黃芪多糖對(duì)種鴿新城疫抗體消長(zhǎng)變化的影響

步衛(wèi)東， 單達(dá)聰， 吳 峰，潘裕華

（1.北京市農(nóng)林科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，北京海淀100097；2.北京生泰爾科技股份有限公司，北京大興 102600）

鴿新城疫（ND）是由禽Ⅰ型副黏病毒引起的高度接觸性傳染病，目前在肉鴿養(yǎng)殖中普遍存在（.B.W.卡尼克，1999）。肉鴿對(duì)ND疫苗的免疫受B淋巴細(xì)胞應(yīng)答水平的影響。呼吸道黏膜免疫降低也是引起規(guī)?；潏?chǎng)散發(fā)ND的誘因。楊秀環(huán)等（2010）在鴿ND免疫保護(hù)試驗(yàn)中證明，乳鴿針對(duì)雞源和鴿源ND強(qiáng)毒攻毒后抗體保護(hù)臨界值為5 log2；成鴿針對(duì)雞源和鴿源ND強(qiáng)毒攻毒后抗體保護(hù)臨界值為5 log2和4 log2；用禽的ND弱毒疫苗和滅活疫苗免疫接種鴿，可預(yù)防和控制鴿ND感染和傳播。針對(duì)種鴿存欄期3年以上、肉鴿是自然孵化、乳鴿和種鴿養(yǎng)在同一鴿舍、不同日齡乳鴿母源抗體參差不齊等現(xiàn)狀，突發(fā)ND是肉鴿養(yǎng)殖防疫的難點(diǎn)。肉鴿如何做好新城疫的免疫接種文獻(xiàn)鮮見報(bào)道，因此值得深入研究。黃芪多糖（APS）是從中草藥黃芪中提取的一種生物活性成分，有免疫增強(qiáng)作用，本試驗(yàn)設(shè)計(jì)飲水中添加APS，連續(xù)5個(gè)月測(cè)定種鴿ND-HI（HI）抗體水平，揭示APS對(duì)種鴿和乳鴿ND-HI抗體效價(jià)消長(zhǎng)規(guī)律的影響，以期為生產(chǎn)應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 黃芪多糖 黃芪多糖由生泰爾（北京）生物科技有限公司生產(chǎn)，100 mL含5 g干粉，終濃度為5%，按試驗(yàn)設(shè)計(jì)濃度飲水添加。

1.2 試驗(yàn)日糧 肉鴿飼料配比為60%的原糧和40%的顆粒飼料，原糧組成為豌豆30%、火麻仁3%、小麥12%、高粱15%和玉米40%，粗蛋白質(zhì)13.4%，養(yǎng)殖場(chǎng)自制顆粒飼料粗蛋白質(zhì)16.0%。原糧+顆粒料混合飼料粗蛋白質(zhì)14.4%。

1.3 試驗(yàn)動(dòng)物及飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)種鴿，白羽王2年種鴿共900對(duì)養(yǎng)于北京市博業(yè)盛科技有限責(zé)任公司（北京，大興泰豐肉鴿養(yǎng)殖合作社），北方3月可以自然孵化。3組試驗(yàn)種鴿飼養(yǎng)條件一致，飼養(yǎng)在二層架式階梯籠中，自由采食、飲水和保健砂，舍內(nèi)平均溫度、濕度及光照等按常規(guī)飼養(yǎng)管理要求進(jìn)行，自然孵化，一對(duì)種鴿哺喂2只乳鴿。

1.4 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)前種鴿進(jìn)行新城疫滅活苗（原北京獸醫(yī)生物制品廠）加強(qiáng)免疫一次，劑量為0.4 mL/只，左右胸肌肉各注射0.2 mL。免疫后將種鴿平均分為3組，每組300對(duì)。在正常飼喂基礎(chǔ)上，飲水中添加APS每只3 mg/d和5 mg/d，為試驗(yàn)Ⅰ組和Ⅱ組，不添加為對(duì)照組。添加標(biāo)準(zhǔn)為連續(xù)5 d，間隔10 d，2次/月。試驗(yàn)共計(jì)5個(gè)月。

1.5 血清的采集和新城疫抗體測(cè)定 在試驗(yàn)1～5個(gè)月，各組種鴿和乳鴿（7、14 d和21 d）按每組10%的比例隨機(jī)抽樣，翅靜脈采血0.2 mL/只分離血清，測(cè)定ND-HI抗體，HA、HI試驗(yàn)按照《GB/T16550-2008新城疫診斷技術(shù)》進(jìn)行。ND抗原與陰陽性血清購于中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所。結(jié)果以（×log2）表示。

為進(jìn)一步證明種鴿與哺喂乳鴿抗體間的相關(guān)性，將不同ND-HI抗體水平（×log2）的種鴿及哺喂的乳鴿統(tǒng)計(jì)為4個(gè)組，種鴿ND-HI抗體滴度≥9 log2為1組、≥8 log2為2組、≥7 log2為3組、≥6 log2為4組，并分析種鴿的ND-HI抗體水平不同對(duì)乳鴿生長(zhǎng)期內(nèi)ND-HI母源抗體的影響。

1.6 試驗(yàn)數(shù)據(jù)分析 采用SPSS 17.0軟件對(duì)種鴿及乳鴿ND-HI抗體進(jìn)行方差分析，二重比較采用最小顯著差數(shù)法（LSD）檢驗(yàn)，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 種鴿免疫后ND-HI抗體測(cè)定結(jié)果 由表1可知，種鴿免疫后第1個(gè)月、第2個(gè)月各組間ND-HI抗體水平差異不顯著（P＞0.05），Ⅰ組與對(duì)照組在免疫后第3、4、5個(gè)月差異不顯著 （P＞0.05），Ⅱ組較對(duì)照組在免疫后第 3、4、5個(gè)月分別提高了 8.9%（P ＜ 0.05）、9.5%（P ＜ 0.01）、19%（P＜0.01）；Ⅱ組較Ⅰ組在免疫后第4、5個(gè)月分別提高了5%（P ＜ 0.05）、8.6%（P ＜ 0.05）。ND-HI抗體水平綜合比較Ⅱ組＞Ⅰ組＞對(duì)照組。與對(duì)照組比較種鴿飲水中添加不同劑量APS，連續(xù)5 d，間隔10 d，每月2次，種鴿抗體消減變慢。表明APS能夠延長(zhǎng)種鴿保持較高ND-HI抗體水平。

表1 種鴿免疫后ND-HI抗體水平測(cè)定×log2

2.2 14日齡乳鴿ND-HI母源抗體測(cè)定結(jié)果由表2可知，種鴿免疫后第1個(gè)月、第2個(gè)月的14日齡乳鴿ND-HI母源抗體，各組間差異不顯著（P＞0.05）；Ⅰ組與對(duì)照組在免疫后第3、4個(gè)月差異不顯著（P＞0.05），Ⅰ組較對(duì)照組免疫后第5個(gè)月提高了60.9%（P＜0.01）；Ⅱ組較對(duì)照組免疫后第 3、4、5 個(gè)月分別提高 20.9%（P ＜ 0.05）、31.6%（P ＜ 0.01）、108.7%（P ＜ 0.01），Ⅱ組較Ⅰ組免疫后第4、5個(gè)月分別提高了25%（P＜0.01）、29.7%（P＜0.01）。ND-HI抗體水平比較Ⅱ組＞Ⅰ組＞對(duì)照組。綜合上述試驗(yàn)結(jié)果，與對(duì)照組比較每只種鴿飲水中添加5 mg/d的APS，連續(xù)5 d，間隔10 d，每月2次，能夠延長(zhǎng)母源保持較高ND-HI抗體水平，免疫5個(gè)月后部分14日齡乳鴿還在保護(hù)范圍內(nèi)。ND可空氣傳播，高的ND-HI母源抗體，能夠?yàn)槿怿澁a(chǎn)蛋-孵化-哺喂的生產(chǎn)模式提供安全保障。

表2 14日齡乳鴿ND-HI母源抗體水平測(cè)定

2.3 4組不同水平的ND-HI抗體母鴿與其哺喂在不同生長(zhǎng)期的乳鴿ND-HI母源抗體的測(cè)定結(jié)果 由表3可知，乳鴿7 d測(cè)定的ND-HI母源抗體，1 組（≥9 log2））較 2 組（≥8 log2）、3 組（≥7 log2）、4 組 （≥6 log2） 提高了 9.8%（P ＜ 0.05）、26.5%（P ＜ 0.01）、36%（P ＜ 0.01），2 組較 3 組、4組提高了 15.2%（P ＜ 0.01）、23.7%（P ＜ 0.01），3組和4組差異不顯著 （P＞0.05）。1組較2組、3組、4組抗體水平消長(zhǎng)慢。

表3 不同水平的ND-HI抗體母鴿與其哺喂乳鴿ND-HI母源抗體測(cè)定

乳鴿14 d測(cè)定的ND-HI母源抗體，1組較3組、4組提高了 34.4%、（P ＜ 0.01）、116.2% （P ＜0.01），1組和 2組差異不顯著（P ＞ 0.05），2組較 3組、4組提高了 24.5%、（P ＜ 0.01）、100.4%（P ＜0.01），3組較 4組提高了 60.9%（P ＜ 0.01）。 1組較2組、3組、4組抗體水平消長(zhǎng)慢。

乳鴿21 d測(cè)定的ND-HI母源抗體，1組較2組、3組、4組提高了 19%（P ＜ 0.05）、245%（P ＜0.01）、216%（P ＜ 0.01），2組較 3組、4組提高了190%（P ＜ 0.01）、216%（P ＜ 0.01），3 組與 4 組差異不顯著（P＞0.05）。1組較2組、3組、4組抗體水平消長(zhǎng)慢。

試驗(yàn)結(jié)果表明，種鴿ND-HI抗體消長(zhǎng)影響乳鴿ND-HI母源抗體消長(zhǎng)，并呈正相關(guān)。母鴿抗體在≥8 log2時(shí)，其哺喂的14 d乳鴿母源抗體在≥5 log2保護(hù)的臨界值內(nèi)，這將減少存欄乳鴿的易感機(jī)率。留種乳鴿此時(shí)接種ND疫苗為最佳時(shí)期，因14日齡乳鴿免疫系統(tǒng)發(fā)育完全，并且乳鴿ND-HI母源抗體也在保護(hù)范圍內(nèi)，此時(shí)免疫是科學(xué)合理的。

3 討論

APS為中草藥提取物，用于獸藥分子量為80～160千道爾頓，具有生物活性并能提高機(jī)體免疫水平，飲水中添加APS，在肉鴿場(chǎng)簡(jiǎn)單可操作。李宏全等（2001）研究表明，不同劑量的APS有提高ND-HI抗體效價(jià)的作用，以5.0 mg/羽的效果最好?？紫榉宓龋?004）在9種中草藥成分對(duì)新城疫Ⅳ疫苗免疫雛雞ND-HI抗體水平的影響研究中表明，免疫后給藥比免疫前ND-HI抗體提高0.3～1 log2，9種中草藥中APS的免疫增強(qiáng)效果最好。本試驗(yàn)也證明，在肉鴿養(yǎng)殖中，ND免疫后，通過飲水中添加APS，可延長(zhǎng)種鴿高ND-HI（≥8 log2）抗體水平4個(gè)月，14日齡乳鴿ND-HI母源抗體還在保護(hù)值范圍內(nèi)。

仇薪鑫（2017）利用HI試驗(yàn)監(jiān)測(cè)雞群ND免疫后抗體水平的變化，評(píng)價(jià)疫苗免疫效果，及時(shí)調(diào)整免疫程序；分析不同時(shí)間抗體，作為預(yù)警預(yù)報(bào)和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的依據(jù)。試驗(yàn)證明種雞場(chǎng)ND-HI抗體水平在12 log2完全保護(hù)，并且增加的經(jīng)濟(jì)效益約為161420元/萬只。種鴿的群體免疫水平與規(guī)?；a(chǎn)相輔相成。本次試驗(yàn)也證明添加APS后，母鴿ND-HI高抗體水平消長(zhǎng)變慢，母源抗體來源鴿蛋和鴿乳中，其哺喂的14日齡乳鴿母源ND-HI抗體水平也消減變緩，因此母鴿ND-HI抗體消長(zhǎng)水平與乳鴿ND-HI抗體消長(zhǎng)水平呈正相關(guān)。因此，肉鴿產(chǎn)蛋-孵化-哺喂生產(chǎn)模式下，飲水中添加ASP可增強(qiáng)免疫，并監(jiān)測(cè)母鴿ND-HI抗體水平，對(duì)防控ND起到重要的指導(dǎo)作用。

4 結(jié)論

在肉鴿規(guī)?；B(yǎng)殖中，每只種鴿通過飲水中添加5 mg/d APS，連續(xù)5 d，間隔10 d，每月2次，可保證種鴿免疫后高ND-HI抗體（≥8 log2）持續(xù)4個(gè)月，哺喂的乳鴿14 d抗體也在保護(hù)臨界值內(nèi)（≥5 log2）。