量，記錄并打印各樣品的酶抑制率。根據(jù)所測出的酶抑制率值高低調(diào)配各農(nóng)藥濃度進(jìn)行測量，打印并記錄各濃度的酶抑制率[5-6]。

根據(jù)《蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測》（GB/T 5009.199—2003）[1]進(jìn)行判定，抑制率≥50%時(shí)為陽性樣品可檢出，抑制率<50%時(shí)為陰性樣品未檢出。按照標(biāo)準(zhǔn)方法提取稀釋系數(shù)進(jìn)行轉(zhuǎn)換，計(jì)算出各試驗(yàn)農(nóng)藥的檢出限。

2? ? 結(jié)果與分析

從表1可以看出，AYFS-NC0212農(nóng)殘速測儀對供試農(nóng)藥具有較高的檢測靈敏度，符合《蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測》（GB/T 5009.199—2003）的相關(guān)要求，在氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留檢測中能發(fā)揮有效的監(jiān)控作用。

3? ? 結(jié)論與討論

本試驗(yàn)所選農(nóng)藥均為常用氨基甲酸酯類農(nóng)藥，均為農(nóng)業(yè)農(nóng)村部例行監(jiān)測項(xiàng)目參數(shù)。試驗(yàn)結(jié)果表明，AYFS-NC0212農(nóng)殘速測儀對供試農(nóng)藥具有較高的檢測靈敏度，符合《蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測》（GB/T 5009.199—2003）的相關(guān)要求，在氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留檢測中能發(fā)揮有效的監(jiān)控作用。

由于條件等限制，本試驗(yàn)未能同時(shí)開展儀器對有機(jī)磷類農(nóng)藥檢出限的相關(guān)研究。因此，有待于后期進(jìn)一步的研究。同時(shí)，應(yīng)全面了解掌握該儀器的性能參數(shù)指標(biāo)，以便更好地開展農(nóng)藥監(jiān)測工作。

4? ? 參考文獻(xiàn)

[1] 衛(wèi)生部.蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測：GB/T 5009.199—2003[S].北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2003.

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