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      核酸檢驗(yàn)與酶聯(lián)免疫檢測(cè)血液病毒的應(yīng)用及檢驗(yàn)準(zhǔn)確率分析

      2019-10-22 05:25:30侯敖雪
      中國(guó)醫(yī)藥指南 2019年25期
      關(guān)鍵詞:免疫檢測(cè)窗口期核酸

      侯敖雪

      (營(yíng)口經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)中心醫(yī)院(營(yíng)口市第六人民醫(yī)院),遼寧 營(yíng)口 115007)

      輸血為HBV、HCV感染的主要途徑,因此強(qiáng)化抗原、抗體的檢驗(yàn),可顯著降低血液輸血中的病毒感染。隨著醫(yī)療水平的不斷提高,病毒核酸提取技術(shù)的持續(xù)性完善,促使血液篩查的核酸檢測(cè)措施廣泛應(yīng)用,核酸檢測(cè)技術(shù)相對(duì)于酶聯(lián)免疫檢測(cè)的具有更短的窗口期,可將血液檢測(cè)工作更好的落實(shí),亦降低了檢驗(yàn)的假陽性率[1]。本研究為探討分析核酸檢驗(yàn)與酶聯(lián)免疫檢測(cè)血液病毒的應(yīng)用及檢驗(yàn)準(zhǔn)確率,回顧性本院2015年3月至2016年2月的1000例血液標(biāo)本,分別對(duì)其實(shí)施核酸檢驗(yàn)與酶聯(lián)免疫檢測(cè)檢測(cè),報(bào)道如下。

      1 資料與方法

      1.1 一般資料:選取本院收治的1000例血液標(biāo)本進(jìn)行研究(2015年3月至2016年2月),分別對(duì)其實(shí)施核酸檢驗(yàn)與酶聯(lián)免疫檢測(cè)法檢測(cè),其中男性患者、女性患者各為658例,342例,最大年齡值為61歲,最小年齡值20歲,平均年齡值為(42.64±10.25)歲;每份血液樣品分別放置在7、5 mL真空抗凝管內(nèi),于2~8 ℃下的環(huán)境下進(jìn)行保存。真空抗凝管(5、7 mL)的血液樣品需在3 h內(nèi)進(jìn)行血漿分離,之后予以核酸檢測(cè)措施。真空抗凝管(5、7 mL)的血液樣品需在24 h內(nèi)進(jìn)行血漿分離,之后予以酶聯(lián)免疫檢測(cè)措施。

      1.2 方法:核酸檢測(cè):在25 ℃的室溫下,對(duì)于真空抗凝管(5 mL)的血液樣本予以離心處理,時(shí)間為20 min,在2~8 ℃的冰箱內(nèi)保存[2]。在常規(guī)檢測(cè)合格后,放置儀樣品條架上,依據(jù)分配試劑程序進(jìn)行操作;加600 μL結(jié)合液及50 μL的磁珠在A號(hào)96孔,加100 μL的洗脫液在B號(hào)的96孔深孔板,對(duì)于血液樣本進(jìn)行裂解,并注意污染,將樣品裂解后,采取核酸提取儀于A號(hào)96孔深孔板,B號(hào)的96孔深孔板將核酸予以提取,同時(shí)配備核酸擴(kuò)增的反應(yīng)液。依據(jù)樣本的劑量,依據(jù)4級(jí)核酸的擴(kuò)散程序措施,于八聯(lián)管中將核酸予以提取后的結(jié)合液,將其置于PCR儀器上進(jìn)行擴(kuò)增措施,并對(duì)結(jié)果詳細(xì)記錄,隨后將呈現(xiàn)陽性的血液樣本選出予以拆分試驗(yàn),從而確定樣本的陽性率。酶聯(lián)免疫檢測(cè):在25 ℃的室溫下,于真空抗凝管(7 mL)的血液樣本予以離心處理,時(shí)間為20 min,在2~8 ℃的冰箱內(nèi)保存。離心處理結(jié)束后,采取全自動(dòng)加樣儀進(jìn)行自動(dòng)加樣措施,并行分析,對(duì)于檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行記錄。

      1.3 觀察指標(biāo):觀察1000例血液標(biāo)本分別經(jīng)核酸檢驗(yàn)與酶聯(lián)免疫檢測(cè)法檢測(cè)的結(jié)果。

      1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:實(shí)施統(tǒng)計(jì)學(xué)SPSS17.0軟件處理,當(dāng)對(duì)比值具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義時(shí),計(jì)數(shù)資料采用例數(shù)和百分比(%)表示,組間行χ2檢驗(yàn),P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

      2 結(jié)果

      本文研究中,在對(duì)患者乙型肝炎病毒(HBV)行核酸檢測(cè)中,其檢測(cè)陽性率為3.00%(30/1000),顯著高于行酶聯(lián)免疫法檢測(cè)的陽性率為1.20%(12/1000),P<0.05;其于丙型肝炎病毒(HCV)檢測(cè)中,其核酸檢測(cè)的陽性率為1.80%(18/1000),與酶聯(lián)免疫法檢測(cè)的陽性率為1.60%(16/1000),對(duì)比無顯著差異,P>0.05。

      表1 對(duì)比HBV的核酸檢測(cè)、酶聯(lián)免疫法檢測(cè)的結(jié)果

      表2 對(duì)比HCV的核酸檢測(cè)、酶聯(lián)免疫法檢測(cè)的結(jié)果

      3 討 論

      近年來,病毒標(biāo)志物的檢測(cè)主要為對(duì)抗原、抗體進(jìn)行科學(xué)的檢測(cè)[3],于病毒侵入機(jī)體至可檢測(cè)到的病毒抗原或抗體的過程,在臨床中定義為病毒感染窗口期。于血液檢測(cè)中,血清學(xué)檢測(cè)的技術(shù)具有較長(zhǎng)的窗口期[4],于處在窗口期的血液病毒的結(jié)果完全呈現(xiàn)陰性,然而此時(shí)患者機(jī)體已存在病毒感染[5-6],且復(fù)制能力較強(qiáng),因此如何將患者的窗口期進(jìn)行縮短,為臨床中提高檢測(cè)陽性率的關(guān)鍵[7-8]。

      在對(duì)患者的血液病毒進(jìn)行檢測(cè)時(shí),其核酸檢測(cè)技術(shù)不斷完善,且具有較高的特異度、靈敏度。本文研究數(shù)據(jù)顯示,本文研究中,在對(duì)患者乙型肝炎病毒(HBV)行核酸檢測(cè)中,其檢測(cè)陽性率為3.00%(30/1000),顯著高于行酶聯(lián)免疫法檢測(cè)的陽性率為1.20%(12/1000),P<0.05;其于丙型肝炎病毒(HCV)檢測(cè)中,其核酸檢測(cè)的陽性率為1.80%(18/1000),與酶聯(lián)免疫法檢測(cè)的陽性率為1.60%(16/1000),對(duì)比無顯著差異,P>0.05,表明核酸檢測(cè)的效果更佳,本研究對(duì)于出現(xiàn)漏診的原因進(jìn)行分析,其乙肝酶聯(lián)免疫檢測(cè)法具有較長(zhǎng)的窗口期,故導(dǎo)致漏檢的概率顯著提高,且HBV存在變異株及具有一定的隱匿性,亦降低了診斷的準(zhǔn)確率。

      總而言之,在對(duì)患者進(jìn)行血液病毒的檢測(cè)時(shí),其行核酸檢驗(yàn)與酶聯(lián)免疫檢測(cè)的效果均顯著,可發(fā)揮其優(yōu)勢(shì),但臨床中建議兩種檢測(cè)方案聯(lián)合應(yīng)用,以此提高檢測(cè)的準(zhǔn)確度,值得在臨床中推廣實(shí)施。

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