摘 要：目的：本次主要對黃芩苷在實驗之中的提取方法展開分析，了解HPLC（高效液相）含量的相關(guān)測定狀況。方法：經(jīng)正交實驗設(shè)計，考查指標(biāo)為黃芩苷總量，應(yīng)用最佳的提取方法，應(yīng)用HPLC法對黃芩苷的含量展開相應(yīng)的測定。結(jié)果：提取的次數(shù)對水煎煮提取的工藝產(chǎn)生的極為明顯的影響，其中提取的時間和溶劑倍數(shù)并沒有明顯的差異?？紤]提取時間、能源成本，最佳水煎煮提取方法是藥材量水煎煮的12倍，進行三次，每次1小時。在轉(zhuǎn)移率實驗之中，平均轉(zhuǎn)移率超過77.5%，RSD為1.60%;提取方法合理且穩(wěn)定。在工藝驗證實驗之中，黃芩苷含量為89.9%，RSD為1.15，篩選的工藝合理且穩(wěn)定，可進行控制。在0.04655-0.4655ug范圍之內(nèi)其線性關(guān)系良，其加樣回收率超過99.0%。討論：這種提取黃芩苷的方法穩(wěn)定且合理，在實驗中的可實踐性高。應(yīng)用HPLC進行含量測定，可保障數(shù)據(jù)結(jié)果的準(zhǔn)確性和精準(zhǔn)性，且實驗重復(fù)性佳，可在黃芩提取物含量控制之中應(yīng)用該方法。

關(guān)鍵詞：HPLC;黃芩苷;含量測定;提取方法

黃芩為唇形科植物，黃芪本身可起到瀉火解毒、清熱燥濕、安胎以及止血的效果。黃芩中主要是以黃芩苷、黃芩苷元以及漢黃芩素等成分，其中黃芩苷是最為有效的成分，主要可起到抗過敏、抗腫瘤和抗炎的效果。近些年來，臨床的研究發(fā)現(xiàn)黃芩苷可有效的對HIV病毒感染、復(fù)制產(chǎn)生阻止作用，成為了艾滋治療的有效藥物[1]。為了保障黃芩能夠更好的被利用，本次主要是應(yīng)用黃芩苷總量作為本次的考察指標(biāo)，對黃芩苷在實驗之中的提取方法展開分析，了解HPLC（高效液相）含量的相關(guān)測定狀況。

1 儀器和試藥

1.1 儀器

本次主要是應(yīng)用高效液相色譜儀、超聲波清洗儀、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、循環(huán)水真空泵、真空干燥箱、電子恒溫水浴鍋。應(yīng)用的試劑為：乙醇、磷酸、氫氧化鈉、鹽酸、水（超純水）、甲醇。

1.2 藥品

本次主要是應(yīng)用黃芩藥材，藥材主要是購買于藥材市場，經(jīng)過鑒定為正品的黃芩，黃芩苷對照品。

1.3 方法

本次實驗設(shè)計主要是應(yīng)用正交實驗展開，水煮提取因受到多個因素產(chǎn)生的影響，其中主要包括由提取時間、溶劑倍數(shù)以及提取次數(shù)。在單個因素實驗的基礎(chǔ)之上，對三個因素進行分別設(shè)置，其中主要是應(yīng)用L9正交表，誤差項極為空白列，將黃芩苷干膏之中把黃芩苷總量作為本次考察的指標(biāo)，將黃芩苷提取重量和黃芩苷百分含量進行相乘，極為黃芩苷的總量。在進行樣品制備的時候，需要準(zhǔn)備好9份黃芩藥材，每一份均為80克。按照正交實驗表之中列出的條件，先進行水煎煮，300目濾布進行過濾，濾液濃縮成400毫升，冷卻到和室溫保持一致，之后進行抽濾，將濃鹽酸進行適量的加入，之中pH值在1-2之間。把沉淀防治在80攝氏度水浴之中保持1小時，室溫靜置，進行抽濾。沉淀應(yīng)用蒸餾水洗滌，直至pH值為中性。在70攝氏度的狀態(tài)之下進行減壓干燥，之后對其進行稱重。在轉(zhuǎn)移率實驗之中，準(zhǔn)備好3份藥材，每一份為240克，按照工藝選定的最佳條件進行制備，對黃芩苷的轉(zhuǎn)移率進行測定。干膏重量和干膏之中黃芩苷含量相乘，將所得數(shù)據(jù)除以藥材重量和藥材之中的黃芩苷的含量，即為黃芩苷的轉(zhuǎn)移率。在工藝驗證實驗之中，取3份黃芩藥材，每一份為500克，選用優(yōu)選的提取方法進行純化工藝。黃芩苷的含量進行測定的時候，取黃芩苷標(biāo)準(zhǔn)品溶液、波長范圍掃描200-400nm，濃度為46.52ug/mL，最強吸收為277nm，將其作為檢測波長。

2 結(jié)果

經(jīng)過實驗統(tǒng)計計算、方差結(jié)果分析展開判斷，提取的次數(shù)對水煎煮提取的工藝產(chǎn)生的極為明顯的影響，其中提取的時間和溶劑倍數(shù)并沒有明顯的差異。考慮提取時間、能源成本，最佳水煎煮提取方法是藥材量水煎煮的12倍，進行三次，每次1小時。在轉(zhuǎn)移率實驗之中，平均轉(zhuǎn)移率超過77.5%，RSD為1.60%;提取方法合理且穩(wěn)定。在工藝驗證實驗之中，黃芩苷含量為89.9%，RSD為1.15，篩選的工藝合理且穩(wěn)定，可進行控制。在0.04655-0.4655ug范圍之內(nèi)其線性關(guān)系良，其加樣回收率超過99.0%。

3 討論

國內(nèi)關(guān)于黃芩苷的提供方法研究文獻有諸多報道，提取工藝主要是由超濾法、溫浸法、微波法以及煎煮法。在實際工業(yè)生產(chǎn)之中，黃芩大多是是應(yīng)用水提酸沉法進行提取，因此黃芩苷的提取方法、制備方法在臨床研究之中變得越加重要[2]。在本次研究之中，經(jīng)過實驗統(tǒng)計計算、方差結(jié)果分析展開判斷，提取的次數(shù)對水煎煮提取的工藝產(chǎn)生的極為明顯的影響，其中提取的時間和溶劑倍數(shù)并沒有明顯的差異?？紤]提取時間、能源成本，最佳水煎煮提取方法是藥材量水煎煮的12倍，進行三次，每次1小時。在轉(zhuǎn)移率實驗之中，平均轉(zhuǎn)移率超過77.5%，RSD為1.60%;提取方法合理且穩(wěn)定。在工藝驗證實驗之中，黃芩苷含量為89.9%，RSD為1.15，篩選的工藝合理且穩(wěn)定，可進行控制。在0.04655-0.4655ug范圍之內(nèi)其線性關(guān)系良，其加樣回收率超過99.0%。概而言之，這種提取黃芩苷的方法穩(wěn)定且合理，在實驗中的可實踐性高。應(yīng)用HPLC進行含量測定，可保障數(shù)據(jù)結(jié)果的準(zhǔn)確性和精準(zhǔn)性，且實驗重復(fù)性佳，可在黃芩提取物含量控制之中應(yīng)用該方法。

參考文獻：

[1]馬敏怡.高效液相色譜法測定解毒祛痰濃縮丸中黃芩苷的含量[J].新疆中醫(yī)藥，2017，35（06）：39-42.

[2]楊必浩，周應(yīng)碩.高效液相色譜法同時測定龍膽瀉肝片中龍膽苦苷、梔子苷和黃芩苷的含量[J].系統(tǒng)醫(yī)學(xué)，2017，2（08）：127-131.

作者簡介：

井子伊禧（1985- ），女，彝族，四川金陽人，當(dāng)前職務(wù)：中藥室副主任，當(dāng)前職稱：助理工程師，本科學(xué)歷，研究方向：中藥檢測、醫(yī)藥化工。