原發(fā)性干燥綜合征合并TSH異常的患者口腔菌群改變的相關(guān)因素研究

黎聲飛

【摘 要】目的：定量分析原發(fā)性干燥綜合征合并TSH異?；颊呓M和健康對(duì)照組口腔內(nèi)真菌菌量，為探尋敏感、快速和準(zhǔn)確的原發(fā)性干燥綜合征合并TSH異常診斷方法及其臨床早期診斷和防治提供有價(jià)值的參考依據(jù)。方法：研究對(duì)象為我院風(fēng)濕科原發(fā)性干燥綜合征合并TSH異常的患者15例，門診診斷為原發(fā)性干燥綜合征20例，在我院體檢中心健康人群20例，收集受試者的唾液含漱液樣本，采用實(shí)時(shí)熒光PCR方法，定量比較兩組口腔各致病真菌數(shù)量。結(jié)果：口腔含漱液中熱帶念珠菌和近平滑念珠菌每克基因中拷貝數(shù)對(duì)數(shù)的均值原發(fā)性干燥綜合征合并TSH異常的患者，原發(fā)性干燥綜合征分別為10.6±1.07和9.47±4.86，明顯高于健康對(duì)照組的8.30±3.82和5.24土6.05，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：白色念珠菌仍是原發(fā)性干燥綜合征合并TSH異常的患者主要檢出念珠菌，但原發(fā)性干燥綜合征合并TSH異常的患者口腔內(nèi)熱帶念珠菌和近平滑念珠菌的數(shù)量明顯高于對(duì)照組，本研究為原發(fā)性干燥綜合征合并TSH異常的患者臨床有針對(duì)性的用藥提供一定的參考。

【關(guān)鍵詞】干燥綜合征，口腔黏膜;真菌

【中圖分類號(hào)】R781.33【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】1672-3783（2019）10-03--01

干燥綜合征（ss）是一種主要累及外分泌腺體的慢性炎癥性自身免疫病。由于其免疫性炎癥反應(yīng)主要表現(xiàn)在外分泌腺體的上皮細(xì)胞，故又名自身免疫性外分泌腺體上皮細(xì)胞炎或自身免疫性外分泌病。臨床上主要表現(xiàn)為干燥性角結(jié)膜炎，口腔干燥征，還可累及其他多個(gè)器官如甲狀腺，腎，呼吸系統(tǒng)及消化系統(tǒng)等，干燥綜合征的病因和發(fā)病機(jī)制尚未完全清楚，在遺傳，病毒感染及細(xì)菌感染等多種因素共同作用下，導(dǎo)致機(jī)體細(xì)胞免疫和體液免疫的異常反應(yīng)。本研究旨在通過測定和分析原發(fā)性干燥綜合征合并TSH異常的患者口腔菌群改變的相關(guān)因素，探討其與原發(fā)性干燥綜合征合并TSH異常的相關(guān)性，從而為原發(fā)性干燥綜合征合并TSH異常的患者提供風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測指標(biāo)，并為進(jìn)一步預(yù)防治療提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料：選取2016年12月-2018年12月期間符合2002年修訂的干燥綜合征的國際分類標(biāo)準(zhǔn)在我院住院診斷原發(fā)性干燥綜合征合并TSH異常的患者15例，門診診斷為原發(fā)性干燥綜合征20例，在我院體檢中心健康人群20例，3組患者3個(gè)月內(nèi)均未服用抗生素，未行牙周治療，非妊娠哺乳期婦女。

1.2 方法：采用我院風(fēng)濕科實(shí)險(xiǎn)室免疫化學(xué)法測定患者抗SSA，抗SSB ，血沉，CRP，檢查記錄口腔疾病狀況，用干棉球擦去受試牙的齦上菌斑，無菌取菌環(huán)采集齦下菌斑，取0.1ml分別接種在專用厭氧培養(yǎng)基、二氧化碳噬纖維菌、MS、乳桿菌、放線菌、大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌選擇性培養(yǎng)基上，厭氧菌培養(yǎng)5 d，微需氧菌培養(yǎng)2d。用梅里埃全自動(dòng)微生物鑒定儀進(jìn)行細(xì)菌鑒定，并進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。并收集整理患者其他臨床資料.

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有數(shù)據(jù)資料采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示;計(jì)數(shù)資料比較采用x2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

2 結(jié)果

2.1 各樣品FQ—PCR檢測結(jié)果及分析 根據(jù)FQ.PCR原始檢測結(jié)果，根據(jù)DNA濃度，換算為每克DNA中各基因的拷貝數(shù)的對(duì)數(shù)，比較兩組樣本中各致病真菌主要致病菌數(shù)量差異。白色念株菌、克柔念珠菌、熱帶念珠菌、光滑念珠菌、近平滑念珠菌5種念珠菌每克基因中拷貝數(shù)對(duì)數(shù)的均值pSS組均高于健康對(duì)照組，其中熱帶念珠菌和近平滑念珠菌基因拷貝數(shù)在兩組間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.2 氟康唑敏感菌株在兩組間FQ—PCR檢測結(jié)果比較氟康唑抗真菌譜（包括白色念株菌、近平滑念珠菌、熱帶念珠菌、都柏林念珠菌）對(duì)光滑念珠菌的活性降低，對(duì)克柔念珠菌無活性。根據(jù)各菌屬對(duì)氟康唑的抗藥性，分別計(jì)算在試驗(yàn)組和健康對(duì)照組中定量結(jié)果差異，結(jié)果顯示氟康唑敏感菌株在兩組間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 討論

干燥綜合征又名自身免疫性外分泌腺體上皮細(xì)胞炎，是一個(gè)主要累及外分泌腺體的慢性炎癥性自身免疫病。SS免疫性炎癥反應(yīng)主要表現(xiàn)在外分泌腺體的上皮細(xì)胞。臨床除因唾液腺和淚腺受損功能下降而出現(xiàn)口干、眼干外，尚有腺體外其他器官受累而出現(xiàn)多系統(tǒng)損害的癥狀.其血清中有多種自身抗體和高免疫球蛋白[1]。橋本甲狀腺炎又稱慢性淋巴細(xì)胞性甲狀腺炎。是一種較常見的器官特異性自身免疫性甲狀腺疾病。其病理變化主要是甲狀腺組織內(nèi)淋巴細(xì)胞浸潤。臨床上患者出現(xiàn)明顯口腔干燥，嚴(yán)重者感舌、頰及咽喉部黏膜灼熱，味覺失常，言語、咀嚼及吞咽均很困難[2]。由于唾液減少，患者易合并真菌感染，感染率為51%-87%，而且真菌感染病情易反復(fù)，不易控制。目前臨床上采用的有關(guān)念珠菌感染的實(shí)驗(yàn)室檢測和鑒定方法以涂片和培養(yǎng)為主，存在一定局限性，如真菌培養(yǎng)耗時(shí)長，約需1～4周，而且容易受到外界污染。近年來，隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，很多方法都可以用來真菌定量研究，近年來，國內(nèi)外許多學(xué)者開始研究利用熒光定量PCR技術(shù)檢測真菌。本研究同時(shí)在原發(fā)性干燥綜合征合并TSH異常的患者患者口腔真菌感染的定量分析方面進(jìn)行了有益的探索，可實(shí)現(xiàn)對(duì)口腔念珠菌感染菌種的鑒定和定量分析一步完成，有助于該疾病的早期診斷，避免漏診。對(duì)氟康唑敏感和不敏感菌株進(jìn)行分組后統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)，原發(fā)性干燥綜合征合并TSH異常的患者組的氟康唑敏感性菌種總量比健康對(duì)照組高，且兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），而非氟康唑敏感性菌種兩組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。上述結(jié)果對(duì)干燥綜合征伴發(fā)真菌感染的臨床用藥選擇提供了一定的依據(jù)，即臨床醫(yī)師可根據(jù)不同患者口內(nèi)念珠菌的檢出情況有針對(duì)性地選擇抗真菌藥。

參考文獻(xiàn)

顧東風(fēng)，楊文杰等.干燥綜合征的患病率[J].中華風(fēng)濕病雜志，2015，22（4）：181 -186.

吳善玉，全貞玉.干燥綜合征與TSH的相關(guān)性[J].中國慢性病預(yù)防與控制，2013，22（1）：50 -52.