索氏抽提法測(cè)美國(guó)大豆粗脂肪含量的影響因素分析

楚屹然　郭靜　盧美娟

摘 要：本文以GB 5009.6-2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中脂肪的測(cè)定》第一法索氏抽提法為依據(jù)，以美國(guó)大豆為研究對(duì)象，在測(cè)定大豆粗脂肪時(shí)，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)中變量條件所造成的檢測(cè)結(jié)果差異進(jìn)行對(duì)比分析。結(jié)果表明，在其他條件相同時(shí)，大豆粉碎細(xì)度越小，其粗脂肪含量測(cè)得值越高;抽提時(shí)間越長(zhǎng)，其粗脂肪含量測(cè)得值越高;用無(wú)水乙醚作抽提劑比用石油醚作抽提劑，測(cè)得的粗脂肪含量值高。用此國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法锝出的大豆粗脂肪檢測(cè)結(jié)果應(yīng)備注標(biāo)準(zhǔn)中未具體說(shuō)明的試樣粉碎細(xì)度、抽提試劑、抽提時(shí)間等具體檢測(cè)條件。

關(guān)鍵詞：美國(guó)大豆;粗脂肪;索氏抽提

Abstract：Based on the first method traditional soxhlet extraction of GB 5009.6-2016 National food safety standards The determination of fat in food， Soybeans in the United States as the research object， In the determination of soybean crude fat， can be caused by the variable condition of standard test results differences were analyzed. The results show that， other conditions being the same： soybean crushing fineness is smaller， the higher crude fat content measured values; The longer the extraction time， the crude fat content measured value is higher; With anhydrous diethyl ether as extraction agent than using petroleum ether as extraction agent， the crude fat content of measured value is high. With the national standard method quoted soybean crude fat test results should note in the standard does not specify the sample grinding fineness， extraction reagent， extraction time and other specific testing conditions.

Key words：U.S. soybean; Crude fat; Soxhlet extraction

中圖分類(lèi)號(hào)：TS207.3

粗脂肪含量是油料作物的重要質(zhì)量指標(biāo)，而我國(guó)進(jìn)口美國(guó)的大豆幾乎全部用來(lái)生產(chǎn)大豆油、豆粕及其他副產(chǎn)品，因此準(zhǔn)確測(cè)定大豆粗脂肪含量，對(duì)計(jì)算大豆出油率、以質(zhì)論價(jià)和評(píng)定車(chē)間生產(chǎn)工藝效果都有非常重要的意義。

大豆粗脂肪含量的測(cè)定方法有多種，但通常采用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 5009.6-2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中脂肪的測(cè)定》[1]第一法索氏抽提法，也是仲裁方法，該方法具有實(shí)驗(yàn)成本低、操作簡(jiǎn)單、重現(xiàn)性好、結(jié)果準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)。但該方法也存在明顯的缺點(diǎn)：①檢驗(yàn)時(shí)間長(zhǎng)，僅抽提這一步就需要6 h以上。②測(cè)定結(jié)果影響因素多，如抽提試劑、抽提時(shí)間、粉碎細(xì)度、抽提樣含水量、抽提液回流速度等[2-6]，因此在檢測(cè)時(shí)應(yīng)對(duì)上述影響因素進(jìn)行詳細(xì)規(guī)定。國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 5009.6-2016對(duì)抽提試劑的規(guī)定是在無(wú)水乙醚和石油醚中自選，抽提時(shí)間6～10 h，對(duì)試樣粒度未做說(shuō)明，這就存在由于實(shí)驗(yàn)人員操作條件的不同，給檢驗(yàn)結(jié)果造成一定影響。本文以國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)索氏抽提方法為基礎(chǔ)，用不同的抽提試劑和抽提時(shí)間，對(duì)不同粉碎細(xì)度的美國(guó)大豆樣品進(jìn)行測(cè)定，分析其粉碎細(xì)度、抽提試劑、抽提時(shí)間對(duì)抽提效果的影響，探討大豆樣品在測(cè)定粗脂肪時(shí)更加準(zhǔn)確可靠的樣品制備和抽提方法，填補(bǔ)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法在具體針對(duì)大豆粗脂肪檢測(cè)中的不足之處有重要意義。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

（1）材料。美灣大豆、美西大豆;無(wú)水乙醚（分析純）;石油醚（分析純，沸程30～60 ℃）。

（2）儀器。JFSD-100植物粉碎磨，上海嘉定糧油儀器有限公司生產(chǎn);FW100高速萬(wàn)能粉碎機(jī)，天津市泰斯特儀器有限公司生產(chǎn);ZM200萊弛磨，德國(guó)Retsch公司生產(chǎn);玻璃索氏抽提裝置;DHG-9145A電熱鼓風(fēng)干燥箱，上海一恒科學(xué)儀器有限公司生產(chǎn);AL204分析天平（感量0.1 mg），梅特勒托利多生產(chǎn);DZKW-4恒溫水浴鍋，北京中興偉業(yè)儀器有限公司生產(chǎn)。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)法

大豆粗脂肪的測(cè)定方法按照GB 5009.6-2016執(zhí)行，扦樣、分樣按照GB 5491-1985執(zhí)行。

1.2.2 樣品制備

①抽提瓶在105 ℃烘箱中烘至恒重，取出，置于干燥器中冷卻后稱(chēng)量，精確至0.000 1 g。②取去除雜質(zhì)的美灣大豆和美西大豆樣品各100 g，使用萊馳磨制樣，樣品95%以上通過(guò)60目篩網(wǎng)，裝入樣品袋中備用。取去除雜質(zhì)的美灣大豆和美西大豆樣品各100 g，使用植物磨+萬(wàn)能磨粉碎的方式制樣（植物磨加裝20目篩網(wǎng)粉碎后，再用萬(wàn)能磨粉碎3次，每次粉碎5 s），樣品75.6%以上通過(guò)40目篩網(wǎng)，裝入樣品袋中備用。2種粉碎方式分別粉碎的是混合均勻的同一樣品，在同一條件下進(jìn)行試驗(yàn)。③取備用樣品，用濾紙桶（濾紙筒底部塞一層脫脂棉）稱(chēng)取試樣2～5 g，精確至0.000 1 g（濾紙筒上部塞一層脫脂棉），做好編號(hào)。

1.2.3 樣品抽提與烘干

①將濾紙筒放入索氏抽提器的抽提筒內(nèi)，連接已干燥至恒重的接收瓶，由抽提器冷凝管上端加入無(wú)水乙醚或石油醚至瓶?jī)?nèi)容積的2/3處，于水浴上加熱，使無(wú)水乙醚或石油醚不斷回流抽提。提取結(jié)束時(shí)，抽提至抽提管內(nèi)的提取液用磨砂玻璃棒檢查無(wú)油斑表明提取完畢。②取下接收瓶，回收無(wú)水乙醚或石油醚，待接收瓶?jī)?nèi)溶劑剩余1～2 mL時(shí)在水浴上蒸干，用脫脂棉蘸無(wú)水乙醚擦凈抽提瓶外部，再于（100±5）℃干燥1 h，放干燥器內(nèi)冷卻0.5 h后稱(chēng)量。重復(fù)以上操作直至恒重（2次稱(chēng)量的差不超過(guò)2 mg），抽提瓶增加的質(zhì)量即為粗脂肪的質(zhì)量。③抽提過(guò)程用不同的抽提試劑和抽提時(shí)間，對(duì)不同粉碎細(xì)度的美國(guó)大豆樣品進(jìn)行測(cè)定。抽提試劑分別用無(wú)水乙醚和石油醚，抽提時(shí)間分別做抽提5、8 h和10 h，粉碎方式分別用萊池磨制樣和植物磨+萬(wàn)能磨粉碎的方式制樣（見(jiàn)樣品制備）。3個(gè)變量進(jìn)行組合，完成抽提試驗(yàn)。

1.3 粗脂肪濕基含量

粗脂肪濕基含量計(jì)算公式：

式（1）中，X-濕基粗脂肪含量，單位%;m2-干燥后抽提物與抽提瓶的質(zhì)量，單位g;m1-抽提瓶的質(zhì)量，單位g;m-試樣的質(zhì)量，單位g。

1.4 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理方法

所有實(shí)驗(yàn)重復(fù)2次，如2次實(shí)驗(yàn)結(jié)果之差不超過(guò)0.4%，則取2次測(cè)定的算術(shù)平均值為測(cè)定結(jié)果。如果2次實(shí)驗(yàn)結(jié)果之差超過(guò)0.4%，則另取2份試樣進(jìn)行測(cè)定。如測(cè)定結(jié)果仍超過(guò)0.4%，而前兩次測(cè)定平均值與后兩次測(cè)定值之差不超過(guò)0.4%，則取4次測(cè)定的平均值作為測(cè)定結(jié)果。

2 結(jié)果與分析

2.1 同一方法同一樣品不同檢測(cè)機(jī)構(gòu)的粗脂肪檢測(cè)結(jié)果分析

將一份美西大豆實(shí)驗(yàn)樣品，混合均勻后，用標(biāo)準(zhǔn)分樣器均勻分成6份同時(shí)寄往6家不同的第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)，這6家檢測(cè)機(jī)構(gòu)的檢測(cè)依據(jù)都是GB 5009.6-2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中脂肪的測(cè)定》第一法索氏抽提法，給出的檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1。為了考察檢測(cè)結(jié)果的一致性，本文將A機(jī)構(gòu)檢測(cè)結(jié)果與其他機(jī)構(gòu)檢測(cè)結(jié)果之間的相對(duì)相差進(jìn)行了計(jì)算，計(jì)算結(jié)果見(jiàn)表1。

2.2 不同條件下大豆粗脂肪含量檢測(cè)結(jié)果對(duì)比

選取兩個(gè)不同輪船的美西大豆和美灣大豆作為試驗(yàn)樣品，用不同的粉碎細(xì)度、抽提試劑和抽提時(shí)間，對(duì)不同粉碎細(xì)度的美西大豆樣品進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表2和表3。在GB 5009.6-2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中脂肪的測(cè)定》第一法索氏抽提法7精密度中明確說(shuō)明，在重復(fù)性條件下獲得的2次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過(guò)算術(shù)平均值的10%，也就是方法的相對(duì)相差不超過(guò)10%，但通過(guò)表1可知，A第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)的粗脂肪檢測(cè)結(jié)果與D、E、F第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)的檢測(cè)結(jié)果的相對(duì)相差已經(jīng)超過(guò)方法的正常允許范圍，尤其是A機(jī)構(gòu)與F機(jī)構(gòu)，其結(jié)果相對(duì)相差超出了允許值的50%，說(shuō)明國(guó)標(biāo)方法在大豆粗脂肪檢測(cè)的實(shí)際應(yīng)用中存在很大的操作條件選取誤差，在用此國(guó)標(biāo)方法報(bào)出的大豆粗脂肪檢測(cè)結(jié)果中應(yīng)備注標(biāo)準(zhǔn)中未定量規(guī)定但影響檢測(cè)結(jié)果的條件。

由表2、表3可知，其他條件相同時(shí)，大豆粉碎細(xì)度越小，其粗脂肪含量測(cè)得值越高;其他條件相同時(shí)，用無(wú)水乙醚進(jìn)行抽提比用石油醚進(jìn)行抽提，測(cè)得的粗脂肪含量更高;其他條件相同時(shí)，抽提時(shí)間越長(zhǎng)，其粗脂肪含量測(cè)得值越高。因此，在使用GB 5009.6-2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中脂肪的測(cè)定》第一法索氏抽提法進(jìn)行大豆粗脂肪測(cè)定時(shí)，測(cè)定結(jié)果受試樣粉碎細(xì)度、抽提時(shí)間、抽提試劑的影響，在給出結(jié)果時(shí)，應(yīng)標(biāo)注上述條件。

3 結(jié)論

采用GB 5009.6-2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中脂肪的測(cè)定》第一法索氏抽提法進(jìn)行大豆粗脂肪測(cè)定時(shí)，易受試樣粉碎細(xì)度、抽提時(shí)間和抽提試劑的影響，造成不同實(shí)驗(yàn)室之間測(cè)定結(jié)果差異明顯。試驗(yàn)表明，大豆粉碎細(xì)度越小，抽提時(shí)間越長(zhǎng)，其粗脂肪含量測(cè)得越高;用無(wú)水乙醚進(jìn)行抽提比用石油醚進(jìn)行抽提，測(cè)得粗脂肪含量更高。在使用上述國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法給出結(jié)果時(shí)，應(yīng)標(biāo)注試樣的粉碎細(xì)度、抽提時(shí)間、抽提試劑等條件。

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